ddPCR检测乳腺癌HER2表达与病理特征及中医证型的相关性分析

发布时间：2018-10-29 13:21

【摘要】：目的：对比微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR, ddPCR)与免疫组织化学(IHC)联合荧光原位杂交(FISH)检测浸润性乳腺癌人类表皮生长因子受体2(HER2)基因的符合率,评估微滴式数字PCR技术检测HER2的应用价值,进而分析HER2基因扩增与乳腺癌其他病理学指标及中医辨证分型的相关性,为临床诊疗及预后判断提供科学依据。方法：1.通过广东省中医院住院病历系统及华海病理系统,收集从2012年7月至2013年12月就诊于广东省中医院的120例经病理组织学确诊为浸润性乳腺癌的病例,从中筛选出110例具有完整术后病理资料的病例纳入研究。2.对入选标本HER2基因行IHC检测,对IHC积分为2+的病例行FISH检测；3.应用微滴式数字PCR技术对110例浸润性乳腺癌经IHC检测评分为0,1+,2+,3+的标本进行HER2基因扩增检测；4.对所有标本的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、肿瘤细胞增殖因子(Ki-67)行THC检测。5.应用SPSS19.0统计软件分析HER2表达量与年龄、肿瘤类型、肿瘤大小、组织学分级、Luminal分型、ER、PR、Ki-67、淋巴结转移个数、.有无绝经、中医辨证分型之间的相关性。当比较微滴式数字PCR与IHC联合FISH检测HER2的符合率时,则使用Kappa进行一致性检验；当探讨ddPCR测得的HER2表达量与其他临床病理学指标及中医证型的相关性时,则使用Spearman相关性分析；当研究乳腺癌中医证型与乳腺癌预后因素的相关性时,则使用卡方检验。结果：1.HER2基因的IHC检测结果53例为0／1+；32例2+；25例为3+。32例IHC 2+标本经FISH检测,8例阳性,24例阴性。2.110例入组病例中,HER2拷贝数／细胞的ddPCR值31例≥3.2,即使用ddPCR检测出HER2基因的阳性表达率为28.18%(31／110),79例标本HER2拷贝数／细胞的ddPCR值3.2,即使用ddPCR检测出HER2基因的阴性表达率为71.82%(79／110)。3. ddPCR与IHCFISH检测的阳性结果符合率93.9%(31／33),ddPCR与IHCFISH阴性结果符合率100%(77／77)。两种方法一致性较好,Kappa值为0.96,P0.01。4.本组ER/PR的阳性表达率分别为69.1%和45.5%,Ki-67高表达率60.0%。5.Her-2定量表达与肿瘤大小呈正相关(rs=0.224,P0.05)、与Ki-67表达呈正相关(rs=0.215,P0.05)、与组织学分级呈正相关(rs=0.261,P0.01),与淋巴结转移个数呈正相关(rs=0.172,P0.05),与ER表达呈负相关(rs=-0.417,P0.01)、与PR表达呈负相关(rs=-0.353,P0.01),与TNM分期呈正相关(rs=0.335,P0.01),与Luminal分型呈正相关(rs=0.266,P0.01),与年龄、肿瘤类型及绝经状态无显著相关性(P0.05)。6.经Spearman相关性检验,乳腺癌中医证型与年龄相关(rs=0.219,P＜0.05)经卡方检验,与ER表达相关(X2=39.415,P0.01),与TNM分期相关(X2=32.410,P0.05),与HER2、 PR、 Ki-67表达,组织学分级无显著相关性(P0.05)。结论：1.使用微滴式数字PCR技术能成功检测出乳腺癌HER2基因的扩增状态,并且其结果与传统方法(IHC联合FISH)一致性较好,阳性符合率为93.9%(31／33),阴性符合率为100%(77／77)。2.HER2基因定量表达与肿瘤直径大小、Ki-67表达、组织学分级、淋巴结转移个数、TNM分期、Luminal分型呈正相关；与ER、 PR的表达呈负相关；与年龄、绝经状态、肿瘤类型无显著相关性。3.乳腺癌中医证型与患者年龄分布、ER表达和TNM分期相关,与HER2、PR、Ki-67表达,组织学分级无显著相关性。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9

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本文编号：2297804