MicroRNA-552以DACH1为目标靶点通过Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠肿瘤细胞的增殖和迁移

发布时间：2020-12-04 02:24

　　目的 旨在探索microRNA-552（miR-552）对结直肠肿瘤细胞增殖和迁移的影响,探索miR-552下游靶基因以及二者之间的靶向调控关系,从而阐明miR-552对结直肠肿瘤生物学功能影响的具体分子调控机制。方法1.RT-qPCR方法检测miR-552在结直肠肿瘤组织及细胞系中的表达。2.构建并验证miR-552抑制性载体miR-552-inhibitor（miR-552-in）转染效率。3.MTT和平板克隆形成实验检测miR-552对肿瘤细胞增殖能力的影响。4.Transwell和划痕实验检测miR-552对肿瘤细胞迁移能力的影响。5.靶基因预测及筛选,荧光素酶报告实验验证miR-552的下游靶基因。6.RT-qPCR和Western blotting检测miR-552靶基因DACH1的mRNA和蛋白表达。7.Western blotting检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。结果1.MiR-552在结直肠肿瘤组织及细胞系中的表达情况:我们检测了20对结直肠癌组织和邻近的正常组织,结果表明:miR-552在癌组织中的表达明显高于正常组织。同时,与正常结直肠细胞... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

结直肠癌组织及癌旁组织总RNA电泳图

肠肿瘤组织和邻近正常组织中检测了miR-552的表达情况。结果表明：与正常组织相比，miR-552在结直肠癌组织中的表达明显升高，差异具有统计学意义（P<0.001）（图1-2-1）。同时，在肿瘤细胞系中也检测了miR-552的表达，与正常结直肠细胞系NCM460相比，miR-552在肿瘤细胞系Lovo、SW620、HCT116中明显高表达（图1-2-2），与组织中的表达结果相一致。图 1-2-1：miR-552在结直肠肿瘤组织中的表达（***P<0.001）图 1-2-2：miR-552在结直肠肿瘤细胞系中的表达

（P<0.001）（图1-2-1）。同时，在肿瘤细胞系中也检测了miR-552的表达，与正常结直肠细胞系NCM460相比，miR-552在肿瘤细胞系Lovo、SW620、HCT116中明显高表达（图1-2-2），与组织中的表达结果相一致。图 1-2-1：miR-552在结直肠肿瘤组织中的表达（***P<0.001）图 1-2-2：miR-552在结直肠肿瘤细胞系中的表达


本文编号：2896868