靶向CDC42基因miR-185对胃癌细胞系MGC803增殖凋亡的影响

发布时间：2019-10-09 10:07

【摘要】：目的:探讨靶向CDC42基因mi R-185对胃癌细胞MGC803增殖凋亡的影响及其可能作用机制。方法:根据前期基因芯片结果及生物信息学软件对相关mi RNA的分析,筛选出在胃癌细胞与正常胃粘膜上皮细胞差异表达的mi RNA,及其可能的靶基因。实时荧光定量PCR验证基因芯片结果。将mi R-185 mimic和Sh NC质粒载体分别瞬时转染至MGC-803细胞,倒置荧光显微镜及实时定量PCR检测转染效率。CCK-8法检测细胞活力绘制细胞生长曲线,细胞集落形成检测细胞增殖力,流式细胞学检测细胞周期及细胞凋亡。QRT-PCR、Western blot检测CDC42的m RNA及蛋白表达水平。结果:利用前期基因芯片结果及生物信息学筛选出mi R-185作为研究对象,且CDC42可能为其靶基因,实时定量PCR验证表明,mi R-185在胃癌细胞系MGC803、SGC7901较正常胃粘膜上皮细胞GES-1表达下调。倒置荧光显微镜和q RT-PCR检测结果显示,瞬时转染mi R-185 mimic的MGC803细胞中,mi R-185表达水平显著升高。CCK-8检测结果显示,mi R-185-mimic转染组细胞增殖明显受到抑制;细胞集落形成结果显示:瞬间转染mi R-185 mimic能抑制MGC803细胞集落形成。流式细胞学检测细胞周期及细胞凋亡结果显示:转染mi R-185 mimic的MGC803细胞能促使G1期停滞及促进细胞凋亡,QRT-PCR、Western blot检测结果显示,瞬间转染mi R-185mimic组较瞬间转染Sh NC组、转染试剂对照组及空白对照组CDC42的m RNA及蛋白表达水平均降低。结论:1、Mi R-185在胃癌细胞中表达下调。2、Mi R-185能够抑制MGC-803细胞增殖,促进细胞凋亡。3、Mi R-185可能通过靶向调控CDC42基因抑制胃癌细胞系MGC803增殖,促进其凋亡。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2

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本文编号：2546719