骨髓间充质干细胞对低转移肝癌细胞的影响

发布时间：2020-01-28 17:59

【摘要】：目的:观察人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对植入低转移肝癌细胞动物模型生长的影响情况以及对转移潜能和凋亡趋势的影响。方法:制作人低转移肝癌细胞MHCC97-L动物模型,将动物随机分为模型实验组、对照组。实验组在接种肿瘤后第7 d开始尾静脉注射BMSCs 5×105/只,模型对照组相同时间尾静脉注射BMSCs培养液0.2 m L/只。于实验开始后每周用卡尺测一次皮下肿瘤体积,分别于肿瘤接种后第14d(2周)、21 d(3周)、28 d(4周)、35 d(5周)、42 d(6周)处死动物,完整剖取瘤块并称瘤重和体积,计算肿瘤抑制率。Real-time PCR法检测低转移肝癌动物模型标本中转移相关因子骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨唾液蛋白(bone salivary protein,BSP)、整合素(integrinαⅤ)基因以及凋亡相关因子Bcl-2、Bax、caspase3基因的表达。结果:骨髓间充质干细胞对肿瘤重量和体积的抑制作用在第3周具有统计学意义,实验组肿瘤重量显著低于对照组。骨髓间充质干细胞对肿瘤的抑制作用在第2、3、5、6周均具有统计学意义,实验组肿瘤体积显著低于对照组。实验组肿瘤转移相关因子表达均低于对照组,骨髓间充质干细胞干预后肿瘤促凋亡因子Bax、caspase3的表达呈升高趋势,抗凋亡因子Bcl-2的表达逐渐下降。结论:骨髓间充质干细胞对低转移肝癌细胞MHCC97-L的生长具有抑制作用,且第3周时抑制效果最好,随着时间的延长,肿瘤抑制率逐渐下降。
【图文】：

嗵４婷鞒⊥枷瘢囝鄓馔枷癫?用软件进行荧光强度分析。观察BMSCs与肝癌组织细胞融合图像发现BMSCs进入肿瘤组织。图中肿瘤组织细胞呈绿色，BMSCs细胞呈蓝色（图5）。图1肿瘤重量抑制率与转移因子相关性分析Figure1Correlationanalysisoftumorweightinhibitionrateandtransferfactor图2肿瘤重量抑制率与凋亡因子相关性分析Figure2Correlationanalysisoftumorweightinhibitionrateandapop-tosisfactor图3肿瘤体积抑制率与转移因子相关性分析Figure3Correlationanalysisoftumorvolumeinhibitionrateandtransferfactor图4肿瘤体积抑制率与凋亡因子相关性分析Figure4Correlationanalysisoftumorvolumeinhibitionrateandapoptosisfactor图5BMSCs对肝癌（MHCC97-H）干预情况的病理切片荧光成像（fluorescencestaining×200）Figure5Effectofbonemarrowmesenchymalstemcellsonlivercan-cer(MHCC97-L)detectedbyfluorescenceimaging(GFPlabelthetumorcellsingreencolor,Ex,488nm;Em,543nm;DAPImarktheBMSCsinblue,Ex,358nm;Em,461nm)(×200)3讨论手术切除仍为HCC治疗的首选方法，但经手术切除治疗后的患者仍具有较高的术后复发率和转移率［7］。开辟新疗法成为了肝癌研究领域的重要任务。1974年首次从骨髓中分离获得BMSCs［8］，其具有对炎症和肿瘤发生位点的趋向性［9］，容易在体外培养进行繁殖并维持自我更新能力，集中向炎症组织和重塑组织迁移，具有较低的免疫原性和抗感染特性［10］，有助于器官和组织的快速修复，抑制免疫反应和抗肝纤维化。BMSCs抑制MHCC97-L动物模型肿瘤增长的作用机制可能通过以下途径进行。OPN通过结合其受体整合素αvβ3促进肝癌细胞株HepG膜型CD44v6表达，而CD44v6与透明质酸结合促

鲎橹?细胞呈绿色，，BMSCs细胞呈蓝色（图5）。图1肿瘤重量抑制率与转移因子相关性分析Figure1Correlationanalysisoftumorweightinhibitionrateandtransferfactor图2肿瘤重量抑制率与凋亡因子相关性分析Figure2Correlationanalysisoftumorweightinhibitionrateandapop-tosisfactor图3肿瘤体积抑制率与转移因子相关性分析Figure3Correlationanalysisoftumorvolumeinhibitionrateandtransferfactor图4肿瘤体积抑制率与凋亡因子相关性分析Figure4Correlationanalysisoftumorvolumeinhibitionrateandapoptosisfactor图5BMSCs对肝癌（MHCC97-H）干预情况的病理切片荧光成像（fluorescencestaining×200）Figure5Effectofbonemarrowmesenchymalstemcellsonlivercan-cer(MHCC97-L)detectedbyfluorescenceimaging(GFPlabelthetumorcellsingreencolor,Ex,488nm;Em,543nm;DAPImarktheBMSCsinblue,Ex,358nm;Em,461nm)(×200)3讨论手术切除仍为HCC治疗的首选方法，但经手术切除治疗后的患者仍具有较高的术后复发率和转移率［7］。开辟新疗法成为了肝癌研究领域的重要任务。1974年首次从骨髓中分离获得BMSCs［8］，其具有对炎症和肿瘤发生位点的趋向性［9］，容易在体外培养进行繁殖并维持自我更新能力，集中向炎症组织和重塑组织迁移，具有较低的免疫原性和抗感染特性［10］，有助于器官和组织的快速修复，抑制免疫反应和抗肝纤维化。BMSCs抑制MHCC97-L动物模型肿瘤增长的作用机制可能通过以下途径进行。OPN通过结合其受体整合素αvβ3促进肝癌细胞株HepG膜型CD44v6表达，而CD44v6与透明质酸结合促进肝癌转移，BMSCs通过抑制OPN与IntegrinαⅤ的表达来阻止肝癌的增长与转移。Bax与Bcl-2基因是目前在凋亡调控中研究

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李雁,汤钊猷;我国肝癌模型研究的历史和现状[J];中华实验外科杂志;2001年05期

2 巨邦律,方驰华;纳米技术在肝癌外科中的应用前景[J];外科理论与实践;2004年04期

3 沈卫东,黄介飞;肝癌特异性GGT诊断肝癌的研究进展[J];世界华人消化杂志;2005年09期

4 张立洁;杨春;;化学性药物诱发肝癌模型的研究进展[J];医学研究杂志;2009年06期

5 薛慧婷;黄晓丹;季国忠;;血管内皮生长因子在肝癌诊治中的作用[J];医学综述;2012年16期

6 潘赫男;姚运平;;动物肝癌模型研究现状[J];传染病信息;1995年04期

7 郑青平;倪秉强;;血管内皮生长因子与肝癌[J];医学综述;2009年04期

8 王刚;连忠辉;田文洪;董小岩;尉迟捷;吴小兵;;建立分泌型荧光素酶基因标记的原位肝癌模型及用于干扰素β基因治疗评价[J];生物工程学报;2012年10期

9 迟秀婷;沈加林;;肝癌TACE治疗效果的影像学评估[J];介入放射学杂志;2013年08期

10 张靓;王光明;潘云;杜伟;;实验动物肝癌模型的建立[J];医学理论与实践;2013年16期

相关会议论文 前10条

1 史卫卫;刘秀筠;张秀敏;何琪杨;;白藜芦醇增强吉西他滨抗肝癌活性的机制[A];2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2009年

2 邬雄飞;任进;戚新明;;短期大鼠致肝癌模型肝脏线粒体损伤的研究[A];2007年全国药物毒理学会议论文集[C];2007年

3 徐绍斌;全显跃;孙希杰;;兔VX2种植型肝癌模型动态磁共振张量成像的量化研究[A];中华医学会第十三届全国放射学大会论文汇编（下册）[C];2006年

4 董凤林;查月琴;刘哲婴;董彦;朱利霞;王阿军;李智;肖荣;;超声引导下建立兔VX2肝癌模型的实验研究[A];第二届长三角超声医学论坛暨2009年浙江省超声医学学术年会论文汇编[C];2009年

5 贾洪顺;全显跃;孙涛;;兔VX2肝癌MRI征象与病理对照研究[A];全国医学影像技术学术会议（CMIT-2004）论文汇编[C];2004年

6 陈晟;邓钢;牛焕章;何仕诚;方文;郭金和;朱光宇;余辉;李国昭;滕皋军;;兔VX2肝癌模型的经股动脉插管技术探讨及对肝肾功能的影响[A];中华医学会第十三届全国放射学大会论文汇编（下册）[C];2006年

7 黄智铭;陈旭艳;王剑虹;陈周峰;吴金明;吴建胜;陈向荣;蔡勇;;CD4+CD25+调节性T细胞在肝癌免疫中的研究[A];首届浙江省消化病学术大会论文汇编[C];2008年

8 黄智铭;陈旭艳;;CD4+CD25+调节性T细胞在肝癌免疫中的研究[A];2008年浙江省内科学学术会议论文汇编[C];2008年

9 罗仕华;郑传胜;冯敢生;;重组人P53腺病毒基因经介入方法治疗肝癌的的动物实验研究[A];第十一次全国中西医结合影像学术研讨会暨全国中西医结合影像学研究进展学习班资料汇编[C];2010年

10 张玄;郑翔;何凡;陈知水;;移植肝肝癌中IL-17A的表达及意义的研究[A];2012中国器官移植大会论文汇编[C];2012年

相关重要报纸文章 前5条

1 戴丽昕;肝癌的克星[N];上海科技报;2007年

2 中国抗癌协会临床肿瘤学协作专业委员会主任委员 秦叔逵;治疗肝细胞癌 别只盯着靶向药[N];健康报;2013年

3 记者 王丹 管九苹;肝细胞癌标志物研究获新进展[N];健康报;2013年

4 吴一福;四军医大唐都医院发现硒蛋白P与肝细胞癌发生有关[N];中国医药报;2007年

5 黎彬;肝癌研究重要进展——预测肝癌转移成为可能[N];中国医药报;2004年

相关博士学位论文 前10条

1 唐茁月;磁共振功能成像评价HIFU治疗兔VX2肝癌模型的研究[D];重庆医科大学;2015年

2 尚飞;地塞米松对肝癌微循环功能的影响及机制的研究[D];北京协和医学院;2016年

3 邹煜;经TAE介导靶向VEGF siRNA抑制兔VX2肝癌模型肿瘤血管生成的实验研究[D];浙江大学;2016年

4 任丽;肝癌缺氧微环境CCL28升高的意义及机制研究[D];天津医科大学;2014年

5 张涛;含BODIPY纳米金属有机框架颗粒用于肝癌CT造影剂的研究[D];吉林大学;2017年

6 关天培;基于金纳米棒的光声—荧光双模分子探针的制备及其在肝癌中的应用[D];南方医科大学;2017年

7 唐建华;三维肝癌类组织体模型建立及肺侵袭关联蛋白筛查[D];复旦大学;2010年

8 赵荫农;消融联合瘤周注射免疫佐剂诱导小鼠抗肝癌主动免疫效应系列研究[D];广西医科大学;2015年

9 王宁;肝癌介入治疗与肝癌多药耐药实验研究[D];吉林大学;2005年

10 谢萌;基于介孔二氧化硅的控释靶向给药系统的构建及对肝癌的药效学研究[D];浙江大学;2013年

相关硕士学位论文 前10条

1 段崇玲;活体成像技术监测肝癌Endgolin靶向放射性免疫治疗的实验研究[D];山东大学;2015年

2 杨巧丽;诺帝—褐藻酸钠微球治疗兔VX2肝癌的实验研究[D];四川医科大学;2015年

3 张磊;EPA抑制上皮间质转化介导的肝癌细胞侵袭转移分子机制研究[D];第四军医大学;2015年

4 李传侠;肝癌模型的建立及副肿瘤性周围神经病的电生理研究[D];天津医科大学;2015年

5 蒋勇;超声靶向破坏微泡对H22小鼠原位肝癌化疗的辅助作用[D];重庆医科大学;2015年

6 徐倩;一个新的IL6R抗体“HC6R1”抗肝癌的研究[D];苏州大学;2016年

7 张文广;AQP9过表达对肝癌细胞侵袭转移的影响及分子机制的研究[D];重庆医科大学;2016年

8 程瑞文;IVIM对TACE序贯氩氦刀治疗肝癌疗效评估的价值研究[D];湖南中医药大学;2016年

9 傅明杰;血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对肝癌血管生长因子表达影响的研究[D];大连医科大学;2016年

10 夏雷;肝癌靶向磁共振造影剂LA-PEG-SPION的制备与评价[D];延边大学;2017年

本文编号：2574099