PD-L1表达和TILs浸润对食管鳞癌患者预后价值的研究

发布时间：2020-08-23 13:11

【摘要】：目的:肿瘤免疫治疗是近年来肿瘤治疗领域的研究热点,尤其是免疫检查点抑制剂的成功开发与应用,更是将肿瘤免疫治疗带入了一个新时代。在众多免疫检查点中,目前对PD-1(Programmed Death-1 Receptor,程序性死亡受体1)/PD-L1(Programmed Death-Ligand 1,程序性死亡受体配体-1)通路的研究较为深入,很多靶向PD-1/PD-L1通路的单抗已获美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration,FDA)批准用于临床抗肿瘤治疗。目前,我国也在开展很多PD-1/PD-L1单抗的临床研究。本研究的目的在于探讨食管鳞癌组织中PD-L1的表达水平及肿瘤浸润淋巴细胞(TILs,Tumor-Infiltrating Lymphocytes)的浸润情况,分析两者的相关性,并评估PD-L1表达水平及TILs分布密度对食管鳞癌患者的预后价值,为抗PD-1/PD-L1单抗用于食管鳞癌的治疗提供数据支持。方法:选择2007年6月至2015年12月就诊我院的初治食管鳞癌患者纳入分析。采用免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)方法检测活检标本或手术切除标本中肿瘤细胞PD-L1的表达情况。使用H-score法对PD-L1表达水平进行量化评分,根据1%、5%和25%三个cut off值分别计算PD-L1阳性表达率。通过HE(Hematoxylin-Eosin staining,苏木精-伊红染色法)染色评估食管鳞癌肿瘤微环境中TILs的浸润情况,并对其定性评估。根据治疗模式的不同,分别分析PD-L1表达和TILs浸润与患者总生存期(Overall survival,OS)、无病生存期(Disease-free survival,DFS)/无进展生存期(Progression Free Survival,PFS)的相关性。并根据PD-L1表达水平和TILs浸润对食管鳞癌肿瘤微环境进行分型,分析各型患者预后差异。统计分析采用SPSS(vs.19.0)软件进行统计分析,Kaplan-Meier法绘制生存曲线并估计总体OS、DFS/PFS,Log-rank检验比较各组生存差异。以Cox比例风险模型进行多因素分析,评估风险比(Hazard Ratio,HR)和相关的95%CIs。p0.05为差异有统计学意义。结果:本研究共检测了428例食管鳞癌标本,包括手术标本131(30.6%)例,内镜标本297(69.4%)例。本研究结果主要包括三个部分,第一部分为428例标本的PD-L1表达情况及对患者预后的影响;第二部分为428例标本TILs浸润情况及对患者预后的影响;第三部分根据PD-L1表达和TILs浸润对肿瘤微环境进行分型,分析不同肿瘤微环境对患者预后的影响,探讨如何根据肿瘤微环境“定制”肿瘤免疫治疗。第一部分为PD-L1的表达情况。在428例肿瘤标本中,根据1%的cut off值,食管鳞癌肿瘤细胞PD-L1表达阳性率为79.7%;5%的cut off值阳性率为32.7%;25%的cut off值阳性率为9.1%。按照标本来源,根据1%的cut off值,131例手术标本中,PD-L1表达阳性率为77.9%(102/131)。297例内镜标本中,PD-L1阳性率为80.5%(239/297),差异无统计学意义(p=0.602)。PD-L1表达水平与患者临床特征的相关性分析结果显示PD-L1阳性表达与肿瘤侵袭性特征相关,包括肿瘤浸润更深(p=0.037),发生淋巴结转移(p=0.013)。根据患者治疗情况的不同,将患者分为根治性治疗组和姑息化疗组,分别分析了PD-L1表达对两组患者的预后价值。根据1%的cut off值,根治性治疗组PD-L1表达阴性患者DFS和OS均明显优于PD-L1表达阳性患者,两组中位DFS分别是37.5个月(95%CI:24.7,50.2)和13.7个月(95%CI:8.5,16.5),差异有统计学意义(p=0.001)。中位OS分别是44.5个月(95%CI:24.6,64.3)和24.2个月(95%CI:20.4,28.1),差异同样有统计学意义(p=0.039)。而对于姑息化疗组,无论根据哪个cut off值,均未发现PD-L1阳性组和PD-L1阴性组PFS和OS存在差异。第二部分为TILs的浸润密度。在428例食管鳞癌标本中,肿瘤组织中无淋巴细胞浸润(TILs=0)者27例(6.3%),少淋巴细胞浸润(TILs=1)131例(30.6%),中度或局部淋巴细胞浸润(TILs=2)198例(46.3%),高密度或弥漫性淋巴细胞浸润(TILs=3)72例(18.8%)。在131例手术标本中,TILs=0分4例(3.1%),TILs=1分38例(29.0%),TILs=2分64例(48.9%),TILs=3分25例(19.1%);297例胃镜标本中,TILs=0分23例(7.7%),TILs=1分93例(31.3%),TILs=2分134例(45.1%),TILs=3分47例(15.8%)。差异无统计学意义(p=0.243)。TILs=0分组、TILs=1分组、TILs=2分组、TILs=3分组中位DFS分别是13.1个月(95%CI:8.72,17.48),13.8个月(95%CI:4.52,23.08),15.8个月(95%CI:8.3,23.3),18.9个月(95%CI:1.2,36.5),总体差异无统计学意义(p=0.433)。四组中位OS分别是22.3个月(95%CI:18.5,26.1),24.2个月(95%CI:12.8,35.7),25.7个月(95%CI:18.9,32.5),38.9个月(95%CI:16.4,61.3),总体差异也无统计学意义(p=0.408)。但对于接受根治术治疗的患者TILs=3分组OS明显优于TILs=0-2分组(p=0.039),在姑息化疗组,无论是总体比较还是组间比较OS均未发现显著性差异。第三部分根据肿瘤细胞PD-L1表达情况及TILs浸润密度将食管鳞癌肿瘤微环境分为4种类型。I型为PD-L1(+)TILs(+),共58例(13.6%);II型为PDL1(-)TILs(-),共73例(17.1%);III型为PD-L1(+)TILs(-),共283例(66.1%);IV型为PD-L1(-)TILs(+),共14例(3.3%)。四组中位OS分别是30.8个月(95%CI:13.7,48.6)、24.1个月(95%CI:17.2,31.0)、18.3个月(95%CI:16.2,20.4)、27.0个月(95%CI:13.3,40.6)。四组总体比较差异有统计学意义(p=0.009)。组间分析结果显示,I型、II型及IV型患者OS明显优于III型患者(p=0.040,p=0.034,p=0.005;),余组间比较未见明显差异。COX多因素回归分析结果显示影响接受根治性治疗的患者预后的独立因素主要包括肿瘤浸润深度(HR=1.782,95%CI:1.253,2.535;p=0.001)、淋巴结转移情况(HR=1.774,95%CI:1.242,2.533;p=0.002)、肿瘤TNM分期(HR=2.195,95%CI:1.477,3.261;p=0.001)、PD-L1表达情况(HR=1.376,95%CI:1.047,1.807;p=0.022)。影响姑息性化疗患者预后的独立因素主要包括年龄(HR=0.772,95%CI:0.585,1.020;p=0.019)、肿瘤TNM分期(HR=1.066,95%CI:0.782,1.453;p=0.002)、化疗方案(HR=1.764,95%CI:1.091,2.854;p=0.021)、化疗周期数(HR=1.877,95%CI:1.252,2.812;p=0.002)。结论:食管鳞癌肿瘤组织可检测到PD-L1的表达,且阳性率较高。PD-L1的表达水平与接受根治性治疗的患者预后呈显著负相关。肿瘤细胞PD-L1阳性表达与肿瘤侵袭性因素相关,比如更深的浸润深度、更多的淋巴结转移等。肿瘤微环境中TILs浸润密度与PD-L1表达正相关。TILs富集是接受根治术治疗的患者预后较好的因素之一。PD-L1+/TIL+及PD-L1+/TIL-的食管鳞癌患者是接受PD-1/PD-L1单抗治疗的潜在优势人群。
【学位授予单位】：军事科学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.1
【图文】：

食管鳞癌,表达水平,肿瘤,细胞

TNM 分期#0-Ⅱ 143(39.9) 33(46.5) 110(38.3)0.183Ⅲ 175(48.9) 34(47.9) 141(49.1)Ⅳ 40(11.2) 4(5.6) 36(12.5)*其他主要包括原位癌及高级别上皮内瘤变#根据 AJCC 第七版分期，以肿瘤上缘确定肿瘤位置@统计学方法是卡方检验A.PD-L1 B. ≥1% PD-L1+

食管鳞癌,肿瘤浸润淋巴细胞,意义

C. PD-L1+肿瘤浸润淋巴细胞 (x 400)图 2. PD-L1 在食管鳞癌标4.2.2 按照 5%的 cut off 值，姑息PD-L1（+）患者 21 例（26.9%）。PD-L是 6.0 个月（95%CI：1.8，10.2）和 3.9意义（p=0.613）。PD-L1（-）组 1、3 年总组 1 年总生存率分别是 56.3%，3 年生存月（95%CI：6.2，12.5）和 11.7 个月（意义（p=0.893）。见图 8。4.2.3 按照的 25%的 cut off 值，姑PD-L1（+）患者 5 例（6.4%）。PD-L1（6.0 个月（95%CI：2. 9，9.1）和 3.40 个统计学意义（p=0.205）。PD-L1（-）组

食管鳞癌,肿瘤浸润,生存曲线,肿瘤浸润淋巴细胞

C. Invasive front图 3. 食管鳞癌中不同的 PD-L1 表达模式。A、在肿瘤浸润免疫细胞存在的情况下 PD-L1 弥漫性表达（Diffuse）；B、在肿瘤浸润淋巴细胞存在的情况下 PD-L1 区域性表达（Regional）；C、PD-L1 主要表达在肿瘤浸润边缘（Invasivefront）。A. 根治性治疗组患者 DFS 生存曲线 B. 根治性治疗组患者 OS 生存曲线

【参考文献】