多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶ppGalNAc-T13在肺癌及肝癌中的功能研究

发布时间：2020-11-07 12:14

　　 O-GalNAc糖基化是一种重要的蛋白质翻译后修饰,参与调控多种细胞生命活动。该修饰由多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-Ts)家族成员催化起始。人体内该酶家族共有20个成员,其中ppGalNAc-T13在正常生理状态下特异性地表达于神经系统及肺组织中。在病理条件下,该酶的异常表达已被报道参与神经母细胞瘤及肺癌的发生发展,然而其背后的具体功能机制及其在其它恶性肿瘤中的作用仍然未知。因此,本论文着重探索了ppGalNAc-T13在肺癌及肝癌中的功能。本论文的第一部分主要探究了ppGalNAc-T13参与调控肺癌发展过程中的功能机制。首先,我们通过检测细胞活力,发现ppGalNAc-T13的表达不影响肺癌细胞H460及H1299的增殖能力,但与其平板克隆形成能力密切相关。其次,由于肿瘤细胞的平板克隆形成能力是细胞干性的相关指标之一,我们进一步通过体外细胞成球实验及耐药性检测实验,发现在肺癌干细胞成球的过程中,ppGalNAc-T13的高表达能够帮助肺癌细胞维持其自我更新能力及抵御抗癌药物吉非替尼的作用。最后,通过检测与细胞干性及耐药相关的一些信号通路,发现ppGalNAc-T13的表达能够影响表皮生长因子受体、肝细胞生长因子等信号通路,为部分解释ppGalNAc-T13在肺癌中的功能机制提供了合理的线索。此外,通过对22株不同类型肿瘤细胞系中ppGalNAc-T13表达水平的检测,我们发现ppGalNAc-T13在部分肝癌细胞系中存在高表达。因此,本论文第二部分初步探究了ppGalNAc-T13在肝癌中的功能。在肝癌细胞系模型中,我们发现ppGalNAc-T13的高表达能够促进肝癌细胞MHCC-97L的增殖及迁移,同时激活表皮生长因子受体及细胞外调节蛋白激酶信号通路,为后续进一步研究ppGalNAc-T13在肝癌中的功能机制提供了前期基础。综上所述,本文通过肺癌细胞系肿瘤细胞行为学分析,发现ppGalNAc-T13在肺癌细胞成球能力中具有重要功能,并且其表达能够提高细胞对于吉非替尼的耐受性,其分子作用机制可能是通过表皮生长因子及肝细胞生长因子信号通路的激活实现。同时,本文发现ppGalNAc-T13在肝癌细胞中差异表达,并初步探究了其影响的细胞表型以及相关分子机制。ppGalNAc-T13在肺癌及肝癌中的功能研究为深入理解其在肿瘤中的作用地位提供了新的见解。
【学位单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R734.2;R735.7
【部分图文】：

图 2-1 ppGalNAc-T13 在不同肿瘤细胞中的表达水平Fig.2-1 The expression of ppGalNAc-T13 in various cancer celR 检测 ppGalNAc-T13 在不同肿瘤细胞中的转录水平迹检测 ppGalNAc-T13 不同肿瘤细胞中的蛋白表达水平免疫印迹条带定量系中 ppGalNAc-T13 的蛋白表达水平13 表达水平与非小细胞肺癌病人生存率的相关性c-T13 沉默表达及过表达肺癌细胞系的构建结果暗示我们，ppGalNAc-T13 可能通过其 O-GalNA发挥一定的功能，并影响其进程。但具体功能及机制目先基于 ppGalNAc-T13 在不同肺癌细胞系中的表达水22

图 2-2 ppGalNAc-T13 沉默表达的 H460 细胞构建及验证Fig.2-2 The construction and validation of ppGalNAc-T13 in H460 cell li-T13 沉默表达的 H460 细胞 ppGalNAc-T13 的转录水平-T13 沉默表达的 H460 细胞 ppGalNAc-T13 的蛋白表达水平c-T13 沉默表达的 H460 细胞全蛋白的 O-GalNAc 糖基化水平c-T13 沉默表达的 H460 细胞表面膜蛋白的 O-GalNAc 糖基化水平a)c)b)d)

图 2-3 ppGalNAc-T13 沉默表达的 A549 细胞构建及验证Fig.2-3 The construction and validation of ppGalNAc-T13 in A549 cec-T13 沉默表达的 A549 细胞 ppGalNAc-T13 的转录水平c-T13 沉默表达的 A549 细胞 ppGalNAc-T13 的蛋白表达水平Ac-T13 沉默表达的 A549 细胞全蛋白的 O-GalNAc 糖基化水平Ac-T13 沉默表达的 A549 细胞表面膜蛋白的 O-GalNAc 糖基化水平c-T13 沉默表达的 A549 细胞形态（红色箭头表示变圆皱缩的细胞）25
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 王红丽;陈玲;徐春艳;张翠萍;;加速康复外科肝癌病人围术期护理方案的构建及应用效果[J];护理研究;2019年23期

2 何凤英;谢翡娜;袁蕊;;肝癌病人吸烟原因调查与分析[J];全科护理;2017年02期

3 曹贤花;;肝癌病人的心理护理探讨[J];世界最新医学信息文摘;2017年34期

4 刘维;付菊芳;胡雪慧;王丹;温佳;王安辉;王悦;刘俊;周新民;;晚期肝癌病人心理状况及其影响因素的研究[J];护理研究;2016年10期

5 吕静;杨海清;陈似霞;吴波峰;李小娟;黄婉晶;刘石玉;;肝癌病人主要家庭照顾者的负荷现状及其影响因素研究[J];护理研究;2015年14期

6 朱学志;;肝癌患者如何控制饮食？[J];保健文汇;2019年04期

7 刘东斌;;老年肝癌预防与诊疗[J];中国老年;2018年05期

8 张宝华;;肝癌防治莫入误区[J];健康生活;2017年01期

9 吴梦帆;;探讨肝癌病人tace术后舒适度改变原因与护理[J];现代养生;2017年16期

10 韩倩;蔡晴;李玲;程云;韩蓓明;;晚期肝癌病人压疮高危因素分析及护理干预[J];全科护理;2014年28期

相关博士学位论文 前10条

1 张明;免疫检查点蛋白VISTA在肝细胞癌中的表达及对肿瘤微环境和肝癌患者预后的影响[D];南方医科大学;2018年

2 王杰钦;用于肝癌个体化治疗的三维药敏试验方法研究[D];南方医科大学;2018年

3 凌妍;血小板在肝癌微环境的积聚促进肝癌进展的机制研究[D];中国人民解放军海军军医大学;2018年

4 徐海旭;肝癌肿瘤相关成纤维细胞促进肝癌转移的机制[D];天津医科大学;2018年

5 王运武;CFIm25通过JNK/c-Jun和P38信号通路对肝癌增殖及侵袭转移影响的研究[D];华中科技大学;2018年

6 陈丹蕾;TET2通过miR-22-3p的调控抑制肝癌细胞的干性和转移[D];安徽医科大学;2019年

7 郭真理;长链非编码RNA SNHG16通过miR-4458调控MLXIP促进肝癌增殖及索拉非尼耐药的机制研究[D];安徽医科大学;2019年

8 石亮;miR-340靶向Nrf2-ARE信号逆转肝癌细胞顺铂耐药的分子机制研究[D];武汉大学;2015年

9 余淼;miRNA-345在肝细胞性肝癌中的功能及作用机制的研究[D];郑州大学;2017年

10 侯国军;多组学整合在肝癌恶性进展研究中的应用与相关分子机制探讨[D];第二军医大学;2017年

相关硕士学位论文 前10条

1 胡雪芳;基于1H-NMR技术的肝癌尿液样品代谢组学研究[D];上海交通大学;2018年

2 田利英;AFP阴性HBV相关性肝癌一例及文献回顾[D];河北医科大学;2019年

3 张越美;闽南肝癌流行病学调查及HBV相关肝癌DNA甲基化研究[D];华侨大学;2019年

4 李微;PKM2依赖性组蛋白H3的磷酸化促进EGF介导的DKK1的转录和肝癌转移的分子机制研究[D];河南大学;2019年

5 崔雅璐;多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶ppGalNAc-T13在肺癌及肝癌中的功能研究[D];上海交通大学;2018年

6 刘天龙;IL-34在肝癌组织中的差异表达及其临床意义[D];中国医科大学;2019年

7 鲁新星;CT引导下放射性~(125)I粒子植入治疗肝癌的剂量与局部控制情况分析[D];承德医学院;2019年

8 谢斐;miR-320a通过靶向c-Myc抑制肝癌细胞增殖及侵袭的分子机制研究[D];云南大学;2017年

9 吕杰;PSMD14促进肝癌发生发展的机制研究[D];厦门大学;2018年

10 冯敏;SOX13复合体通过上调TWIST1促进肝癌侵袭转移[D];厦门大学;2018年

本文编号：2873930