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阿司匹林诱导自噬抑制胃癌细胞生长的研究

发布时间:2020-10-30 04:58
   目的:探讨阿司匹林诱导自噬对胃癌细胞生长的抑制作用,并初步分析其可能的作用机制。方法:(1)用不同浓度的阿司匹林处理人胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823,MTT法检测胃癌细胞活性;(2)流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡和细胞周期变化;(3)Hoechst33258染色法检测细胞核形态学变化;(4)Transwell迁移实验检测细胞迁移;(5)激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内自噬体的形成;(6)Western blot检测LC3-Ⅱ蛋白表达。结果:(1)MTT法结果表明阿司匹林对人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901具有明显的抑制作用,且随着阿司匹林药物浓度(1mM、2mM、4mM、6mM、8mM、10mM)的增加细胞存活率下降,呈明显的剂量效应关系(IC_(50)约为6mM,P0.01);(2)流式细胞术结果表明阿司匹林在48h内不能诱导胃癌细胞凋亡增加,但能够诱导胃癌细胞周期阻滞在G1期(P0.05);(3)Hoechst33258染色法检测细胞核形态学变化结果显示胃癌细胞细胞核内的DNA未被酶裂解片段化,未见凋亡小体,未见碎块状的浓密亮蓝色,与流式细胞仪检测细胞凋亡的结果一致;(4)Transwell迁移实验结果显示:SGC-7901空白组201.67±6.51、5mM组96.67±6.43,BGC-823空白组96.00±4.58、5mM组45.67±7.09。阿司匹林能够显著抑制两株胃癌细胞的迁移能力(P0.001);(5)激光共聚焦扫描显微镜和Western blot检测发现阿司匹林处理后胃癌细胞内自噬体增加,自噬蛋白LC3-Ⅱ表达增加,激活细胞自噬。结论:(1)阿司匹林能够显著抑制人胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823的增殖,呈明显剂量效应关系;(2)阿司匹林可以使人胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823的细胞周期停滞在G1期,其作用机制可能与激活细胞自噬有关。
【学位单位】:海南医学院
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2018
【中图分类】:R735.2
【部分图文】:

细胞存活率,阿司匹林,胃癌细胞,量效关系


Table 1.1:Aspirin on gastric cancer cell growth inhibition(x±s,n =5)SGC-7901 BGC-823度 D(λ) 570 nm 细胞存活率 D(λ) 570 nm 细胞存活率MSO 0.92±0.021 100% 1.09±0.051 100%mM 0.91±0.016 99% 0.89±0.011*** 82%mM 0.68±0.007*** 74% 0.61±0.009*** 56%mM 0.60±0.017*** 66% 0.64±0.012** 58%mM 0.48±0.011*** 52% 0.56±0.011*** 52%mM 0.30±0.008*** 32% 0.30±0.006*** 27%0mM 0.08±.0002*** 8% 0.08±0.003*** 8%注:与 CK 组比较,*P<0. 05;**P<0.01;***P<0.001Note: Compared with CK group, *P<0.05; **P<0.01; ***P<0.001

胃癌细胞,流式细胞仪检测,凋亡,阿司匹林


海南医学院硕士学位论文示阿司匹林诱导胃癌细胞凋亡作用不明显(图 1.2)。然而经过 PI 单细胞仪分析细胞周期变化结果显示:SGC-7901 CK 组(G1 期 52.87±12.99±2.45、G2 期 22.90±0.86);2mM 组(G1 期 57.99±0.31、S 期 27.04期14.84±1.82);5mM组(G1期63.82±1.75、S期23.62±1.78、G2期12.00±C-823 CK 组(G1 期 50.61±1.83、S 期 11.42±1.48、G2 期 37.61±1.43)G1 期 60.05±2.09、S 期 18.86±1.73、G2 期 20.60±3.58);5mM 组(1±3.29、S 期 16.78±1.07、G2 期 19.54±3.76)。从以上结果可以得出,经阿司匹林处理后,在 48h 内并不能诱导胃癌细胞凋亡,但能够显著癌细胞周期阻滞在 G1 期(P<0. 05)(图 1.3)

对比分析,阿司匹林,胃癌细胞,迁移能力


图 1.4:Hoechst33258 染色细胞核形态对比分析Figure 1.4: Hoechst33258 stained nuclei morphology contrast a胃癌细胞的迁移情况在装有胃癌细胞悬液的 Transwell 小室中分别用阿司匹林 5mM 和 P理 24h 后,显微镜下拍照计数,结果显示:SGC-7901 CK 组 201.6 组 96.67±6.43,BGC-823 CK 组 96.00±4.58、5mM 组 45.67±7.09。细胞经阿司匹林处理后,细胞的迁移能力较对照组明显下降(图
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本文编号:2862021

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