转录因子SLAP2在乳腺癌发生发展中的作用机制

发布时间：2020-06-19 15:33

【摘要】：第一部分转录因子SLAP2调控基因预测乳腺癌患者的生存率目的:本部分旨在探讨乳腺癌患者肿瘤发生相关分子的表达改变与乳腺癌患者生存率的相关性。方法:本部分研究中的基因表达与临床信息资料来源于GSE62944库中1119例乳腺癌标本和113例正常乳腺标本。本次研究通过Cox得分来评价表达显著改变的蛋白,从而探讨基因表达与患者生存率的相关性。结果:首先,获得最大Cox评分的mRNAs进一步将患者分为4个亚组。在本次研究中,我们共获得了 12019个差异表达的基因,通过共表达分析揭示各模块之间不同亚群的改变情况。基于以上研究,我们构建了转录因子(TF)调控网络,进而发现与癌症生存相关的关键转录因子。按照Cox评分最高的25个基因,我们将所有样本分为4个亚组。这4个亚组的生存曲线有显著差异,根据不同的存活曲线,我们筛选了将1、2、4亚组来进一步探讨下游的分子机制。然后,共表达模块分析表明,其适应性免疫反应的基因可以用于分析三个亚组之间的生存差异。结果显示差异表达最明显的25个基因都可以被转录因子SLAP2所调节。SLAP2在预测乳腺癌的发生发展中有较强的灵敏性。结论:结果表明,参与适应性免疫应答的转录因子SLAP2所调节的基因与乳腺癌患者的生存率相关。第二部分SLAP2通过抑制mTOR通路调控乳腺癌的恶性发展目的:近些年来,乳腺癌的治疗技术已经发生了很大的提高和进步,大多数乳腺癌患者通过手术、放疗、化疗、内分泌治疗及分子靶向治疗等手段,预后得到了极大的改善。但是,仍然有很多乳腺癌患者遭受肿瘤复发和转移的困扰。积极寻求新的乳腺癌治疗的方法及克服肿瘤耐药性等问题,成为当前乳腺癌治疗的焦点。Src类似接头蛋白(Src-like adaptor protein,SLAP)在各种类型细胞中广泛表达,但在淋巴细胞中研究最为深入。SLAP主要包含两个异构体,SLAPl和SLAP2。基于上一章的研究结果,SLAP2可以更好的预测乳腺癌的生存率,因此,本文主要探讨SLAP2在乳腺癌发生发展中的作用机制。方法:首先,我们用real time PCR和western blot的方法检测了乳腺癌组织与正常对照中SLAP2的mRNA和蛋白水平。同时,在MDA-MB-231细胞中,通过腺病毒载体高低表达SLAP2,检测其对肿瘤细胞恶性增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。此外,我们还进一部探讨了 SLAP2表达异常对mTOR信号通路活化的影响。结果:首先,与正常对照相比,在乳腺癌样本中,SLAP2的mRNA和蛋白水平都明显降低。进一步的研究发现,乳腺癌细胞中降低SLAP2的表达,可以显著促进mTOR信号通路的活化,从而引起乳腺癌细胞MDA-MB-231的恶性增殖、迁移和侵袭,并降低乳腺癌细胞的凋亡水平。与此相反,乳腺癌细胞中过表达SLAP2可以显著抑制mTOR通路的活化,降低MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并诱导乳腺癌细胞发生凋亡。结论:结果表明,在乳腺癌的发生与发展过程中,SLAP2是一个抑癌因子,其作用机制主要通过抑制mTOR信号通路活化,从而阻碍乳腺癌的恶性发展。这些结果提示我们,SLAP2可能是未来乳腺癌治疗的一个潜在靶标。
【学位授予单位】：武汉大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.9
【图文】：

生存曲线,肿瘤,样本,共表达

３．２共表达分析发现与不同预后相关的模块逡逑为／找到与患者牛存相关的井表达模块，我们进行／邋ＤＥＧＳ和共表达分析。逡逑首先，ＤＥＧｓ分析了丨，２和４亚俎，共〖２０１９个ＤＥＧｓ被发现（图２－２Ａ）。在构逡逑建／共表达网络在差异表达基因中共发现／邋２３个共表达功能模块。这些功逡逑能模块包括㈣种细胞质膜－膜粘附模块、肽类激素分泌调节模块、免疫砬答自适逡逑应模块和脂肪酸的生物合成模块（图２－２Ｂ）。其中，有５６０个基因参与适应性免逡逑疫应答，３６个基因属于同种细胞黏附分子，６３个基因负责脂肪酸生物合成过程逡逑中，５９个基因调节肽激素分泌（图２－２Ｃ）。总之，研究结果提示，差异表达基因逡逑共表达网络综合分析可以进一步缩小搜索范围并有助于发现有意义的模块空间。逡逑１９逡逑

模块图,共表达,模块,转录因子

我们构建了基于整个数据集的转录因子网络。上述四个模块中的基因己成为关注逡逑的焦点。在适应性免疫应答基因的共表达分析模块中，有２９个转录因子与至少逡逑１０个靶基因调控的信号通路相关（图２－３Ａ）。有趣的是，其中两个转录因子，即逡逑ＳＬＡＰ２和干扰素调节因子（ＩＲＦ），可以独立调节大部分基因。在脂肪酸生物合逡逑成过程的模块中，３２个转录因子可以共同调控这一模块（图２－３Ｂ）。然而，３２逡逑个转录因子中的２６个转录因子可以在这一模块中控制２－３个靶基因。通过富集逡逑分析转录因子共同调节基因分析发现，６个肽激素的分泌调节模块和９个在细胞逡逑膜粘附分子中具有调节作用的转录因子被发现（图２－３Ｃ和２－３Ｄ）。总的来说，逡逑结果表明，转录因子可以调控的共表达模块可能在患者生存率中起着重要作用。逡逑２０逡逑

【参考文献】