CDK7抑制剂THZ1对乳腺癌细胞增殖与凋亡的作用及其机制

发布时间：2019-10-14 15:32

【摘要】：目的探讨细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶7(CDK7)特异性抑制剂THZ1对人乳腺癌细胞系MCF7、Sk Br3及Hs578T增殖及凋亡的作用及其分子机制。方法采用MTT、流式细胞术、Western blot等方法检测细胞活力、细胞周期和凋亡的变化情况。结果 500 nmol/L THZ1处理细胞,显微镜观察细胞数明显减少;MTT实验表明THZ1呈剂量及时间依赖性抑制细胞的增殖;细胞饥饿培养24 h以同步化在G1/S期,THZ1继续处理24 h,流式细胞术检测G2/M期细胞数增多。THZ1引起细胞G2/M期阻滞;THZ1呈剂量及时间依赖性诱导细胞早期凋亡与晚期凋亡;Western blot结果表明,THZ1可导致Cleaved-PARP上调,Bcl-2的显著下调和p65、GSK3蛋白磷酸化水平的明显上调。结论 THZ1能抑制MCF7、Sk Br3及Hs578T细胞增殖,诱导其细胞周期阻滞及细胞早、晚期凋亡,可作为乳腺癌治疗潜在的候选药物。
【图文】：

时间依赖性,细胞

细胞经THZ1处理不同时间，THZ1的促凋亡作用呈现出时间依赖性，并且在12h上调蛋白的作用即达到最大，见图4B~4C。A:bright-fieldofMCF7andSkBr3cellswhichweretreatedwithDMSO(left)or200nmol/LTHZ1(middle)and500nmol/LTHZ1(right)for5days;B:CellsweretreatedwithincreasingconcentrationsofTHZ1(0~10000nmol/L)for24,48and72h,thenthecellviabilitywasassessedbyMTTmethod.WiththeincreasingdoseofTHZ1,theproliferationofcellswasobviouslyinhibited.Thedatarepresentedtheaverageofthreeindependentexperimentsresults图1MTT法检测不同浓度THZ1对乳腺癌细胞增殖的影响Figure1CellproliferationassessedbyMTTaftervariousconcentrationsofTHZ1treatment

流式细胞术,细胞周期,细胞凋亡

·374·肿瘤防治研究2017年第44卷第6期CancerResPrevTreat,2017,Vol.44,No.6A:MCF7cellsweresynchronizedattheG1/Stransitionbystarved24h,andthentreatedwithindicatedTHZ1for24h.ThecellcycleswereanalyzedbyFCM;datawerepresentedasmeans±SDofthreeindependentexperiments;B,C:thehistogramofcorrespondingcellcycledistribution图2流式细胞术检测不同浓度THZ1处理后对细胞周期的影响Figurea2CellcycleassessedbyFCMaftervariousconcentrationsofTHZ1treatmentA:SkBr3andMCF7cellsweretreatedwithincreasingconcentrationsofTHZ1for48h,stainedwithannexinV-FITCandPI,andthenanalyzedbyflowcytometryforcellapoptosis;B:thehistogramofcorrespondingcelldistribution图3流式细胞术检测不同浓度THZ1处理后对细胞凋亡的影响Figure3CellapoptosisassessedbyFCMaftervariousconcentrationsofTHZ1treatment
【作者单位】：中山大学药学院微生物与生化药学实验室;
【基金】：国家自然科学基金(81472470) 广东省自然科学基金(c140500000043)
【分类号】：R737.9

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