睑板腺癌中RASSF1A基因的甲基化状态及表达

发布时间：2020-07-23 17:34

【摘要】：目的:睑板腺癌(meibomian gland carcinoma,MGCA)尽管属于恶性程度很高的恶性肿瘤,却很少出现在国外的文献上,而在国人眼睑恶性肿瘤中,其发病率仅次于基底细胞癌,位居眼睑恶性肿瘤的第2位(约占32.7%)。且呈增长的趋势。该肿瘤具有明显的浸润性和侵袭性,临床很容易误诊,出现复发、转移,并且治疗上很棘手,严重威胁着患者的视力和生命。要降低睑板腺癌的发病率和死亡率,必须重视其发病机制的研究以做到早期诊断。除DNA核苷酸序列改变可影响肿瘤发生发展外,表观遗传学机制在肿瘤形成过程中的作用越来越受到重视,肿瘤中普遍存在DNA甲基化状态的改变,表现为总体的甲基化水平降低与局部的甲基化水平升高,即抑癌基因与修复基因的高甲基化与反转录转座子、癌基因的去甲基化,这预示着它可作为一种新的肿瘤形成敏感指标,甚至应用于肿瘤的预防和治疗。RASSF1A是定位在染色体3p21.3片段上的,并在2000年被Dammann等研究人员发现的新型的Ras因子。它是(RASSF1A-RASSF1H)七种亚型中的一种且隶属于RASSF1家族(Ras Association Domain family 1),后面相关的研究发现其是一个新型的抑癌基因,其失活可以诱发产生各类恶性肿瘤,在人类的肿瘤中,RASSFIA基因几乎从不发生突变,启动子甲基化在RASSFIA表达中发挥主要作用。RASSF1A被发现在肿瘤中是除了P16基因以外,甲基化的程度最广泛以及最高的一种基因之一。由于对在肿瘤中RASSFIA表达缺失和启动子区高甲基化的不断研究发现,其对肿瘤的发生和发展起非常重要作用。因而可认为RASSF1A基因的甲基化改变可成为早期发现肿瘤的关键候选指标之一。方法:1应用免疫组织化学(immunohistochemistry)SP法检测40例睑板腺癌组织及相应癌旁正常组织中RASSF1A蛋白的表达情况。2应用甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)技术检测40例睑板腺癌组织及40例正常组织中RASSF1A基因的甲基化状态。3运用统计软件SPSS13.0对数据进行统计学分析。结果:1 RASSF1A基因甲基化状态:40例睑板腺癌中,29例癌组织存在RASSF1A基因启动子甲基化,甲基化频率72.5%(29/40);40例正常睑板腺中,6例组织存在RASSF1A基因启动子甲基化,甲基化频率15%(6/40)。睑板腺癌RASSF1A基因启动子甲基化率明显高于正常睑板腺,两组比较差异有统计学意义(χ2=22.236,P=0.0000.01)。进一步分组分析发现,RASSF1A基因该位点甲基化率与患者年龄患者(P0.05)、性别(P0.05)、肿瘤组织TNM分期(P0.05)、分化程度(P0.05)、有无复发(P0.05)无相关性。2 RASSF1A蛋白表达情况:40例睑板腺癌中,11例RASSF1A蛋白表达阳性,表达率27.5%(11/40);40例正常睑板腺RASSF1A蛋白阳性表达100%(40/40)。睑板腺癌中RASSF1A蛋白阳性表达率明显低于正常睑板腺,差异有统计学意义(χ2=30.000,P=0.0000.01)。进一步分组分析发现,RASSF1A蛋白表达与患者年龄(P0.05)、性别(P0.05)、肿瘤组织TNM分期(P0.05)、分化程度(P0.05)、有无复发(P0.05)无相关性。结论:睑板腺癌组织中,存在RASSF1A基因高甲基化及RASSF1A蛋白显著低表达或缺失,由此可以推断:1 RASSF1A基因启动子甲基化可能是造成该基因失活的原因。2 RASSF1A基因启动子甲基化可能是睑板腺癌的发病机制之一,RASSF1A蛋白表达减少或缺失对睑板腺癌的发生、发展起了重要的促生作用。3 RASSF1A有望成为睑板腺癌的分子标志物,从而为睑板腺癌的早期诊断及生物靶向治疗提供理论依据。4 RASSF1A甲基化状态与患者年龄、性别等因素无关,与淋巴结转移、分化程度、临床分期、是否复发等无关,提示RASSF1A甲基化可能与睑板腺癌发展和浸润无关,而与肿瘤发生的机制有关。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.7

【参考文献】