Linc00324在乳腺癌中的表达及其过表达对MDA-MB-231细胞影响的体外研究

发布时间：2020-10-29 15:22

　　 目的:本文旨在分析linc00324在乳腺癌组织中的表达水平及其与临床病理指标之间的相关性,并研究linc00324对乳腺癌细胞生物学行为的影响,以期为乳腺癌的诊断治疗提供实验依据。方法:一、借助TCGA数据库和GEO数据库分析linc00324在960例乳腺癌患者组织中的表达水平,用统计学方法分析linc00324与多种临床参数的关系并评估其诊断预后价值。二、收集39例乳腺癌患者组织及相应癌旁组织,用qRT-PCR检测linc00324在乳腺癌组织中的表达水平,并分析其与患者临床病理指标的相关性;分别用qRT-PCR和免疫组化分析CTC1和WT1在乳腺癌组织中的表达,及其与临床病理指标的关系,并进一步分析linc00324的表达与CTC1和WT1的相关性。三、构建linc00324慢病毒重组体和过表达linc00324乳腺癌细胞株;用CCK8实验、Transwell实验、划痕实验、FACS分析linc00324对乳腺癌细胞株生物学行为的影响;qRT-PCR分析过表达linc00324对wnt信号通路中β-catenin表达的影响。结果:一、利用数据库分析linc00324在960例乳腺癌中的表达及意义:(1)Linc00324在乳腺癌组织中的表达水平显著性降低(p0.0001)尤其在孕激素受体(PR)阴性患者、雌激素受体(ER)阴性患者或人表皮生长因子2(Her-2)阴性患者中明显低表达。(2)Linc00324的表达水平与乳腺癌组织学分级和T分期有关:linc00324的表达水平随着患者乳腺癌组织学分级的提高明显降低;linc00324的表达水平随着患者乳腺癌T分期的升高明显降低。(3)Linc00324的表达水平与CTC1的表达呈显著性正相关(r=0.533,p0.0001)。(4)ROC曲线结果显示linc00324的线下面积AUC=0.722(Se=0.667,Sq=0.60)(p0.000);Ki-67的线下面积AUC=0.811(Se=0.816,Sq=0.70)(p0.0001);两者联合的ROC曲线线下面积AUC=0.928(Se=0.98,Sq=0.88)(p0.0001),表明两者有良好的临床诊断价值。二、Linc00324在39例乳腺癌患者组织的表达及临床意义:(1)Linc00324在乳腺癌组织中明显低表达(p=0.000),并随着乳腺癌组织学分级的升高明显下调(p0.05)。(2)WT1在乳腺癌组织中的表达明显升高;尤其在ER阴性患者中明显上调,且其表达水平与linc00324呈显著性负相关(r=-0.326,p=0.003);(3)CTC1在乳腺癌组织中的表达明显降低。三、Linc00324对乳腺癌细胞株MDA-MB-231的影响:(1)Linc00324在乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的表达明显低于正常乳腺细胞株MCF-10A;(2)CCK8结果表明过表达linc00324明显抑制MDA-MB-231细胞的增殖能力。(3)Transwell、划痕实验实验结果表明linc00324过表达明显减弱细胞的侵袭、迁移能力。(4)FACS实验结果显示,过表达linc00324明显诱导细胞凋亡。(5)Linc00324过表达对wnt信号通路中β-catenin的表达无影响。结论:Linc00324在乳腺癌组织中的表达水平明显降低,且与组织学分级显著相关。过表达linc00324明显抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力,并诱导细胞凋亡。研究结果提示linc00324通过某种机制调控在乳腺癌的发生发展,可为乳腺癌分子诊断和靶向治疗提供新思路和新方法,并可能是判断预后的潜在指标。
【学位单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R737.9
【部分图文】：

StageⅠⅡⅢT 分期T1T2T3T4N 分期N0N1N2N3M 分期M0M1Mx183621249586351384040436412077800221630.16±0.080.15±0.090.01±0.070.87±0.190.55±0.130.46±0.150.09±0.090.07±0.120.07±0.140.04±0.120.03±0.110.16±0.080.07±0.210.05±0.220.00.00.10.0

图 1-3 Linc00324 在 T 分期中的表达差异Figure 1-3 Difference expression of Linc00324 in stage staging4 在不同乳腺癌亚型中的表达情况要存在 5 种亚型：HER2 富集型、管腔 A 型（Lum、基底样（basal-like）和 Normal-like 亚型。其腺组织高度相似。本研究通过数据库分析发现al 和 HER2 三种乳腺癌亚型中的表达水平明显低于4，P=1.3046e-39）。LumA 亚型与 Normal-like 型中显著性差异。

图 1-3 Linc00324 在 T 分期中的表达差异Figure 1-3 Difference expression of Linc00324 in stage staging324 在不同乳腺癌亚型中的表达情况主要存在 5 种亚型：HER2 富集型、管腔 A 型（LumA）、基底样（basal-like）和 Normal-like 亚型。其中乳腺组织高度相似。本研究通过数据库分析发现 lsal 和 HER2 三种乳腺癌亚型中的表达水平明显低于 -4，P=1.3046e-39）。LumA 亚型与 Normal-like 型中显著性差异。
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本文编号：2861091