DNM3抑制肝癌发生发展作用及其机制的研究

发布时间：2019-09-03 19:40

【摘要】：目的:肝癌是我国最为常见的恶性肿瘤之一,但其肿瘤的复发与转移是导致治疗失败的主要原因。Dynamin 3(DNM3)是一个新发现的抑癌基因,全基因组检测发现与正常组织比较,DNM3启动子甲基化水平在肝癌组织中增高,表达水平降低,而且DNM3表达高低和预后相关。DNM3在肝癌发生发展中的作用机制未明,本课题拟从肝癌组织和癌旁非肿瘤组织中DNM3的mRNA表达水平研究入手,明确DNM3在组织中的表达情况以及与临床病理之间的联系,并进一步探索DNM3在肝癌中的功能及其调控机制。方法:(1)以qRT-PCR方法检测68例肝癌患者术后标本中肿瘤组织和癌旁非肿瘤组织中DNM3的mRNA表达,并利用SPSS 13.0软件统计分析该68例肝癌患者DNM3的表达与临床病理参数的关系。(2)采用p IRES2-EGFP/DNM3真核表达载体上调肝癌细胞株Hep G2和Hep3B中DNM3的表达水平观察其对肝癌细胞生物学行为的影响。(3)运用NO相关检测试剂盒检测上调DNM3后肝癌细胞中NOS和NO的变化,Western blot检测上调DNM3后肝癌细胞中相关蛋白的变化。结果:(1)肝癌患者术后标本中肿瘤组织DNM3基因的mRNA相对表达水平明显低于癌旁非肿瘤组织(P0.0001),其中68例肝癌患者中76.5%(52/68)的患者肿瘤组织中DNM3表达水平低于其对应的癌旁非肿瘤组织(P0.0001);DNM3在肝癌组织中的低表达与肝癌的转移(P=0.001)和血管侵犯(P=0.047)相关,而与其他临床病理参数无明显联系。(2)上调DNM3表达能抑制肝癌细胞株的体外增殖、迁移侵袭及体内成瘤能力,同时还可以促进肝癌细胞凋亡和诱导细胞周期发生G0/G1期阻滞。(3)上调DNM3表达后肝癌细胞内NO含量升高,增殖相关蛋白P53、P21表达升高,EMT相关蛋白表达量发生变化(如e-caderin蛋白表达升高和n-caderin蛋白表达下降),转移相关蛋白MMP-9表达降低。结论:DNM3在肝癌组织中的表达明显降低,表达水平与肝癌的肿瘤转移和血管侵犯相关;上调DNM3表达水平能抑制肝癌细胞的增殖和转移能力;DNM3可能通过对NOS/NO/P53/P21和MMP-9信号通路的调控参与了肝癌的发生发展过程。
【图文】：

DNM3在肝癌组织和癌旁非肿瘤组织中的mRNA表达（qRT-PCR,**P<0.01）

DNM3抑制肝癌发生发展作用及其机制的研究

琼脂糖电泳分析RT-PCR扩增的DNM3基因
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.7

【参考文献】