THBS2与PTEN细胞内位移协同调节胃癌肝转移发生的机制研究及胃癌肝转移综合治疗方案制定

发布时间：2020-05-05 13:44

【摘要】：背景胃癌是世界范围内最常见的消化系统恶性肿瘤之一,其发病率居全球恶性肿瘤发病率第五位,死亡率第三位。我国是胃癌发病大国,每年胃癌新发与死亡人数约占全球胃癌的一半。且80%以上的胃癌患者就诊时已经处于进展期或出现远处转移,5年生存率不足30%。肝脏是胃癌血行转移发生率最高的器官。治疗疗效有限,总体预后不理想。因此胃癌肝转移发病机制的研究及综合治疗方案的制定具有重要意义。目的检测THBS2在胃癌中的表达情况,初步探索THBS2在胃癌中的促肿瘤机制。进一步分析THBS2与PTEN细胞内位移协同对胃癌肝转移机制的调节作用;验证卡莫夫通过促进PTEN入核抑制转移的调节作用,及其对胃癌靶向药物赫赛汀的增敏作用;并在动物实验中验证上述趋势。评价胃癌肝转移转移灶局部治疗方法疗效;以及与传统开腹手术对比,分析微创技术在胃癌肝转移中应用的安全性、有效性及长期疗效。方法全外显子和转录组测序、数据分析找到差异基因。多种体外实验联合探索通过FAK信号通路、PI3K通路及PTEN细胞内位移调节胃癌肝转移发生的机制研究,具体试验方法包括:免疫组织化学染色、原代细胞获得、细胞悬浮球培养、慢病毒包装、感染、细胞质、核蛋白分离提取、WesternBlot、RNA提取、RT-PCR\划痕试验、免疫荧光实验、Annexin-V/PI凋亡检测和卡莫夫/赫赛汀处理细胞后CCK-8实验。进而使用体内试验老鼠原位及皮下异种移植瘤模型建立,验证上述趋势。建立回顾性队列,分析临床数据,主要差异分析方法包括:连续变量用单样本Kolmogorov-Smirnov检验正态性,差异分析使用Student's t-检验或the Mann-Whitney U-检验,二分类变量和等级数据使用交叉表分析和卡方检验或Fisher确切检验,Cox单因素多因素风险评估模型分析预后相关因子,Kaplan-Meier法制作生存分析曲线,log-rank确定差异。并使用倾向性匹配评分方法平衡观察性回顾研究的潜在偏倚。结果(1)THBS2是胃癌组织中的差异表达基因,胃癌组织较正常对照组织高表达,且有远处器官转移者表达最高;(2)THBS2在同时性胃癌肝转移患者中高表达,且预示着胃癌患者较差的预后;(3)THBS2在胃癌肝转移原代细胞和人胃癌细胞系NCI-N87中高表达;(4)THBS2的低表达能够诱导MET,通过联合PTEN入核阻止胃癌细胞转移;(5)卡莫夫通过促进PTEN入核抑制肿瘤细胞转移;(6)卡莫夫可作为一种化学增敏剂提高曲妥珠单抗疗效;(7)对于符合适应症的患者,肝转移灶局部切除,长期疗效最佳;(8)胃癌肝转移患者,转移灶有R0切除可能可以考虑手术治疗;(9)若转移灶不适合手术切除,可以考虑TACE、RFA等替代疗法,TACE的经济-效益比较高;(10)微创手术在治疗胃癌肝转移中有独特优势,出血量更少,术后胃肠道功能恢复更快,且并发症发生率无增加;(11)微创手术的长期疗效与开腹手术相似,但给患者的创伤更小;(12)对于有经验的外科医生,微创手术治疗晚期胃癌同样具有很高的可行性与安全性。结论THBS2通过活化其下游作用因子FAK促进肿瘤形成。本研究发现除此通路外,PTEN细胞内表达位置的改变很可能是调节肿瘤细胞转移能力的重要机制之一,二者联合可促进胃癌肝转移的发生。另外,卡莫夫促进PTEN入核能够增敏曲妥珠单抗疗效,因此,可否以THBS2为新的治疗靶点研制新型靶向治疗药物,结合卡莫夫杀伤肿瘤的同时抑制转移,即可双药使用,也可联合传统靶向药物赫赛汀用于晚期转移性胃癌的综合治疗。胃癌肝转移患者转移灶有R0切除可能可考虑手术治疗,否则考虑TACE、RFA等替代疗法。微创手术在治疗胃癌肝转移中有独特优势,其长期疗效与开腹手术相似,且手术创伤更小。
【图文】：

图３ｂ和３ｃ

THBS2与PTEN细胞内位移协同调节胃癌肝转移发生的机制研究及胃癌肝转移综合治疗方案制定

图５ｂ展逡逑
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.2

【参考文献】