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Msp对人非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力影响的实验研究

发布时间:2019-11-17 17:18
【摘要】:目的探讨巨噬细胞刺激蛋白(macrophage stimulating protein,Msp)对人非小细胞肺癌细胞株PC14增殖、迁移和侵袭能力影响的研究。方法构建Msp编码基因Mst1真核表达载体,将Mst1导入Msp(-)和RON(-)人非小细胞肺癌细胞株PC14,并用G418筛选出稳定表达的细胞株。通过RT-PCR方法检测已转染Mst1载体PC14细胞中Mst1的表达,用Western blot检测Msp在PC14、PC14-Mst1-pEGFP-N1、PC14-pEGFP-N1中的表达水平,同时检测RON在PC14和RON(+)细胞SKBR-3中的表达情况。通过计算RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞)和SKBR-3细胞在各转染组细胞培养上清液的刺激下穿过Transwell微孔膜的细胞数来评价Msp的生物学活性。利用MTT法检测Msp对PC14细胞增殖力的影响,采用Transwell小室和基质胶侵袭实验观察Msp对PC14细胞迁移和侵袭能力的影响。结果转染Mst1基因后,形成PC14-Mst1-pEGFP-N1,稳定表达Mst1mRNA及蛋白,其本身的增殖能力被明显抑制,迁移能力和侵袭能力均较PC14和PC14-pEGFP-N1降低。它还通过旁分泌的方式对RON(+)阳性的癌细胞RAW264.7和SKBR-3的迁移起促进作用。结论 Msp表达可降低人非小细胞肺癌细胞PC14的增殖、迁移和侵袭能力,却对RON(+)阳性的癌细胞迁移通过旁分泌的方式有促进作用。

【参考文献】

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【共引文献】

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