BMP-4与胰腺炎和胰腺癌关系的初步研究
发布时间：2020-06-30 12:46
【摘要】：目的:研究骨形成蛋白-4(BMP-4)在小鼠急性胰腺炎AP、慢性胰腺炎CP和人的胰腺癌组织及胰腺癌细胞中的分子表达情况,探讨其在胰腺炎和胰腺癌中的临床相关性及其作用机制方法:采用腹腔注射雨蛙肽的造模方法,AP组和CP组分别于造模第2天20h和6周后摘眼球取血,分离血清,并行腹腔麻醉,提取胰腺组织固定、石蜡包埋。再对胰腺组织进行病理学评分、纤维化程度评估和血清淀粉酶活性测定来评估炎症模型的建立;应用免疫组化的方法观察BMP-4在急慢性炎症下腺泡和导管系统中(包括PDGs)的表达变化;应用外源性BMP-4刺激HPDE和Miapaca2细胞行CCK8增值实验和细胞迁移/侵袭实验,并设立阳性对照组TGF-β,观察外源性BMP-4刺激下细胞学功能表现;应用western blot法检测胰腺癌细胞系与正常细胞系的表达差异,并利用公开数据库收集病例进行BMP-4相关的生存分析,探讨其对预后的影响。结果:AP组淀粉酶活性较对照组明显升高(11685.83±563.84 vs 3562.16±365.71,P0.05),而CP组淀粉酶活性较对照组显著降低(2560.50±374.69 vs3562.16±365.71,P0.05);AP组腺泡水肿、部分腺泡坏死、组织充血、炎症细胞浸润;CP组腺泡萎缩、间质纤维化,AP和CP组病理学评分分别为:3.33±0.52和8.50±0.55,与对照组相比差异具有统计学意义(P0.05);CP组天狼猩红染色阳性面积较对照组明显增加((19.2±2.86)%vs(9.20±1.76)%,P0.05),CP组的胶原纤维含量较正常组明显升高,主要分布于胰腺导管及血管周围,并出现明显的小叶间及腺泡间胶原沉积;对照组BMP-4主要在腺泡细胞的胞质中表达,细胞核中几乎无表达,胰腺导管几乎无表达;在炎症刺激下,AP组的腺泡细胞中BMP-4的阳性表达面积较正常组稍降低,但胰管细胞中出现明显的染色强阳性,HIS评分明显高于对照组(P0.05);CP组中的萎缩腺体BMP-4表达较正常组显著减少,而胰腺导管系统细胞中BMP-4的表达较正常组明显升高,HIS评分明显高于对照组(P0.05)。在胰腺导管系统中PDGs是胰腺导管的干细胞巢,是导管上皮修复的重要结构,在炎症刺激下,PDGs结构明显增多,且高表达BMP-4;在BMP-4刺激下HPDE和Miapaca2细胞的增殖能力较对照组明显增强(P0.05),但并没有发现对BMP-4的计量依耐性,而Miapaca2的增殖对BMP-4呈现出明显的计量依耐性,在BMP-4浓度为100ng/ml时,Miapaca2的增值活性便明显升高;在BMP-4刺激组中的HPDE细胞的迁移能力和Miapaca2侵袭能力与TGF-β阳性对照组相似,但较对照组明显增高(P0.05);研究显示BMP-4在胰腺癌细胞系中的表达普遍较胰腺导管正常上皮细胞(HPDE和HPNE)表达增高(P0.05);并利用公共数据库TCGA挖掘177例胰腺癌患者预后数据进行KM生存分析发现,胰腺癌患者中BMP-4表达上调,生存分析发现,高表达组的总体生存率较低表达组患者明显降低,高表达组RFS为15.77个月,而低表达组RFS为23.17个月(P0.05)。结论:炎症刺激下可引起BMP-4在胰腺导管系统中表达明显增加,促进导管系统的细胞增殖与迁移,促进导管上皮的损伤修复;而在胰腺癌中,BMP-4增加胰腺癌细胞的增殖及侵袭能力,有助于肿瘤的进展。
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R576;R735.9
【图文】：
鼠胰腺组织病理学改变照组中胰腺 HE 染色显示正常胰腺组织，而 AP 组出现腺泡细胞水肿、死、组织充血及局部少量炎症细胞浸润，呈现急性水肿型胰腺炎（ CP 组的胰腺组织中可见腺泡萎缩、炎症细胞大量浸润，小叶结构破显纤维化，胰腺组织出现大量腺泡细胞坏死，出现大量导管样细胞等表现（图 1C、D、E）。AP 和 CP 组病理学评分分别为：3.33±0.52 和，与对照组相比差异具有统计学意义（P < 0.05）。（表 1.2）腺天狼猩红染色对照组相比，AP 组胰腺的天狼猩红染色阳性面积比率无差异（P > 0.达分布于导管、血管周围，少量分布于小叶间。CP 组天狼猩红染色对照组明显增加（（19.2±2.86）% vs（9.20±1.76）%，P < 0.05原纤维含量较正常组明显升高，纤维增粗，除分布于导管及血管周含量增高，小叶间和小叶内也大量纤维增生。
2 雨蛙肽诱导下小鼠胰腺组织中纤维含量的变化。A.正常小鼠胰纤维主要表达分布于导管、血管周围，少量分布于小叶间 B.急性中的纤维主要表达分布于导管、血管周围，少量分布于小叶间 C小鼠模型中纤维含量增高，纤维增粗，除分布于导管、血管周围含量增高，小叶间和小叶内也大量纤维增生。D.各组中的天狼猩面积比例。（x200，*：P<0.05；**：P<0.001）P-4 在胰腺炎中的表达验发现，在急慢性胰腺炎模型中，BMP-4 表达变化与炎症中损伤主主要变化发生在腺泡和导管系统中。我们发现对照组 BMP-4 主要在质中表达，血管壁可见少量阳性染色，胰腺导管几乎无表达；在炎 组的腺泡细胞中 BMP-4 的阳性表达面积较正常组稍降低，但胰管显的染色阳性，HIS 评分明显高于对照组（P < 0.05）；CP 组中的
本文编号：2735330
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R576;R735.9
【图文】：
鼠胰腺组织病理学改变照组中胰腺 HE 染色显示正常胰腺组织，而 AP 组出现腺泡细胞水肿、死、组织充血及局部少量炎症细胞浸润，呈现急性水肿型胰腺炎（ CP 组的胰腺组织中可见腺泡萎缩、炎症细胞大量浸润，小叶结构破显纤维化，胰腺组织出现大量腺泡细胞坏死，出现大量导管样细胞等表现（图 1C、D、E）。AP 和 CP 组病理学评分分别为：3.33±0.52 和，与对照组相比差异具有统计学意义（P < 0.05）。（表 1.2）腺天狼猩红染色对照组相比，AP 组胰腺的天狼猩红染色阳性面积比率无差异（P > 0.达分布于导管、血管周围，少量分布于小叶间。CP 组天狼猩红染色对照组明显增加（（19.2±2.86）% vs（9.20±1.76）%，P < 0.05原纤维含量较正常组明显升高，纤维增粗，除分布于导管及血管周含量增高，小叶间和小叶内也大量纤维增生。
2 雨蛙肽诱导下小鼠胰腺组织中纤维含量的变化。A.正常小鼠胰纤维主要表达分布于导管、血管周围，少量分布于小叶间 B.急性中的纤维主要表达分布于导管、血管周围，少量分布于小叶间 C小鼠模型中纤维含量增高，纤维增粗，除分布于导管、血管周围含量增高，小叶间和小叶内也大量纤维增生。D.各组中的天狼猩面积比例。（x200，*：P<0.05；**：P<0.001）P-4 在胰腺炎中的表达验发现，在急慢性胰腺炎模型中，BMP-4 表达变化与炎症中损伤主主要变化发生在腺泡和导管系统中。我们发现对照组 BMP-4 主要在质中表达，血管壁可见少量阳性染色，胰腺导管几乎无表达；在炎 组的腺泡细胞中 BMP-4 的阳性表达面积较正常组稍降低，但胰管显的染色阳性，HIS 评分明显高于对照组（P < 0.05）；CP 组中的
【参考文献】
相关期刊论文 前1条
1 贝抗胜;吴礼杨;孙庆文;熊英辉;杜志坡;刘延晓;;BMP4促进人骨膜来源细胞体外成软骨细胞分化[J];中华显微外科杂志;2013年05期
本文编号：2735330
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