胃癌中lncRNA MEG3与E-cadherin的表达意义及相关性分析

发布时间：2020-05-15 19:15

【摘要】：背景和目的胃癌(gastric cancer,GC)是全世界最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在恶性肿瘤中分别位居第五位和第三位。据统计,2012年世界范围内胃癌新发病例超过95万例,因胃癌死亡的病例超过72万例。中国的发病例数和死亡例数约占世界的一半。尽管近年来化疗、放疗和手术技术在GC方面取得了进展,但GC患者的生存率仍不尽人意。主要是因为GC缺乏早期诊断方法,大多数患者被诊断时已属晚期,并且在治疗、复发转移监测及预后评估等方面存在较多困难。尽管许多致癌基因或肿瘤抑制基因已被确定为GC发生的关键参与者,但是,几乎没有建立公认的生物标志物来促进患者的综合管理。因此,寻找有效的GC特异性标志物为其提供临床诊断及治疗依据对于提高GC的整体治疗水平意义重大。越来越多的研究表明,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)在各种癌症中起着至关重要的调节作用。lnc RNAs可能通过改变染色质结构或通过调节蛋白质编码基因的转录而发挥致癌基因或肿瘤抑制剂的作用。母系表达基因3(Materally expressed gene 3,MEG3)是一种肿瘤抑制基因,编码与肿瘤发生相关的非编码RNA(noncoding RNA,nc RNA)。MEG3在许多正常组织中表达,而在许多人类肿瘤和肿瘤衍生的细胞系中经常缺失、突变或水平降低。研究表明MEG3可能是胃癌的抑癌基因。E-cadherin是钙介导的细胞粘附分子,其异常(低)表达与一些癌症的晚期阶段和更具侵袭性有关。E-cadherin被认为是肿瘤转移的抑制剂,其低表达是上皮-间质转化(EMT)的标志之一。EMT可能涉及表观遗传调节,例如组蛋白修饰、DNA甲基化、micro RNA和lnc RNAs等。研究表明一些lnc RNAs以E-cadherin为靶点调节EMT过程。表观遗传学调控MEG3的表达,MEG3在多种肿瘤中存在异常甲基化。课题组前期研究发现,过表达MEG3的GC细胞株获得了EMT表型特征。那么,lnc RNA MEG3和E-cadherin在GC中的作用机制如何?两者之间是否存在某种关系?目前基本不清楚。本研究通过测定GC患者癌组织、癌旁正常组织中lnc RNA MEG3和E-cadherin的相对表达水平,探讨lnc RNA MEG3和E-cadherin与患者临床病理特征的关系及两者在GC癌组织中表达的相关性。方法1.应用实时荧光定量PCR、免疫组织化学法,检测56例胃癌患者癌组织、癌旁正常组织中lnc RNA MEG3和E-cadherin的表达情况,并分别分析两者与患者临床病理特征之间的关系及两者在癌组织中表达的相关性。2.应用SPSS 21.0软件、Graphpad Prism 6.0软件分析实验结果,采用t检验、χ2检验分别比较lnc RNA MEG3和E-cadherin在癌组织和癌旁正常组织中表达有无差异;采用χ2检验分别验证两者在癌组织中的相对表达水平与患者临床病理特征的关系;采用Spearman相关性分析探讨两者在癌组织中表达的相关性。检验显著性水准取α=0.05,P0.05表示差异有统计学意义。结果1.与配对癌旁正常组织相比,lnc RNA MEG3、E-cadherin在胃癌癌组织中的相对表达量、阳性表达率均明显降低(均P0.05);2.胃癌组织中lnc RNA MEG3在有淋巴结转移的表达情况明显低于无淋巴转移(P=0.033),肿瘤大的表达情况明显低于肿瘤小的(P=0.038),分期越晚,表达量越低,差异有统计学意义(P=0.017),其在胃癌组织中相对表达水平与性别、年龄、浸润深度、病理类型、脉管癌栓、分化程度、远处转移和Her-2无明显相关性(P0.05);3.胃癌组织中E-cadherin在有淋巴结转移的表达情况明显低于无淋巴转移的(P=0.037),在低分化者的表达情况明显低于高中分化者(P=0.038),肿瘤大的表达情况明显低于肿瘤小的(P=0.008),分期越晚,表达量越低,差异有统计学意义(P=0.003),其在胃癌组织中相对表达水平与性别、年龄、浸润深度、病理类型、脉管癌栓、远处转移和Her-2无明显相关性(P0.05);4.Lnc RNA MEG3与E-cadherin在癌组织中的相对表达水平呈显著正相关(P0.001),其中r=0.651。结论1.Lnc RNA MEG3和E-cadherin在胃癌中低表达,两者均与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期有关,可能参与胃癌的发生发展、侵袭转移,可能作为评估病情的潜在生物标志物;2.Lnc RNA MEG3和E-cadherin在胃癌癌组织中表达存在正相关性,两者可能存在调控关系。
【图文】：

完整性,癌组织,表达水平,质量合格

依次为28s、18s、5s，其中28s最亮，并且其亮度约是18s条带亮度的2倍，，5s条带较模糊，甚至部分不显示。本电泳结果证明所提取胃癌组织中的总RNA完整性良好，质量合格，如图3.1所示。图3.1 琼脂糖凝胶电泳检测提取总RNA完整性3.2 与配对癌旁正常组织相比，胃癌患者癌组织中 MEG3 和 E-cadherin 表达水平明显降低本研究共检测了56对胃癌患者癌组织及其配对癌旁正常组织中MEG3的表达水平。结果显示，与配对癌旁正常组织相比，MEG3在83.93％（47/56）的癌组织中表达水平下降，且MEG3在癌组织中的表达水平明显低于配对癌旁正常组织（P<0.001），如图3.2所示。根据MEG3相对表达水平（癌组织/癌旁正常

癌组织,免疫组化染色,胃癌组织

癌旁正常组织＞0.61，n=20）和低表达组（癌组织/癌旁正常组织≤0.61，n=36）。E-cadherin在胃癌组织中的阳性表达率为46.43％（26/56），明显低于配对癌旁正常组织，差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组化染色如图3.3所示。图3.2 与癌旁正常组织相比，MEG3在胃癌患者癌组织中表达显著降低图3.3 胃癌患者癌组织中E-cadherin免疫组化染色（×200）
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.2

【参考文献】