单酰基甘油脂肪酶抑制剂JZL184对结直肠癌细胞增殖凋亡迁移的影响及其作用机制

发布时间：2019-11-11 18:13

【摘要】：背景：脂肪代谢及脂质分子与肿瘤关系密切。单酰胺基脂肪酶(MAGL)主要参与人体内甘油三脂代谢生成游离脂肪酸(FFAs)。最新研究表明,单酰基甘油脂肪酶通过调节脂肪酸网络提高肿瘤细胞致病性及侵袭性。并且抑制MAGL基因或活性后,一些与肿瘤密切相关的脂质分子如溶血磷脂(LPA),前列腺素E2(PGE2)等水平随FFAs水平发生变化。MAGL-FFAs通路调节脂肪酸网络从而影响肿瘤侵袭性,MAGL是其中关键的节点。在结肠癌中MAGL高表达与肿瘤组织中,并且抑制MAGL基因表达及活性会导致结直肠癌细胞株增殖减弱,凋亡增多,细胞周期阻滞,侵袭能力下降,其可能与Cyclin D1及Bcl-2有关,但是MAGL与细胞凋亡及肿瘤迁移之间的关系仍不明确。本实验旨在探索JZL184抑制MAGL活性对结直肠癌细胞系增殖、凋亡和迁移影响,寻求结直肠癌治疗新的靶点及治疗方法。 目的：研究MAGL抑制剂JZL184对结直肠癌细胞系细胞增殖、细胞凋亡、转移能力及对化疗药物敏感性的影响及其机制。 方法：本实验首先利用JZL184干预结直肠癌细胞系,通过MTT检测JZL184对结直肠癌细胞系增殖能力的影响,及JZL184联合5-FU与单用5-FU对肿瘤影响有无差异,流式细胞技术分别检测JZL184对结直肠癌细胞凋亡的影响以及比较L184联合不同浓度的5-FU与单用5-FU对结直肠癌细胞系凋亡影响的差异。然后Transwell检测JZL184对不同转移潜能的SW480及SW620细胞系细胞迁移的影响。之后利用Realtime-PCR和Western-blot检测Bcl-2及Bax基因及蛋白水平的变化。最后利用Western-blot检测其他细胞凋亡分子pro-Caspase8和pro-Caspase3、与上皮间充质转化有关的分子以及AKT-mTOR通路中p-AKT及p-mTOR蛋白水平的变化。 结果：JZL184可抑制结直肠癌细胞系SW480、Lovo、HCT116细胞增殖并诱导结直肠癌细胞系细胞凋亡增多。JZL184联合不同浓度的5-FU与单用5-FU相比,可提高结直肠癌细胞系细胞凋亡并抑制细胞增殖。随后我们利用JZL184干预具有不同转移潜能的SW480及SW620,发现JZL184可抑制两种细胞系细胞迁移并且其抑制SW620的效果要强于SW480。最后我们通过Western blot及Real-time PCR检测,发现与凋亡相关BCL的2mRNA及蛋白水平下降,Bax的mRNA及蛋白水平上升,E-cardherin蛋白水平上升,Pro-Caspase8、pro-Caspase3、p-AKT、p-mTOR、Vimentin及Snail蛋白水平下降。 结论：JZL184可抑制结直肠癌细胞系细胞增殖及迁移,促进肿瘤细胞凋亡,增加肿瘤细胞对5-FU敏感性。其机制可能是JZL184调控与凋亡有关的BCL-2/Bax和pro-Caspase8/pro-Caspase3表达水平从而促进细胞凋亡,影响EMT相关蛋白表达从而抑制肿瘤细胞迁移能力。并且JZL184可能通过AKT-mTOR通路调节上述分子从而影响肿瘤细胞凋亡及转移。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.34

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 王汉涛 ,Kraemer M.;随访危险因素分析:复发和非复发结直肠癌的比较[J];中国实用外科杂志;2001年12期

2 苏森;患结直肠癌妇女后代癌症的危险性增加[J];中国肿瘤;2001年06期

3 汪一虹;在确定的法国人群中年龄<45岁结直肠癌病人与≥45岁结直肠癌病人的比较[J];国外医学(消化系疾病分册);2002年01期

4 李会晨;结直肠癌解剖位置的连续性右向迁移[J];国外医学.外科学分册;2003年03期

5 李志霞;结直肠癌复发及转移的综合治疗[J];中华胃肠外科杂志;2003年06期

6 何建苗,蒲永东,曹志宇,刘卫平;老年人结直肠癌186例的外科治疗[J];中华胃肠外科杂志;2003年05期

7 保红平,方登华,高瑞岗,李奎,张雪松,刘天锡;青年人结直肠癌临床病理分析[J];中国普外基础与临床杂志;2004年01期

8 章江;;监测结直肠癌非常必要[J];国外医学情报;2004年04期

9 郜文秀,杨艳芳,梁小波,李耀平,李佩珍;细胞粘附分子变异体在结直肠癌中的表达及预后[J];中国公共卫生;2005年07期

10 Nozawa T. ,Enomoto T. ,Koshida Y. ,M. Kuranami,王志宇;人结直肠癌黏膜下血小板源性内皮细胞生长因子特异性增强表达[J];世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册);2005年06期

相关会议论文 前10条

1 郑树;;结直肠癌预后与转移相关因素分析[A];2005年浙江省肿瘤学术会议全国大肠癌转移与复发的诊治研讨会学术论文集[C];2005年

2 邹一峰;吴小剑;兰平;;结直肠癌免疫治疗新进展[A];第十一次全国中西医结合大肠肛门病学术会议论文汇编[C];2006年

3 郁宝铭;;结直肠癌治疗的进展及其新理念[A];2006年浙江省肛肠外科学术年会论文汇编[C];2006年

4 王锡山;;结直肠癌治疗的困惑之我见[A];第九届全国肿瘤转移学术大会暨2011年黑龙江省医学会肿瘤学年会报告集[C];2011年

5 秦建平;;未病思想中的结直肠癌预防[A];贵州省中西医结合学会肛肠学会第五届学术交流会暨新技术新进展学习班论文汇编[C];2012年

6 高文庆;陈会林;童蕾;陆松春;;老年梗阻性结直肠癌诊疗体会(附42例报告)[A];首届“之江中医药论坛”暨浙江省中医药学会2011年学术年会论文集[C];2011年

7 王启远;周长江;高云飞;徐岩;李坤;;血管内皮生长因子与结直肠癌[A];《中华急诊医学杂志》第八届组稿会暨急诊医学首届青年论坛论文汇编[C];2009年

8 巴一;;结直肠癌靶向治疗进展[A];第三届中国肿瘤内科大会教育集暨论文集[C];2009年

9 何超;朱洪波;;结直肠癌的生物治疗[A];2009年浙江省肿瘤外科学术年会暨肿瘤外科规范化诊治学习班论文汇编[C];2009年

10 万德森;;进一步提高结直肠癌疗效的思考[A];2009年浙江省肿瘤学术年会暨肿瘤诊治新进展学习班论文汇编[C];2009年

相关重要报纸文章 前10条

1 中华医学会肿瘤学分会主任委员 顾晋;分期不精确 致结直肠癌过度治疗[N];健康报;2012年

2 本报记者 贾岩;跨线治疗成结直肠癌最后防线[N];医药经济报;2012年

3 本报记者 贾岩;跨线治疗构筑结直肠癌最后防线[N];医药经济报;2012年

4 本报记者 林琳;结直肠癌：可以治愈的癌症[N];医药经济报;2013年

5 记者 张妍　通讯员 熊静帆 朱品磊;深圳结直肠癌发病高于全国[N];深圳商报;2013年

6 本报记者 孙刚;预防结直肠癌：请管住嘴[N];解放日报;2013年

7 上海市中医医院肿瘤科 侯凤刚 副主任医师;中医药在结直肠癌治疗中的作用和特色[N];上海中医药报;2014年

8 李华虹 孙瑜淼 记者 李丽云 实习生 阴浩;专家呼吁：结直肠癌应多学科规范化诊疗[N];科技日报;2014年

9 ;降低结直肠癌复发有新疗法[N];人民日报;2003年

10 韩自力;新化疗方案可高效治疗结直肠癌[N];健康报;2007年

相关博士学位论文 前10条

1 陈涛;MicroRNA-31/FIH-1调控关系在结直肠癌发生发展中的作用及其机制研究[D];复旦大学;2014年

2 任翡;MYBL2基因在结直肠癌的表达及机制的初步探讨[D];复旦大学;2014年

3 吴朋;结直肠癌中microRNA-615基因甲基化及其生物学特性探究[D];复旦大学;2014年

4 李泽武;MicroRNA-203靶向ZNF217基因调控结直肠癌生物学行为的研究[D];山东大学;2015年

5 徐兴远;低分子肝素对结直肠癌患者预后的影响及相关机制的研究[D];复旦大学;2014年

6 梁洪亮;miR-454在结直肠癌中的功能及其作用机制[D];山东大学;2015年

7 金鹏;MMR蛋白在雌激素致结肠癌细胞凋亡中的作用及SEPT9检测结直肠癌的研究[D];第三军医大学;2015年

8 珠珠;云南省Lynch综合征候选基因标志物研究[D];昆明医科大学;2014年

9 周智航;SEMA3F通过下调ASCL2-CXCR4轴而抑制结直肠癌转移的分子机制[D];第三军医大学;2015年

10 王林;MiRNA-300对结直肠癌肿瘤侵袭和增殖的影响及其调控机制的初步研究[D];第三军医大学;2015年

相关硕士学位论文 前10条

1 颜斐斐;术后结直肠癌患者癌因性疲乏与影响因素的研究[D];南方医科大学;2009年

2 李斌;结直肠癌患者就诊延迟分析[D];中南大学;2009年

3 叶建杰;慈溪市结直肠癌危险因素病例对照研究[D];浙江大学;2008年

4 赵波;结直肠癌危险因素及临床流行病学特征的调查与分析[D];广西医科大学;2013年

5 宋艳敏;PAQR3基因甲基化水平与结直肠癌关系的研究[D];河北大学;2015年

6 黎江;Oct4B1在结直肠癌干细胞中的表达及其与Twist的相关性研究[D];遵义医学院;2015年

7 杨文婷;PD-L1、SIRT1在结直肠癌组织中的表达及意义[D];福建医科大学;2015年

8 罗佳;二代测序分析散发性结直肠癌和息肉的基因突变[D];福建医科大学;2015年

9 崔慧鹏;精氨酸琥珀酸合成酶（ASS1）高表达与结直肠癌恶性进展的相关性研究[D];中国人民解放军医学院;2015年

10 崔娟娟;p53和nm23在结直肠癌中的表达及其临床意义[D];河北联合大学;2014年

，

本文编号：2559377