抗菌肽LL-37在结肠癌中表达和对肠癌细胞系增殖的影响

发布时间：2020-05-29 21:37

【摘要】：[目的]抗菌肽LL-37是人类唯一的宿主防御肽,广泛存在于体内组织中。研究发现抗菌肽LL-37在乳腺癌和肺癌等癌组织中呈高表达,而在胃癌和淋巴瘤等肿瘤中癌组织低表达,可见LL-37在各类肿瘤组织中的表达不一致。体外给予LL-37处理相应的细胞系,在乳腺癌和肺癌中促进该细胞系的增殖,而在胃癌中抑制其细胞系的增殖,各研究结果间存在差异。本研究的目的包括:1.明确结肠癌患者血液和组织标本中LL-37的表达水平。2.通过分析研究外源性LL-37对体外培养的正常结肠上皮细胞FHC和结肠癌细胞HCT116和SW480增殖是否具有抑制作用。了解LL-37的表达差异与结肠癌的发生和发展的关系,可能为结肠癌的诊断和治疗提供新的思路。[方法]1.收集30例结肠癌患者结肠组织,每例结肠癌患者术中标本分别取癌组织(肿瘤中心取材,避免取坏死组织)、癌旁组织(距病灶大于2cm小于5cm的组织)和正常组织(在离肿瘤组织边缘最远端取材),分别提取各组织总蛋白,采取Western-blot方法检测分析三组组织中LL-37的表达水平。2.收集30例结肠癌患者血清和健康人血清,采用ELISA法检测分别检测血清中和三组组织中LL-37的表达水平。3.通过采用不同浓度LL-37(1-300μg/mL)处理FHC、HCT116和SW480三种细胞系,采用MTT比色法,观察不同浓度LL-37对正常细胞和肿瘤细胞增殖的影响,进而分析LL-37对肠癌细胞增殖是否有抑制作用。4.统计分析:所有资料使用SPSS21.0统计软件进行分析,论文结果中符合正态分布的实验数据以x±s 表示,多组间比较分析采用方差分析用方差分析或者t检验,P0.05为差异有统计学意义。[结果]1.30例结肠癌患者术后病理组织中,Western-blot和ELISA实验结果均提示LL-37的表达以癌旁组织最高,其次为正常组织,癌组织中LL-37的表达最低。2.ELISA实验检测结果发现与30例健康成人组相比,结肠癌患者血清中的LL-37的表达较高,且具有统计学意义(P0.05)。3.LL-37在剂量范围为1-200μg/mL时对人正常结肠上皮细胞FHC活力抑制没有统计学差异(P0.05),只有当剂量大于3000μg/mL对FHC增值活性有抑制作用,但抑制作用甚微。在HCT116和SW480肠癌细胞系中,LL-37浓度小于50μg/mL时,对细胞增殖活性几乎无影响;当LL-37浓度在100μg/mL-300μg/mL之间时,其细胞毒作用呈浓度依赖性;当LL-37浓度为300μg/mL时,HCT116几乎全部死亡,SW480仅剩少部分存活。[结论]本研究发现抗菌肽LL-37在结肠癌患者癌组织标本中的表达较正常和癌旁组织低,但结肠癌患者血清中的LL-37表达却较健康对照组高提示LL-37可能与结肠癌的发生发展有关。抗菌肽LL-37抑制肠癌细胞系HCT116和SW480的增殖较明显,而对人正常结肠上皮细胞FHC的细胞毒作用较弱,或可为结肠癌的治疗提供帮助。深入了解抗菌肽LL-37与结肠癌的关系,可能为结肠癌诊断提供新的分子靶点。
【图文】：

结肠癌,表达水平,患者,检出率

ｈＣＡＰ－１８／ＬＬ－３７的表达水平。与正常对照组相比，结肠癌患者组织中ＬＬ－３７逡逑低表达有２３例，，检出率为７６．７％邋（２３／３０），结肠癌组织中高表达有７例，逡逑检出率为２３．３％邋（７／３０）。如图１和图２所示，可以看出，ＬＬ－３７在结肠癌患逡逑者组织中癌旁组织表达水平最高，其次为正常组织，在癌组织中ＬＬ－３７的表逡逑达最低。这些数据表明抗菌肽ＬＬ－３７在人结肠癌中呈低度表达。逡逑癌逦癌旁逦正常逡逑ｌｌ－３７邋｜？Ｍｉ？逦ｍｍｍ逡逑（３－ａｃｔｉｎ逦＾逡逑图１结肠癌患者组织中ＬＬ－３７表达水平逡逑Ｆｉｇ邋１．邋Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｌｅｖｅｌ邋ｏｆ邋ＬＬ－３７邋ｉｎ邋Ｃｏｌｏｎ邋Ｃａｎｃｅｒ邋ｐａｔｉｅｎｔｓ逡逑？ｈ逡逑｜｜逦逦ｆｃ逦逡逑％邋２．０－ｊ逦Ｉ逡逑栜逦

结肠癌,表达水平,患者,检出率

ｈＣＡＰ－１８／ＬＬ－３７的表达水平。与正常对照组相比，结肠癌患者组织中ＬＬ－３７逡逑低表达有２３例，检出率为７６．７％邋（２３／３０），结肠癌组织中高表达有７例，逡逑检出率为２３．３％邋（７／３０）。如图１和图２所示，可以看出，ＬＬ－３７在结肠癌患逡逑者组织中癌旁组织表达水平最高，其次为正常组织，在癌组织中ＬＬ－３７的表逡逑达最低。这些数据表明抗菌肽ＬＬ－３７在人结肠癌中呈低度表达。逡逑癌逦癌旁逦正常逡逑ｌｌ－３７邋｜？Ｍｉ？逦ｍｍｍ逡逑（３－ａｃｔｉｎ逦＾逡逑图１结肠癌患者组织中ＬＬ－３７表达水平逡逑Ｆｉｇ邋１．邋Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｌｅｖｅｌ邋ｏｆ邋ＬＬ－３７邋ｉｎ邋Ｃｏｌｏｎ邋Ｃａｎｃｅｒ邋ｐａｔｉｅｎｔｓ逡逑？ｈ逡逑｜｜逦逦ｆｃ逦逡逑％邋２．０－ｊ逦Ｉ逡逑栜逦￣逡逑
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.35

【参考文献】