硫酸右旋糖酐通过影响LOX抑制人胃癌细胞侵袭和迁移的作用研究

发布时间：2018-07-02 07:43

  本文选题：硫酸右旋糖酐 + 人胃癌细胞　； 参考：《宁夏医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的本研究主要阐述在低氧条件下硫酸右旋糖酐(DS)对人胃癌细胞(BGC-823)的抑制作用并探讨DS是否通过影响LOX表达抑制人胃癌细胞(BGC-823)细胞的侵袭和迁移。方法1、在常氧条件下培养BGC-823细胞,通过CCK8实验方法检测DS、BAPN(LOX活性抑制剂)以及两者联合应用24h对人胃癌细胞(BGC-823)的增殖。2、通过流式细胞仪检测DS对BGC-823细胞的凋亡。3、低氧条件下,应用侵袭和迁移实验检测比较DS、BAPN以及两者联合应用后对BGC-823细胞侵袭和迁移的影响。4、将BGC-823细胞分为对照组(PBS)与实验组(DS),在低氧条件下培养不同时间(2h、8h、12h、24h),通过免疫细胞化学、免疫细胞荧光、RT-PCR和Western blot法检测LOX、TGF-β的表达水平。5、,DS与BAPN单独或联合应用12h,通过Western blot法检测LOX、TGF-β、E-cadherin的蛋白表达水平。结果1、CCK-8实验表明:梯度浓度的DS和BAPN干预24h后,随着浓度的增加细胞增殖活性逐渐降低;DS与BAPN联合应用后细胞增殖活性降低更加明显。2、流式细胞仪检测表明:梯度浓度的DS干预24h后,随着浓度的增加细胞凋亡率也逐渐增加(P0.05)。3、Transwell实验表明:在低氧条件下,DS、BAPN均能降低BGC-823细胞的侵袭和迁移能力(P0.05);DS和BAPN联合应用比单独应用DS或BAPN,能显著降低BGC-823细胞的侵袭和迁移能力(P0.05)。4、免疫细胞化学和免疫细胞荧光结果均表明:对照组LOX和TGF-β表达呈时间依赖性,DS能显著降低不同时间点LOX和TGF-β的表达,与对照组相比,有统计学差异。5、RT-PCR实验表明:DS能够显著降低不同时间点LOX mRNA和TGF-βmRNA的表达水平,与对照组相比,有统计学差异;DS能够增加不同时间点Smad4 mRNA的表达水平,与对照组相比,有统计学差异。6、Western blotting结果显示:DS能够显著降低不同时间点LOX、TGF-β的蛋白表达水平,与对照组相比,有统计学差异;DS能够增加不同时间点Smad4、E-cadherin蛋白的表达水平,与对照组相比,有统计学差异。将DS与BAPN联合应用12h后,LOX、TGF-β表达显著下降,而E-caherin表达显著增加,与单独应用DS或BAPN相比,有统计学差异。结论1、DS对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响呈浓度依赖性。2、DS能抑制人胃癌细胞侵袭和迁移,DS与BAPN联合应用效果更显著。3、DS能降低人胃癌细胞LOX、TGF-β的表达和增加Smad4、E-cadherin的表达水平,DS与BAPN联合应用效果更明显。LOX与TGF-β蛋白表达呈正相关性。DS可能通过影响LOX而抑制人胃癌细胞的侵袭和迁移。
[Abstract]:The expression level of LOX , TGF - 尾 and E - cadherin in human gastric cancer cells was detected by flow cytometry . Results 1 銆，

本文编号：2089411