沉默Mig-7对前列腺癌PC3细胞迁移、侵袭及血管生成拟态的影响

发布时间：2020-06-18 22:41

【摘要】：目的:沉默人前列腺癌PC3细胞Mig-7基因,分析Mig-7基因对PC3细胞血管生成拟态形成及体外迁移、侵袭能力的影响。方法:培养人前列腺癌细胞株PC3,采用siRNA沉默前列腺癌PC3细胞中Mig-7基因,通过荧光实时定量PCR检测Mig-7 mRNA的表达变化,蛋白质印迹法检测Mig-7蛋白的变化,选择干扰效果最好的一组进行下一步实验。实验分PC3组、PC3+NC-siRNA组PC3+Mig-7siRNA组,转染48h后将三组细胞进行体外三维培养,倒置显微镜下观察血管生成拟态数目,细胞划痕实验及Transwell法观察三组细胞迁移、侵袭能力。结果:实时荧光定量PCR及Western-blot结果示:siRNA沉默人前列腺癌PC3细胞中Mig-7基因后,PC3细胞mRNA表达水平及蛋白表达水平均明显下降,Mig-7基因沉默效率达60%以上;体外三维培养结果示:沉默Mig-7基因,前列腺癌PC3细胞血管生成拟态数目明显减少;划痕实验及Transwell实验结果示:沉默Mig-7基因,PC3细胞迁移及侵袭能力减弱。结论:沉默Mig-7基因的表达可抑制人前列腺癌PC3细胞的体外血管生成拟态形成及迁移、侵袭能力。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.25
【图文】：

第四章 结果检测转染效率采用脂质体转染法转染 FAM-siRNA 后，在倒置荧光显微镜下可观察 标签的绿色荧光（如下图所示），随机取五个 视野并计算细胞数目，显示成功转染的细胞数占总细胞数 60%以上，满足后续实验的要求。

组样品琼脂糖电泳总RNA

【参考文献】

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本文编号：2719937