产丁酸菌通过重塑肠道菌群抑制Wnt通路防治高脂饮食诱导的肠腺瘤恶变

发布时间：2020-12-03 04:50

　　目的结直肠癌（colorectal cancer,CRC）的发生受机体遗传因素和环境因素的双重影响,大部分肠癌患者存在抑癌基因Apc基因的突变,进而导致Wnt通路异常活化。肠道菌群可通过多种途径影响肠癌的进展,临床研究表明肠癌患者产丁酸菌丰度以及短链脂肪酸（Short chain fatty acid,SCFA）水平均比健康人群明显降低。其中,粪便丁酸水平的降低不仅可作为肠癌风险的预测指标,而且可以反映肠癌进展程度以及严重度。丁酸具有组蛋白去乙酰化酶抑制作用,可稳定肿瘤相关miRNA簇,维持靶基因转录后表达水平。饮食因素对维持肠道菌群稳态至关重要,研究表明摄入高脂饮食人群结肠乳杆菌目丰度降低,梭菌亚群XIVa丰度增加。本研究旨在探索产丁酸菌是如何调节肠道菌群失调,进而抑制高脂饮食诱导的肠癌发生的现象及机制。方法动物实验方法:30只可自发形成肠道腺瘤的4周龄Apc^min/+小鼠分别给予产丁酸菌活菌+高脂饮食、PBS+高脂饮食及PBS+普通饮食不同处理。实验第12周时分别收集每只小鼠的新鲜粪便,收集粪便后处死小鼠,分离肝脾、小肠及结肠。将远段小肠和结肠部分行石蜡包埋,... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

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【学位级别】：硕士

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动物实验流程图经鉴定的4周龄雌性Apcmin/+小鼠随机分为3组：组1给予高脂饮食+0.2×109CFU/0.2ml，每周3次；组2高脂饮食+0.2mlPBS每周3次；组3普通饮食+0.2

医科大学硕士学位论文 对象和补 ddH2O 至总体系 20 μlPCR 产物鉴定：采用 2%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 扩增产物，操作同）-（11）。）PCR 产物回收：采用 AxyPrepDNA 凝胶回收试剂盒（AXYGEN 公司回收 PCR 产物，采用 Thermo NanoDrop 2000 紫外微量分光光度计和凝胶电泳对回收的 PCR 产物进行文库质检。 PCR 产物定量、均一化及测序）采用 Qubit 进行文库荧光定量，根据各样品的测序要求进行相应比例之均一化。）采用 Illumina HiSeq PE250 平台测序，得到 2×250bp Paired-End 数据andaseq 软件根据重叠关系对 Paired End Reads 进行拼接，得到高变ds。对长 Reads 进行 16S 分析，测序原理见图 1.2。

士学位论文 结果抑制 Apcmin/+小鼠肠腺瘤生长及恶变的鉴定结果（乙基亚硝基脲）处理后的雄性 C57BL/6J 小鼠与雌出可自发形成肠道腺瘤的子代小鼠。该种子代小鼠第 850 号密码子发生突变，编码亮氨酸的密码子 T因此被称为 Apcmin/+小鼠。本项研究采用的小鼠经 bp 两种条带，基因型为 Apcmin/+，为 Apcmin/+小鼠（种条带，则说明小鼠无 Apc 基因突变，基因型为 A


本文编号：2896021