不同TNM分期结直肠癌患者血清中CXCL8和循环肿瘤细胞相关性的实验研究

发布时间：2020-01-21 18:19

【摘要】：【目的】本实验应用流式细胞技术检测不同TNM分期结直肠癌患者血清循环肿瘤细胞,分析其与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度等关系；利用ELISA法检测不同TNM分期结直肠癌患者血清中白介素8的表达水平,分析不同TNM分期结直肠癌患者血清中CXCL8表达情况,以期探讨检测结直肠癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs)和白介素8的表达相互关系以及临床价值,并探讨其可能机理。[方法]1、采集2015年4月1日至2016年4月1日昆明医科大学第三附属医院结直肠外科71例结直肠癌患者外周血10ml,采集2015年6月1日至2015年7月1日共10例健康志愿者外周血10ml作为对照组。2、利用外周血淋巴细胞分离法制备外周血单个核细胞悬液,平分为试验管和对照管,试验管分别标记CK19、CD45单克隆抗体。阴性对照管分别加入同型对照抗体。3、已标记好的外周血单个核细胞通过流式细胞仪,检测CK19+/CD45的细胞,作为结直肠癌患者CTCs的标志。4、采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清CXCL8含量。5、所得结果用SPSS 13.0统计软件包处理,实验结果应用x2检验统计分析,以P0.05为差异有统计学意义。[结果]1、71例结直肠癌患者中33例检测出CTCs, CTCs的阳性率为46.48%,10例健康志愿者中未检测出CTCs,两组阳性率差异具有统计学意义(P0.05)。2、71例结直肠癌患者根据临床TNM分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期)不同,CTCs阳性率分别为7.69%、36.84%、52.00%和71.43%,四组阳性率差异有统计学意义(P0.05)；根据淋巴结转移状况(N0、N1、N2期)不同,CTCs阳性率分别为24.00%、48.14%、73.68%,三组阳性率差异有统计学意义(P0.05);根据临床肿瘤浸润深度(T1、T2、T3、T4期)不同,患者CTCs阳性率分别为20.00%、25.92%、44.00%、78.57%,四组阳性率差异具有统计学意义(P0.05)。根据肿瘤分化程度(高分化、中分化、低分化)不同,患者CTCs阳性率分别为18.75%、40.00%、65.00%,三组阳性率差异具有统计学意义(P0.05)。3、结直肠癌患者血清CXCL8水平明显增高,与正常对照组差异显著。4、结直肠癌恶性程度越高、分化越差,血清CXCL8水平升高,中高分化组和低分化组差异显著；结直肠癌有远处转移组与无远处转移组血清CXCL8水平差异显著。[结论]1、应用流式细胞检测技术,可以检测到结直肠癌患者外周血CTCs。2、结直肠癌患者临床分期越晚、肿瘤浸润越深、淋巴结转移越多、肿瘤分化越差,其CTCs的检出率越高；TNM分期与血清CXCL8含量呈正相关,即随着TNM分期改变,患者血清中CXCL8的表达逐渐增加,其高表达是患者预后不良的一个独立危险因素。3、结直肠癌患者血清CXCL8含量明显高于健康人组,差异具有统计学意义。4、不同TNM分期结直肠癌患者血清中CXCL8含量和循环肿瘤细胞数目为正相关关系。
【图文】：

结果逡逑在ＷＦＳＣ－Ｈ为横坐标、ＦＬ３－Ｈ为纵坐标的散点图中设口，圈出Ａｎｔｉ－ＣＤ４５－ＣＰ逡逑表达阴性的细胞；从该群细胞中确定表达ＣＫ１９－ＦＩＴＣ阳性的细胞（见图１、图２）。逡逑Ｉ＾ＦＵ邋ｌＯＯ／ＦＳＬｍ逦－ｎ逡逑，＿＿，逦＾逡逑客—逡逑ｉ邋＾逦＂逦－逡逑－逦Ｉ逡逑１６．５％逡逑。逦逦邋逦逡逑逦山逦山．Ｉ邋．逦１，０：逦逦逦７。！逦；１0．逡逑ＣＫ１９．ＦＩＴＣ逦ＣＫ１９－Ｆｒｒｃ逡逑图１逦图２逡逑１结直肠癌患者外周血中谢ｉｇ的表达逡逑７１例结直肠癌患者外周血中检测出循环肿瘤细胞阳３３例，阳性率为逡逑４６．４８％（３３／７１），１０例健康志愿者外周血中均未检测出循环肿瘤细胞阳性，两组逡逑循环肿瘤细胞的阳性率差异具有统计学差异（Ｐ＜０．０５）。逡逑２邋ＣＴＣｓ检出阳性与ＴＮＭ分期的相关性逡逑７１例结直肠癌患者根据第七版ＡＪＣＣ的结直损癌ＴＮＭ分期标准分为４组，逡逑其中Ｉ期患者１３例，１例检测出循环肿瘤细跑阳性（７．６９％），，ＩＩ期患者１９例，逡逑７例检测出循环肿瘤细胞（３６．８４％）

研究结果显示：结直肠癌有远处转移组与无远处转移组血清ＣＸＣＬ８水平差异显逡逑著。逡逑６血清中ＣＸＣＬ８和ＣＴＣｓ数目相关性分析（见图１－４）逡逑研究结果显示：经过统计学分析，不同ＴＮＭ分期结直肠癌患者血清中ＣＸＣＬ８逡逑含量和循环肿瘤细胞数目为正相关关系。逡逑

本文编号：2571679