CCL5及受体CCR5，MMP-9的表达与乳腺癌临床病理相关性研究

发布时间：2018-11-13 12:36

【摘要】：在乳腺癌的治疗方法中,目前以手术为主的综合治疗虽然取得了很好的疗效,但侵袭和转移仍是影响生存率和死亡率的主要因素,也成为研究和关注的重点和热点。乳腺癌较常见的是腋窝淋巴结、骨、肺和肝转移,皮肤和肾转移较少见；转移途径主要通过血道转移与淋巴道播散来进行,在乳腺癌的转移过程中,形成这种相对特异性转移的原因有多种。“归巢理论”(homing theory)认为癌症的远处转移是因为人体器官本身能产生趋化因子,当表达趋化因子受体的癌细胞经过富含趋化因子器官的血管壁时被捕获并增殖,造成组织或器官的相对特异性转移。CCL5,是CC类趋化因子的一类,被称作调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted, RANTES),多种类型炎症细胞如NK细胞、T淋巴细胞可分泌表达CCL5,其受体包括CCR1、CCR3、CCR4和CCR5, CCR5和CCR1是高亲和力受体。CCR5主要表达于单核细胞、T细胞等白细胞上,在小神经胶质细胞、早幼粒细胞亦有表达。CCR5的特异配体为CCL5、MIP-1α、MIP-1β。有研究认为乳腺癌细胞表达和分泌CC类趋化因子CCL5及受体CCR5,且与恶性程度和病程正相关。肿瘤部位CCL5一方面可通过募集并活化单核细胞和肿瘤细胞导致基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPS)表达,溶解细胞外基质和基底膜,促进转移发生；另一方面以自分泌和旁分泌的机制直接和间接促进肿瘤的发展。MMP-9属于基质金属蛋白酶(natrix metalloprotein, MMP)家族,主要功能是降解和重塑细胞外基质(extraellular matris)的动态平衡,并能促进乳腺癌细胞的侵袭、转移和血管生成。因此研究趋化因子CCL5及其受体CCR5, MMP-9在乳腺癌的发生、发展和治疗中的作用具有十分重要的意义。目的：探讨CCL5及受体CCR5, MMP-9在乳腺癌中的表达情况及临床病理意义,进一步研究其在乳腺癌生成和临床病理指标间的关系。方法：收集乳腺甲状腺外科手术切除的乳腺癌标本70例,常规病理均为乳腺浸润性导管癌,所有组织标本采集前均未接受过化疗或放疗。按照按AJCC(第六版,2002年)行TNM分期：Ⅰ期20例,Ⅱ期18例,Ⅲ期32例。采用免疫组织化学方法检测乳腺癌原发癌灶及正常乳腺组织CCR5、MMP-9的表达。酶联免疫法检测乳腺癌患者外周血中CCL5的表达情况,选择50例正常志愿者血清作为对照。分析MMP-9、CCL5及CCR5与乳腺癌临床病理参数之间的关系。同时,分析CCL5/CCR5这一生物学轴与乳腺癌患者临床预后的关系。应用RT-PCR、Western Blot方法,检测2株乳腺癌细胞株中趋化因子受体CCR5在mRNA水平及蛋白水平上的表达情况,从细胞分子层面上探讨CCR5在乳腺癌细胞株上的表达差异。结果：1.乳腺癌组织及其对照组中CCR5、MMP-9蛋白的表达：癌组织中CCR5、MMP-9蛋白表达阳性率分别为71.43%、58.57%,癌旁正常乳腺组织中CCR5、MMP-9蛋白表达阳性率4.29%,17.14%,两者差异均有显著统计学意义(P0.01)。2.乳腺癌组织中CCR5、MMP-9蛋白表达与临床病理参数间的相关性：CCR5、MMP-9表达均与发病年龄、绝经前后、ER、PR、P53、Ki67等无关,在肿瘤最大直径、临床分期、腋窝淋巴结转移等方面存在差异,P0.05; CCR5表达率还因HER2表达不同而存在统计学差异。3.乳腺癌外周血中CCL5的检测：其表达浓度在临床分期、腋窝淋巴结有无转移上有差别,P0.05,与其它临床病理指标无关。4. CCL5、CCR5、MMP-9三者间存在相关性,相关系数分别为0.485、0.493、0.74。5.CCR5mRNA基因及蛋白均在2种乳腺癌细胞株中均有表达,其中MDA-MB-453细胞株中该基因及蛋白表达量相对较高,MCF-7次之,两者有统计学差异。6. CCL5、CCR5高表达组总生存率低,预后较差。结论：1、乳腺癌组织中高表达CCR5、MMP-9,乳腺癌患者血清中高表达CCL5,并与临床分期及腋窝淋巴结转移有关,CCL5/CCR5生物学轴可能参与了乳腺癌的发生,并通过激活MMP-9的方式造成乳腺癌的腋窝淋巴结转移。2、CCL5联合CCR5、MMP-9检测有可能成为预示乳腺癌局部浸润及腋窝淋巴结转移的新的靶向标记物。
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【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9

【参考文献】