食管癌中P53蛋白和Akt蛋白相互关系研究

发布时间：2020-01-22 17:31

【摘要】：目的食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一,占所有恶性肿瘤的2%,每年全球约有40万人死于食管癌。我国是食管癌高发地区之一。癌基因和抑癌基因表达的失调造成细胞内信号通路的改变,继而带来癌细胞的发生和发展。p53是人体内重要的抑癌基因,akt是人体内重要的癌基因。在正常人体细胞内两者处于动态平衡中,共同调节了细胞的增殖和凋亡。癌细胞凋亡和增殖的失衡提示其细胞内P53和Akt的表达较正常人体细胞发生了变化。本文旨在探究食管癌细胞中两个细胞内信号通路上游节点:P53和Akt蛋白之间的关系正常细胞发生了何种变化,初步明确其在癌细胞内的生物学特性,从而更好地了解肿瘤细胞的发生发展。方法取手术切除的食管癌及癌旁组织制成病理切片并行免疫组化检查,检测有无p-Akt1,p-Akt2,Akt和P53蛋白表达;取TE-1食管高分化鳞癌细胞培养,提取细胞蛋白western blot法检测其p-Akt1,p-Akt2,Akt和P53浓度;再分别使用P53抑制剂Pifithrin-α,Akt1抑制剂A-674563,Akt2抑制剂CCT128930作用于TE-1细胞,分别提取细胞蛋白,western blot法检测p-Akt1,p-Akt2和P53浓度,观察蛋白之间相互关系;取人体食管癌组织对p53基因外显子进行基因测序,并比对GENEBANK发现其突变,对比相关文献明确突变类型;结果50 例食管癌组织中,分别 52%(26/50)、42%(21/50)、30%(15/50)、66%(33/50)的食管癌组织表达P53、Akt、p-Akt1和p-Akt2蛋白,癌旁组织分别22%(11/50)、18%(9/50)、8%(4/50)、28%(14/50)的癌旁组织表达P53、Akt、p-Akt1和p-Akt2蛋白,食管癌显著表达更多的P53(p=0.002)、Akt(p=0.009)、p-Akt1(p=0.005)和p-Akt2(p=0.000)蛋白。跟中高分化食管癌、Ⅲ+Ⅳ期食管癌、存在淋巴结转移的食管癌相比,P53蛋白在低分化食管癌、Ⅰ+Ⅱ期食管癌、没有淋巴结转移的食管癌中表达没有显著增加(p0.05)。跟中高分化食管癌、Ⅲ+Ⅳ期食管癌相比,Akt,p-Akt1,p-Akt2蛋白在低分化食管癌、Ⅰ+Ⅱ期食管癌中表达没有显著增加(p0.05);在有淋巴结转移的食管癌中Akt,p-Akt1,p-Akt2蛋白表达显著增加(p0.05,提示Akt蛋白的两个亚型参与了食管癌细胞再淋巴结内的转移。和对照组相比,使用P53抑制剂Pifithrin-α的食管癌TE-1细胞P53、Akt、p-Akt1表达量明显下降(p=0.002,p=0.032,p=0.016);p-Akt2表达量没有明显下降(p=0.133);使用p-akt1抑制剂A-674563后P53、Akt、p-Akt1表达量明显下降(p=0.004,p=0.004,p=0.011);p-Akt2表达量没有明显下降(p=0.519)。使用 p-akt2 抑制剂 CCT128930 后 P53、Akt、p-Akt1、p-Akt2 表达量明显下降,差异有统计学意义(p=0.014,p=0.013,p=0.010,p=0.005)。在50例食管癌组织标本中均未测出有R175H、H179R、R248Q和R273H位置的突变。结论食管癌较正常组织表达更多的P53、Akt、p-Akt1和p-Akt2蛋白,Akt1和Akt2蛋白可能参与了食管癌细胞的淋巴结转移。异于正常组织里P53和Akt之间的相互抑制关系,在食管癌细胞内P53蛋白和Akt1、Akt2蛋白互为促进,共同介导了肿瘤细胞的发生发展。但是蛋白之间这一相互关系的变化并不是p53基因发生突变出现p53R175H、H179R、R248Q和R273H突变体的原因,仍需进一步的研究阐明其机理。
【图文】：

蛋白,食管癌,癌组织

图３邋ｐ－Ａｋｔｌ蛋白在食管癌组织中表达逦图４逦ｐ－Ａｋｔ２蛋白在食管癌组织中表达逡逑为阳性（ｘ邋２００）逦为阳性（ｘ邋２００）逡逑表１邋Ｐ５３蛋白在食管癌及癌旁组织中的表达逡逑ｍ＼逦Ｍｌ逦Ｐ５３逦Ｐ逡逑ｍ±逦ｉｌ逡逑癌组织逦５０逦＾逦２４逦Ｍ0２逡逑癌旁粘膜逦５０逦１１逦３９逡逑表２邋Ａｋｔ蛋白在食管癌及癌旁组织中的表达逡逑ｍ＼逦Ｍｌ逦Ａｋｔ逦ｐ逡逑ｉｌ逦ｉｌ逡逑

蛋白,食管癌,癌组织

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