AQP-5对结直肠癌细胞生长的影响及机制

发布时间：2018-07-05 00:29

  本文选题：结直肠癌 + AQP-　； 参考：《南方医科大学学报》2017年10期

【摘要】：目的探讨水通道蛋白-5(AQP-5)对细胞增殖及凋亡影响及可能的机制。方法体外常规培养人结直肠癌COLO 205和SW480细胞,取对数生长期的细胞用于实验。通过siRNA技术抑制内源性AQP-5的表达,并经免疫荧光、PCR检测AQP-5-siRNA转染效率,利用MTT法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI和TUNEL检测细胞凋亡情况,RT-PCR和Western blot检测Bax、Bcl-2表达变化。结果在COLO 205和SW480细胞株中,转染AQP-5-siRNA后AQP-5表达下调达90%。MTT分析结果显示,与转染NS-siRNA组相比,转染AQP-5-siRNA组的细胞增殖抑制率显著增加(P0.05);流式细胞分析结果发现,与NSsiRNA组细胞相比,转染AQP-5-siRNA后细胞凋亡率显著增加(P0.05);荧光实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果显示:与转染NS-siRNA组相比,转染AQP-5-siRNA明显提升Bax/Bcl-2 mRNA和蛋白的表达。结论 AQP-5-siRNA可体外促进结直肠癌细胞凋亡,其机制可能与Bax/Bcl表达有关。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of aquaporin-5 (AQP-5) on cell proliferation and apoptosis and its possible mechanism. Methods Colo 205 and SW480 cells were cultured in vitro. The expression of endogenous AQP-5 was inhibited by siRNA technique, and the transfection efficiency of AQP-5-siRNA was detected by immunofluorescence PCR. The cell proliferation ability was detected by MTT assay. The apoptosis of cells was detected by Annexin V-FITC / Pi and Tunel. RT-PCR and Western blot were used to detect the expression of Baxfen Bcl-2. Results in COLO205 and SW480 cell lines, the expression of AQP-5-siRNA was down-regulated by 90% MTT assay. The results of MTT analysis showed that the inhibition rate of cell proliferation was significantly increased compared with that of NS-siRNA group (P0.05), and the results of flow cytometry showed that compared with NSsiRNA group, the inhibition rate of AQP-5 expression was significantly higher than that of NSsiRNA group. After transfection of AQP-5-siRNA, the apoptosis rate increased significantly (P0.05). The results of real-time quantitative RT-PCR and Western blotting showed that the expression of Bax-Bcl-2 mRNA and protein was significantly increased after transfection of AQP-5-siRNA compared with the group of NS-siRNA transfection. Conclusion AQP-5-siRNA can promote apoptosis of colorectal cancer cells in vitro and its mechanism may be related to the expression of Bax / Bcl.
【作者单位】： 西安交通大学医学部第二附属医院普通外科;淄博市中心医院胃肠外科;西安交通大学医学部第一附属医院普通外科;
【基金】：国家自然科学基金(81402583) 陕西省自然科学基金(2014JQ4165) 西安交通大学教育基金(xjj2014077) 西安交大二附院院基金(RC(XM)201402;YJ(QN)201521)~~
【分类号】：R735.3

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