circEPSTI1在胃癌中的表达及功能分析

发布时间：2020-08-25 17:06

【摘要】：目的:探讨circEPSTI1在胃癌组织和细胞中的表达及功能,并分析其在胃癌中的临床意义。方法:采用qRT-PCR法检测circEPSTI1在胃癌组织与非癌胃粘膜组织以及不同胃癌细胞与正常胃上皮细胞中的表达,并分析circEPSTI1在胃癌组织的表达与胃癌患者不同病理参数之间的相关性;转染si-circEPSTI1敲低胃癌SGC-7901与MGC-803细胞中circEPSTI1的表达;分别采用MTT实验、细胞划痕实验、Transwell实验以及AnnexinV-FITC和PI染色法检测si-circEPSTI1对胃癌SGC-7901与MGC-803细胞生物学行为的影响。结果:qRT-PCR检测结果显示,circEPSTI1在胃癌组织中的表达明显高于非癌胃粘膜组织(P0.01);相关性分析显示,circEPSTI1与胃癌患者的组织学分级、TNM分期以及淋巴结转移密切相关;circEPSTI1在胃癌MGC-803、SGC-7901及AGS细胞中的表达均高于GES-1细胞(P0.01);MTT检测显示,si-circEPSTI1可抑制胃癌SGC-7901与MGC-803细胞增殖(P0.05);划痕实验结果显示,si-circEPSTI1可抑制胃癌SGC-7901与MGC-803细胞迁移(P0.05);Transwell侵袭实验结果显示,si-circEPSTI1可抑制胃癌SGC-7901与MGC-803细胞侵袭(P0.01);AnnexinV-FITC和PI染色法结果显示,si-circEPSTI1可诱导胃癌SGC-7901细胞与MGC-803发生凋亡(P0.01)。结论:1.circEPSTI1在胃癌组织中表达上调,其表达与胃癌分级、TNM分期以及淋巴结转移密切相关。2.si-circEPSTI1导入SGC-7901及MGC-803细胞引起细胞凋亡增加、增殖减少及迁移侵袭能力降低。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.2
【图文】：

图 4 划痕实验检测 si-circEPSTI1 对胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞迁移能力的影响。A：转染 si-circEPSTI1 后 SGC-7901 与 MGC-803 细胞 0h、48 h 伤口宽度的显微设摄像照片（×200）；B：转染 si-circEPSTI1 后 SGC-7901 与 MGC-803细胞伤口愈合宽度的统计分析，与对照组比较，* P<0.05。3.6 Si-circEPSTI1 对胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞侵袭的影响将 si-circEPSTI1 转入胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞中作为观察组，转染si-scramble 用于阴性对照。Transwell 结果显示，转染 si-circEPSTI1 组 36 h 后胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞穿过基质胶的细胞数量明显低于各自对照组，（P<0.01，表 4，图 5）。表明 si-circEPSTI1 对胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞侵袭能力有明显抑制作用。表 4 si-circEPSTI1 对胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞侵袭的影响si-scramble si-circEPSTI1

图5 Transwell侵袭实验检测si-circEPSTI1对SGC-7901与MGC-803细胞侵袭能力的影响。A：穿过基底膜的SGC-7901与MGC-803细胞显微照片（×200）；B：转染si-circEPSTI1后SGC-7901与MGC-803细胞穿出数量统计分析，与对照组比，**P<0.01。3.7 Si-circEPSTI1 对胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞凋亡的影响将 si-circEPSTI1 转入胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞中作为观察组，转染si-scramble 用于阴性对照。凋亡实验结果显示，转染 si-circEPSTI1 后引起SGC-7901 与 MGC-803 细胞发生凋亡的细胞率明显高于各自对照组，（P<0.01，表 5，图 6）。表明 si-circEPSTI1 能诱导胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞发生凋亡。表 5 si-circEPSTI1 对胃癌 SGC-7901 与 MGC-803 细胞凋亡的影响si-scramble si-circEPSTI1

15图6 凋亡实验检测si-circEPSTI1对SGC-7901与MGC-803细胞凋亡的影响。A：转染si-circEPSTI1后SGC-7901与MGC-803细胞的凋亡分析图；B：转染si-circEPSTI1后SGC-7901与MGC-803细胞的凋亡率统计分析，与对照组比较，** P<0.01。

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本文编号：2803960