外周血中MicroRNA-21与乳腺癌关联性研究

发布时间：2020-02-29 17:26

【摘要】：目的:乳腺癌的发病率在近十年呈现明显上升趋势,其早期诊断在乳腺癌的治疗中至关重要。本研究采用SYBR实时荧光定量PCR法定量检测乳腺癌患者血清中micro RNA-21含量,旨在建立检测micro RNA-21的方法及确定其医学参考区间,用于乳腺癌的早期诊断。方法:研究采用的标本来自湖南省人民医院及湘雅三医院30例乳腺癌患者及30例良性肿瘤患者,对照组为100例体检者血清。采用荧光实时定量PCR法建立标准曲线,对血清样本中micro RNA-21进行定量检测,比较正常对照组血清中的micro RNA-21与乳腺癌患者组、乳腺良性肿瘤患者组间的表达差异,分析了含量与乳腺癌患者临床病理资料间的关联性。结果:1、用RT-PCR方法检测micro RNA-21的拷贝数在乳腺癌患者组、乳腺良性肿瘤组及正常对照组三者间的表达有显著差异(F=151.925,P0.000);乳腺良性肿瘤组与正常对照组之间无统计学意义(P=0.239)。2、在30例乳腺癌患者血清中,肿块直径2cm组的micro RNA-21浓度显著高于肿直径≤2cm组(F=4.803,P=0.016);发生区域淋巴结转移且淋巴结固定组中micro RNA-21拷贝数高于未发生区域淋巴结转移组和发生区域淋巴结转移且淋巴结非固定组,具有统计学意义(F=3.804,P=0.035);未发生区域淋巴结转移组与发生淋巴结转移且淋巴结不固定组之间无统计学差异(P0.05);在发生远处转移的乳腺癌患者组micro RNA-21要显著高于未发生远处转移组,具有统计学意义(F=20.370,P=0.000)。3、按TNM分类:乳腺癌患者Ⅳ期患者的micro RNA-21的表达水平显著高于0+Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ期组(F=8.327,P0.000),差异具有统计学意义;而0+Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ期组间两两比较,差异不显著,无统计学差异(均P0.05)。4、本法检测micro RNA-21的检测上限为1010copies/μL,检测下限为10copies/μL。5、本法血清中micro RNA-21的医学参考区间为0-8.75×102 copies/μL,呈偏态分布。6、用本法检测micro RNA-21作为诊断乳腺癌的ROC曲线显示曲线下面积为0.983,最佳诊断阈值为8.91*102 copies/μL时,其灵敏度96.7%,特异性为91.7%。结论:1、成功设计micro RNA-21逆转录引物,并建立了实时荧光定量PCR法检测方法。2、建立了实时荧光定量分析法检测micro RNA-21的检测上下限;确定了血清中micro RNA-21的医学参考区间。3、乳腺癌组血清中Micro RNA-21的拷贝数显著高于乳腺良性肿瘤患者组和正常对照组。Micro RNA-21的变量与乳腺癌的TNM分期、肿瘤直径大小、区域转移淋巴结是否固定及是否发生远处转移有关。
【图文】：

实验步骤解析图

总RNA琼脂糖电泳图
【学位授予单位】：湖南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9

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本文编号：2583809