SRPK2高表达促进前列腺癌肿瘤进展和转移

发布时间：2020-03-27 14:05

【摘要】：研究背景及目的:前列腺癌(PCa)已成为诊断最多的肿瘤之一。特别是美国PCa的发病率和死亡率在过去的二十年里持续上升。在中国,也发现类似的表现:前列腺肿瘤患者的发病率和死亡率在近几十年来也呈明显的上升趋向。PCa是一个临床异质性和多特点的癌症,部分PCa患者会发生生化复发并最后进展成为去势抵抗性前列腺癌(CRPC)或转移肿瘤,所以预防PCa的进展和改善诊断方法有利于临床治疗前列腺癌。富含丝氨酸/精氨酸(SR)的蛋白质是前mRNA加工蛋白质,可以调节不同的剪接体,并且据报道与各种癌症中的剪接失衡有关。研究发现选择性剪接因子(ASF)/剪接因子2(SF2)的原型SR蛋白已被发现具致癌作用的,并且在肺癌,乳腺癌和PCa中影响细胞转化。此外,SRPK1和SRPK2等SR蛋白特异性激酶能磷酸化ASF/SF和参与细胞周期的调控。已有研究发现,抑制SRPK1和随后通过调节VEGF亚型抑制肿瘤血管生成的作用,可以抑制PCa生长,结合上述功能和研究发现SRPK2可能在肿瘤疾病进展和恶性转移中起重要作用。鉴于目前研究还没有关于PCa和SRPK2的相关研究报道,因此我们主要是确定SRPK2与PCa肿瘤进展和转移之间的关系。材料和方法:1、细胞株和临床组织样本:过表达SRPK2(LNCaP,DU145和PC3)和对照细胞系由HYY Med公司根据抗病毒剂制备。前列腺组织微阵列(TMA)用于IHC分析。我们还收集具有mRNA表达数据和相关临床信息的TCGA数据库。2、免疫组化(IHC)分析用于检测SRPK2在临床TMA中的表达水平。并且通过统计分析SRPK2表达与各种临床病理特征之间的关联。IHC初步鉴定SRPK2和VEGF-A血管调节的作用。3、通过免疫印迹分析(Western blot)分析和QPCR检测感染SRPK2-过表达载体和对照细胞系中SRPK2蛋白的表达水平。4、CCK-8实验,划痕愈合实验和transwell分析,主要用于检测SRPK2在PCa细胞增殖,细胞迁移、转移和侵袭中的作用。5、细胞周期和细胞凋亡检测用于分析SRPK2对细胞周期和细胞凋亡的作用。6、体内异种移植物模型用于研究SRPK2对体内肿瘤发生和生长的作用。7、生物信息学软件初步探讨SRPK2潜在的功能和下一步可能方向。统计学处理:在本研究中,SPSS用于所有统计分析。所有涉及的连续变量和数据,均以平均值±SD表示。独立样本t检验和单因素方差分析检验用于评估SRPK2表达与各种临床病理特征之间的关联。Kaplan-Meier统计、Cox比例风险回归分析主要对SRPK2是否影响前列腺癌患者多种生存的分析。文中一般认为当P值小于0.05时,统计差异有明显意义。结果:1、我们使用了 Oncomine癌症数据库分析发现前列腺组织中SRPK2的表达高于正常前列腺组织。此外,临床前列腺组织的TMA用IHC评估SRPK2表达发现:与良性前列腺组织相比,PCa组织中SRPK2的表达水平显着更高(P=0.023)。2、当随着肿瘤疾病进展和恶性转移时候,SRPK2表达显着增加。特别是当Gleason Score(GS)≥8时(P0.001)。另外,SRPK2高表达也与晚期病理分期显着相关(P=0.005)。而TCGA数据库的结果也有相似发现:SRPK2表达增高与高GS评分(P0.001),晚期病理分期(P=0.001),转移瘤(P=0.005)相关,表明SRPK2的表达和前列腺癌侵袭性进展和转移存在正相关。Kaplan-Meier生存分析发现PCa患者SRPK2高表达和低表达的生存曲线存在显着性差异(P=0.016),但患者的总生存率无显着差别(P=0.681)。但遗憾的是,Cox比例风险模型没有发现SRPK2和无生化复发生存之间存在关联。3、三种细胞株的体外实验研究发现:SRPK2促进细胞增殖,侵袭,迁移和细胞周期,但抑制PCa的体外凋亡。4、裸鼠皮下肿瘤种植模型显示:SRPK2促进PCa体内异种移植模式的肿瘤生长体积和速度,肿瘤组织提示SRPK2和血管调节子VEGF-A存在一定促进作用。5、DAVID、PANTHER、STRING等生物信息学方法初步分析SRPK2下一步方向。结论:1.SRPK2可能在前列腺肿瘤中起着促癌的作用,依据其临床组织表达SRPK2的不同程度,可辨别前列腺癌及前列腺良性组织;并且一定程度可预测早期生化复发的概率。2.SRPK2的表达上调与前列腺癌的疾病进展、恶性转移相关。基于检测其在前列腺组织的水平高低表达的差别,可初步预测前列腺肿瘤的恶性程度、是否可能转移。3.SRPK2可能促进细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力,从而进一步影响前列腺癌患者的恶性发展、转移及预后。4、SRPK2与其他家族因子相似,也可能促进调节肿瘤血管生成,进一步促进癌症进展和转移。
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分级系统,泌尿外科,协会,欧洲

逦第一章前言逦逡逑主要包括Ｇｌｅａｓｏｎ评分４＋４、３邋＋邋５、５邋＋邋３邋＝邋８的类型，表现为：仅由发逡逑组别４育不良的腺体；融合腺体或筛状腺体组成；或者以形态完好的腺体和少逡逑量缺乏腺体分化的分别作为主要组成逡逑主要包括Ｇｌｅａｓｏｎ评分９？１０分，表现为：腺体缺乏完好结构（或伴坏死），逡逑组别５逡逑有或无伴随腺体形态发育不良、融合腺体或筛状腺体的表现。逡逑

治疗靶点,选择性剪接

Ｆｉｇｕｒｅ邋１－４邋Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ邋Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋Ｈａｌｌｍａｒｋｓ邋ｏｆ邋Ｃａｎｃｅｒ逡逑（Ｈａｎａｈａｎ邋Ｄ，Ｗｅｉｎｂｅｒｇ邋ＲＡ．Ｈａｌｌｍａｒｋｓ邋ｏｆ邋Ｃａｎｃｅｒ：邋Ｔｈｅ邋Ｎｅｘｔ邋Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．邋Ｃｅｌｌ．邋２０１１邋［１８］邋）逡逑本文中研宄将主要集中关于细胞增殖和复制、细胞增殖凋亡等方面，，其涉及的主要研宄内容除了涉及上述可能机制，还涉及包括选择性剪接（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｓｐｌｉｃｉｎｇ）和对应的邋ＳＲＳＦ邋蛋白激酶（Ｓｅｒｉｎｅ邋Ａｒｇｉｎｉｎｅ邋Ｐｒｏｔｅｉｎ邋Ｋｉｎａｓｅｓ邋（ＳＲＰＫｓ），上述可能存在的相关机制被确定，将为前列腺癌的治疗带来新的可能方法和略，指导临床的治疗。逡逑１．５．２选择性剪接（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ邋ｓｐｌｉｃｉｎｇ）相关作用机制与肿瘤逡逑１．５．２．１选择性剪接相关作用与肿瘤概述逡逑选择性剪接（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ邋ｓｐｌｉｃｉｎｇ）或者可变剪接，能够扩展细胞相关基因潜在的编码潜力。在这种机制下，一个单基因可以根据不同的细胞生理环境成不一样的蛋白表型，类似具有拮抗作用的蛋白质。肿瘤细胞中剪接体的改
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.25

【参考文献】