多肽介导肝肿瘤靶向诊断与治疗的纳米载药系统

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多肽介导肝肿瘤靶向诊断与治疗的纳米载药系统

     论文目录

中文摘要第1-13页

ABSTRACT第13-18页

前言第18-20页

第一部分 围绕策略—结合EPR效应和肿瘤细胞外微酸环境第20-66页

 第一章 pHLIP修饰肿瘤细胞膜靶向pH敏感荧光探针纳米载药系统第22-44页

  1 材料和仪器第23-24页

   ·材料和试剂第23页

   ·仪器第23-24页

   ·细胞株第24页

  2. 实验方法第24-30页

   ·萤光探针的化学合成第24-27页

   ·游离萤光探针的pH敏感性第27-28页

   ·肿瘤细胞膜靶向pH敏感萤光探针的合成第28页

   ·肿瘤细胞膜靶向pH敏感萤光探针的pH敏感性第28-29页

   ·体外肿瘤细胞显像效率评价第29-30页

  3 实验结果第30-41页

   ·游离萤光探针的pH敏感性第30-32页

   ·肿瘤细胞膜靶向萤光探针的pH敏感性第32页

   ·游离探针对生理环境下正常细胞和微酸环境下肿瘤细胞的显像差异第32-33页

   ·DPP-DYE7对生理环境正常细胞和微酸环境U87人脑胶质瘤细胞的显像差异第33-35页

   ·DPP-DYE2对生理环境正常细胞和微酸环境下U87人脑胶质瘤细胞的显像差异第35-36页

   ·DPP-DYE9A对生理环境正常细胞和微酸环境U87人脑胶质瘤细胞的显像差异第36-37页

   ·DPP-DYE7对生理环境正常细胞和微酸环境Bel-7402人肝肿瘤细胞的显像差异第37-38页

   ·DPP-DYE2对生理环境正常细胞和微酸环境Bel-7402人肝肿瘤细胞的显像差异第38-39页

   ·DPP-DYE9A对生理环境正常细胞和微酸环境Bel-7402人肝肿瘤细胞的显像差异第39-41页

  4. 讨论第41-42页

   ·游离pH敏感智能萤光探针第41页

   ·肿瘤靶向pH智能萤光诊断纳米载药系统第41-42页

  5. 小结第42-44页

 第二章 pHLIP修饰肝肿瘤靶向载小分子干扰RNA纳米递释系统第44-66页

  第一节 pHLIP修饰肝肿瘤靶向载小分子干扰RNA纳米递释系统的制备和体外研究第45-57页

   1 材料和仪器第45-46页

   ·材料和试剂第45页

   ·仪器第45页

   ·细胞株第45-46页

   2. 实验方法第46-50页

   ·DGL-PEG-pHLIP的合成与结构鉴定第46页

   ·pHLIP-NP/shVEGF纳米载药系统的制备与表征第46-48页

   ·pHLIP-NP/shVEGF的体外评价第48-50页

   3 实验结果第50-56页

   ·DGL-PEG-pHLIP载体~1H-NMR分析结果第50页

   ·DGL-PEG-pHLIP载体UV-Vis分析结果第50-51页

   ·pHLIP-NP/shVEGF的电镜表征第51-52页

   ·pHLIP-NP/shVEGF的粒径和ζ电位表征第52-53页

   ·pHLIP-NP/shVEGF与Bel-7402细胞结合第53-54页

   ·pHLIP-NP/shVEGF在酸性条件下结合Bel-7402细胞和内化机制研究第54-55页

   ·载报告基因的pHLIP-NP/pEGFP在Bel-7402细胞的表达效率评价第55页

   ·pHLIP-NP/shVEGF在Bel-7402细胞上下调VEGF mRNA效率评价第55-56页

   4. 讨论第56页

   5. 小结第56-57页

  第二节 pHLIP修饰肝肿瘤靶向载小分子干扰RNA纳米递释系统的体内分布及药效学评价第57-66页

   1 材料和仪器第57-58页

   ·材料和试剂第57页

   ·仪器第57页

   ·实验动物第57-58页

   2. 实验方法第58-60页

   ·皮下移植肝肿瘤裸鼠模型的建立第58页

   ·小干扰RNA纳米载药系统在皮下移植肝肿瘤裸鼠的体内分布第58页

   ·报告基因纳米载药系统在皮下移植肝肿瘤的定性表达情况第58页

   ·小干扰RNA纳米载药系统对皮下肝肿瘤VEGF mRNA和蛋白的下调第58-59页

   ·小干扰RNA纳米载药系统对皮下肝肿瘤生长抑制效果的评价第59-60页

   ·小干扰RNA纳米载药系统抑制皮下肝肿瘤生长机制研究第60页

   3. 实验结果第60-64页

   ·pHLIP-NP/shVEGF在荷皮下肝肿瘤模型裸鼠的体内分布第60页

   ·载报告基因pRFP的pHLIP-NP/pRFP在荷皮下肝肿瘤模型裸鼠上的肿瘤内表达第60-61页

   ·pHLIP-NP/shVEGF对皮下肝肿瘤VEGF mRNA的下调第61-62页

   ·pHLIP-NP/shVEGF对皮下肝肿瘤VEGF蛋白的沉默第62页

   ·pHLIP-NP/shVEGF对皮下肝肿瘤生长抑制效果的评价第62-63页

   ·pHLIP-NP/shVEGF抑制皮下肝肿瘤生长机制研究第63-64页

   4. 讨论第64页

   5. 小结第64-66页

第二部分 围绕策略二结合EPR效应和肿瘤细胞高表达受体的主动靶向第66-130页

 第三章 新靶向头基的筛选第68-74页

  1 材料和仪器第69页

   ·材料和试剂第69页

   ·仪器第69页

   ·细胞株第69页

  2. 实验方法第69-70页

   ·PAMAM-PEG-T7靶向配体修饰的纳米载体高分子的合成第69-70页

   ·PAMAM-PEG-T12的合成第70页

   ·PAMAM-PEG-Tf的合成第70页

   ·BODIOY-PAMAM-PEG-T7、-T12和-Tf的合成第70页

   ·BODIOY-PAMAM-PEG-T7、-T12和-Tf在Bel-7402细胞上的摄取第70页

  3 实验结果第70-72页

   ·PAMAM-PEG-T7载体~1H-NMR分析结果第70-71页

   ·PAMAM-PEG-T7在Bel-7402细胞上的摄取第71-72页

  4. 讨论第72-73页

   ·靶向头基修饰纳米载体高分子第72页

   ·靶向头基修饰纳米载体高分子的细胞摄取第72-73页

  5. 小结第73-74页

 第四章 T7修饰的肝肿瘤靶向核磁共振造影剂纳米递送系统第74-92页

  第一节 T7修饰的肝肿瘤靶向核磁共振造影剂纳米递送系统的制备和体外研究第75-84页

   1 材料和仪器第75页

   ·材料和试剂第75页

   ·仪器第75页

   ·细胞株第75页

   2. 实验方法第75-77页

   ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7磁共振造影剂纳米载药系统的合成、结构鉴定与体外评价第75-77页

   ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7的体外评价第77页

   3 实验结果第77-81页

   ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7合成~1H-NMR和ICP-AES分析结果第77-78页

   ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7弛豫率评价第78-79页

   ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7溶血性评价第79页

   ·PAMAM-PEG-T7在Bel-7402人肝肿瘤细胞上的摄取第79-80页

   ·PAMAM-PEG-T7在C6大鼠脑胶质瘤细胞上的摄取第80-81页

   4. 讨论第81-83页

   ·合成的载体高分子第81-82页

   ·载体高分子的细胞摄取第82页

   ·载GdDTPA的磁共振诊断系统第82-83页

   5. 小结第83-84页

  第二节 T7修饰的肝肿瘤靶向核磁共振造影剂纳米递送系统的体内分布及诊断效果评价第84-92页

   1 材料和仪器第84页

   ·材料和试剂第84页

   ·仪器第84页

   ·实验动物第84页

   2. 实验方法第84-85页

   ·荷原位移植脑胶质瘤模型裸鼠的建立第84页

   ·PAMAM-PEG-T7在荷皮下移植肝肿瘤模型裸鼠上的体内分布第84-85页

   ·PAMAM-PEG-T7在原位移植脑胶质瘤模型裸鼠上的体内分布第85页

   ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7对皮下移植肝肿瘤的MRI诊断效果评价第85页

   ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7对原位移植脑胶质瘤的诊断效果评价第85页

   3. 实验结果第85-90页

   ·PAMAM-PEG-T7在荷肝肿瘤模型裸鼠上的体内分布第85-87页

   ·PAMAM-PEG-T7在荷脑胶质瘤模型裸鼠上的体内分布第87-88页

   ·GdDTPA-PAMAM-PEG-T7体内诊断效果考察第88-90页

   4. 讨论第90-91页

   5. 小结第91-92页

 第五章 T7修饰的肝肿瘤靶向阿霉素纳米递释系统第92-108页

  第一节 T7修饰的肝肿瘤靶向阿霉素纳米递释系统的制备和体外研究第93-101页

   1 材料和仪器第93页

   ·材料和试剂第93页

   ·仪器第93页

   ·细胞株第93页

   2. 实验方法第93-95页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX的制备、结构表征及体外性质评价第93-94页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX的体外评价第94-95页

   3 实验结果第95-99页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX的制备及包封率测定第95-96页

   ·PAMAM-PEG-T7对DOX的包封机制第96页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX中DOX的体外释放及机制第96-97页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX纳米载药系统的电镜表征第97页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX的电镜和粒径表征第97-98页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX纳米载药系统在Bel-7402细胞上的摄取第98-99页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX纳米载药系统诱导Bel-7402细胞凋亡效果评价第99页

   4. 讨论第99-100页

   5. 小结第100-101页

  第二节 T7修饰的肝肿瘤靶向阿霉素纳米递释系统的体内分布及药效学评价第101-108页

   1 材料和仪器第101页

   ·材料和试剂第101页

   ·仪器第101页

   ·实验动物第101页

   2. 实验方法第101-102页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的离体成像第101页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的药动学和组织分布第101-102页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX抗皮下移植肝肿瘤药效学及毒性评价第102页

   3. 实验结果第102-106页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的药动学第102-103页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的离体成像第103-104页

   ·PAMAM-PEG-TT/DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的组织分布第104-105页

   ·PAMAM-PEG-T7/DOX抗皮下移植肝肿瘤药效学及毒性评价第105-106页

   4. 讨论第106-107页

   5. 小结第107-108页

 第六章 T7修饰的肝肿瘤靶向TRAIL基因DOX共输送纳米递释系统第108-130页

  第一节 T7修饰的肝肿瘤靶向TRAIL基因DOX共输送纳米递释系统的制备和体外研究第110-122页

   1 材料和仪器第110页

   ·材料和试剂第110页

   ·仪器第110页

   ·细胞株第110页

   2. 实验方法第110-113页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX的制备、结构表征与体外表征第110-112页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统的体外评价第112-113页

   3 实验结果第113-120页

   ·pORF-hTRAIL-DOX复合物的表征第113-114页

   ·琼脂糖凝胶电泳第114-115页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统的电镜表征第115页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统的粒径表征第115-116页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统中DOX的体外释放行为考察第116页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX纳米载药系统在Bel-7402细胞上的摄取第116-118页

   ·PAMAM-PEG-T7/pEGFP-N2-DOX体外绿色荧光蛋白报告基因表达效果评价第118页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX体外凋亡诱导效果评价第118-120页

   4. 讨论第120-121页

   5. 小结第121-122页

  第二节 T7修饰的肝肿瘤靶向TRAIL基因DOX共输送纳米递释系统的体内分布及药效学评价第122-130页

   1 材料和仪器第122页

   ·材料和试剂第122页

   ·仪器第122页

   ·实验动物第122页

   2. 实验方法第122-124页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX的制备第122页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的体内分布第122-123页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX的药效学及毒性评价第123-124页

   3. 实验结果第124-127页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX在皮下肝肿瘤模型裸鼠上的体内分布第124页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX体内抑瘤率考察第124-126页

   ·PAMAM-PEG-T7/pORF-hTRAIL-DOX体内毒性考察第126-127页

   4. 讨论第127页

   5. 小结第127-130页

第三部分 围绕策略三结合EPR效应、肿瘤细胞外微酸环境和主动靶向第130-166页

 第七章 肿瘤组织细胞外微酸环境控制开启的肝肿瘤主动靶向共输送纳米递释系统第132-166页

  第一节 肿瘤组织细胞外微酸环境控制开启的肝肿瘤主动靶向共输送纳米递释系统的制备和体外研究第134-153页

   1 材料和仪器第134页

   ·材料和试剂第134页

   ·仪器第134页

   ·细胞株第134页

   2. 实验方法第134-137页

   ·DPThD的合成、结构表征第134-135页

   ·DPThD/shCDH17-DOX的制备、形态表征第135-136页

   ·DPThD/shCDH17-DOX纳米载药系统的体外评价第136-137页

   3 实验结果第137-150页

   ·载体设计及分组第137-138页

   ·DPT的氢谱表征第138-139页

   ·DPTD结构表征第139-140页

   ·DPThD结构表征第140-145页

   ·shCDH17-DOX复合物的表征第145-146页

   ·DPThD/shCDH17-DOX体内行为模拟第146-147页

   ·琼脂糖凝胶电泳第147页

   ·DPThD/shCDH17-DOX纳米载药系统的电镜表征第147-148页

   ·DPThD/shCDH17-DOX的粒径和电位表征第148页

   ·DPThD在Bel-7402人肝肿瘤细胞上的摄取第148-149页

   ·DPThD/shCDH17-DOX在Bel-7402细胞上的摄取第149-150页

   ·DPThD/pEGFP-N2-DOX体外绿色荧光蛋白报告基因表达效果评价第150页

   4. 讨论第150-151页

   5. 小结第151-153页

  第二节 肿瘤组织细胞外微酸环境控制开启的肝肿瘤主动靶向共输送纳米递释系统的体内分布和抑瘤率评价第153-166页

   1 材料和仪器第153页

   ·材料和试剂第153页

   ·仪器第153页

   ·实验动物第153页

   2. 实验方法第153-157页

   ·原位移植肝肿瘤裸鼠模型的建立第153-154页

   ·DPThD/shCDH17-DOX的制备第154页

   ·DPThD/shCDH17在皮下移植肝肿瘤裸鼠上的体内分布第154-155页

   ·萤光活体成像表征DPThD/shCDH17在荷原位肝肿瘤裸鼠体内分布第155页

   ·DPThD/shCDH17-DOX的药效学及毒性评价第155-156页

   ·原位TUNEL检测原位肝肿瘤凋亡第156-157页

   3. 实验结果第157-163页

   ·DPThD/shCDH17在荷皮下肝肿瘤裸鼠的体内分布第157-159页

   ·DPThD/shCDH17在荷原位肝肿瘤裸鼠的体内分布第159-160页

   ·DPThD/shCDH17-DOX延长荷原位肝肿瘤裸鼠存活时间第160-161页

   ·荷原位肝肿瘤裸鼠第五次给药30d后变化第161页

   ·荷原位肝肿瘤裸鼠第五次给药30d后钙粘蛋白CDH17表达情况第161-162页

   ·体内毒性考察第162页

   ·荷原位肝肿瘤裸鼠第五次给药30d后原位TUNEL检测凋亡第162-163页

   4. 讨论第163-165页

   5. 小结第165-166页

全文总结第166-168页

创新性第168-169页

中英文缩写对照第169-172页

参考文献第172-184页

综述第184-197页

 参考文献第192-197页

论文成果第197-198页

专利申请第198-199页

获奖荣誉第199-200页

致谢第200-201页

论文编号BS2199035，这篇论文共201页
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