LPAR4在乳腺癌中的表达情况及对细胞侵袭与迁移的影响

发布时间：2020-08-14 11:18

【摘要】：研究工作目的和意义:乳腺癌(breast cancer,BC)是全球女性最常见的肿瘤,近年来已上升至女性死因第一位,对患者和家属造成严重的经济负担。自从上世纪九十年代末起,乳腺癌治疗已经由传统治疗方式逐渐发展到个体化的综合治疗方式,并获得极大的临床进展。其中分子靶向治疗已经成为现今肿瘤研究的热点,关于乳腺癌的分子靶向治疗也已经开展并取得了不菲的成绩。但由于侵袭转移的高发导致侵袭性和转移性乳腺癌五年生存率依然很低,所以了解乳腺癌侵袭和转移的生物学机制对于寻找新的治疗靶点来提高乳腺癌的治疗效果及预后至关重要。LPA,全称溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid),是一种水溶性甘油磷脂,作为一种信号分子,其能作用于6种G蛋白偶联受体LPAR1-6,调控机体的发育、维持其正常生理功能,同时也参与了机体一系列的病理过程,如神经疼痛、心血管疾病、炎症及肿瘤等。近年来发现LPA及其受体与乳腺癌的发生发展有关,可能是一个新的肿瘤治疗靶点。本研究拟在不同乳腺组织中探讨LPAR4受体的表达情况,同时使用基因沉默技术下调MDA-MB-231细胞中的LPAR4受体的基因表达,探讨其对MDA-MB-231细胞侵袭与转移的影响。方法:采用western blot检测MDA-MB-231,MCF-7,MCF-10A细胞内LPAR4蛋白的表达,并收集乳腺癌患者标本以及癌旁组织做免疫组化染色检测LPAR4的表达差异性,并分析其表达与患者的临床病理特征之间的关系;在MDA-MB-231乳腺癌细胞中用RNAi-LPAR4慢病毒载体构建稳定低表达的细胞株,使用transwell小室探讨其对MDA-MB-231细胞侵袭与迁移的影响。结果:1.western blot结果显示LPAR4蛋白在乳腺癌组织中的表达要明显高于癌旁组织(P0.05)。2.免疫组化结果显示在乳腺癌组织内,LPAR4蛋白的表达相对较高,其阳性表达占所有癌组织的68.9%(31/45),LPAR4蛋白的阳性表达与患者的年龄、淋巴结转移是否以及肿瘤的位置无关,而与患者的TNM分期(x~2=5.641,P=0.024)和组织学分化程度相关(x~2=16.832,P=0.000)。3.慢病毒转染MDA-MB-231细胞株中的LPAR4基因表达后,分别使用添加基质胶和未添加基质胶的transwell小室观察下调后MDA-MB-231细胞的侵袭与迁移能力的变化。结果表明,下调组的细胞侵袭与迁移能力相对未下调组的细胞明显降低(P0.05),进一步使用Western Blot检测下调细胞内MMP2与MMP9蛋白的表达情况,亦发现了某种程度的减少,提示下调组内细胞侵袭与迁移能力的下降可能牵涉到MMP2与MMP9蛋白的表达降低。结论:1.LPAR4在乳腺癌组织中明显高表达,且其高表达预示着较晚期TNM分期以及较差的分化程度,而其在乳腺癌组织内的表达与患者年龄,淋巴结转移以及肿瘤的位置无关。2.LPAR4可能参与到乳腺癌细胞的侵袭与转移过程,下调后的MDA-MB-231细胞的迁移与侵袭能力降低,且该能力的降低可能涉及到MMP2与MMP9蛋白表达的调控。
【学位授予单位】：陕西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.9

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