CAFs经Notch信号通路诱导肝癌细胞“干性”的机制研究
发布时间：2020-12-19 09:25
目的:肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是全球第五大癌症且严重威胁我国人民的生命健康,肝癌的异质性及一小撮“干细胞”的存在导致其容易术后复发转移率。新近研究表明肿瘤微环境（tumor microenvironment,TME）可能参与肿瘤干细胞（cancer stem cell）的诱导与维持。肿瘤微环境重要组分肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts,CAFs）能诱导肿瘤细胞的“干性”,而Notch信号通路常介导肿瘤微环境与肿瘤细胞间的相互作用,我们的前期研究表明Notch信号通路能够维持CD90+肝癌干细胞的“干性”并且CAFs能够激活肝癌细胞的Notch信号通路。在肝癌中CAFs是否参与其“干性”的诱导和维持?Notch信号通路在CAFs诱导肝癌细胞“干性”中的作用如何?其确切的分子机制如何?本研究旨在深入阐明CAFs激活Notch信号通路诱导肝癌细胞“干性”的关键分子位点,可从肿瘤微环境与肿瘤干细胞这一角度为肝癌的转移复发提供新的靶向治疗策略并完善肝癌的复发转移机制。方法:我们首先从新鲜肝癌标本中提取并鉴定C...
【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：107 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
CAFs相关蛋白的检测：（A）CAFs与NFs下显微镜下的形态；(B)westernblot显示：与NF相比，CAFs高表达α-SMA、FAP及Vimentin等相关蛋白；(C)免疫荧光显示：与NF相比，CAFs高表达α-SMA及Vimentin等相关蛋白
华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文我更新及克隆形成能力是肿瘤干细胞的生物学特性之一，为了检测 C自我更新及克隆形成能力的影响，我们建立了肝癌细胞与 CAFs 的共培别将 HLE 或 MHCC-97H 细胞与 CAFs 共培养，将共培养后的97H 细胞种入六孔细胞培养板中，以没有经过共培养的 HLE 或 MHC照组。制作 CAFs 条件培养基（CAFs-CM），将 CAFs-CM 加入到特中检测 HLE 和 MHCC-97H 细胞共培养前后成球能力的变化。结果显C-97H 细胞经过共培养后能形成更多更大的细胞球（图 2A），CAFs MHCC-97H 细胞在六孔细胞培养板中的克隆形成能力（图 2 B）。增强肿瘤肝癌细胞的自我更新及克隆形成能力
华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文.3 CAFs 可增强肝癌细胞的侵袭转移能力与普通肿瘤细胞相比，肿瘤干细胞具有更强的侵袭转移能力，为了检测 CAF癌细胞侵袭转移能力的影响，我们建立了肝癌细胞与 CAFs 的共培养体系。我们将 HLE 或 MHCC-97H 细胞与 CAFs 共培养，将共培养后的 HLE 或 MHCC-97H种入 8μm 孔径的 Transwell 小室的上层，检测同一时间点中共培养后的 HLEHCC-97H 细胞与没有经过共培养的 HLE 和 MHCC-97H 细胞迁移或侵袭到小室下细胞数目。结果显示：CAFs 能明显增强 HLE 和 MHCC-97H 细胞的侵袭及转移（图 3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Genetic association of interleukin-6 polymorphism （-174 G/C） with chronic liver diseases and hepatocellular carcinoma[J]. Lydia Giannitrapani,Maurizio Soresi,Daniele Balasus,Anna Licata,Giuseppe Montalto. World Journal of Gastroenterology. 2013(16)
本文编号：2925662
【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：107 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
CAFs相关蛋白的检测：（A）CAFs与NFs下显微镜下的形态；(B)westernblot显示：与NF相比，CAFs高表达α-SMA、FAP及Vimentin等相关蛋白；(C)免疫荧光显示：与NF相比，CAFs高表达α-SMA及Vimentin等相关蛋白
华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文我更新及克隆形成能力是肿瘤干细胞的生物学特性之一，为了检测 C自我更新及克隆形成能力的影响，我们建立了肝癌细胞与 CAFs 的共培别将 HLE 或 MHCC-97H 细胞与 CAFs 共培养，将共培养后的97H 细胞种入六孔细胞培养板中，以没有经过共培养的 HLE 或 MHC照组。制作 CAFs 条件培养基（CAFs-CM），将 CAFs-CM 加入到特中检测 HLE 和 MHCC-97H 细胞共培养前后成球能力的变化。结果显C-97H 细胞经过共培养后能形成更多更大的细胞球（图 2A），CAFs MHCC-97H 细胞在六孔细胞培养板中的克隆形成能力（图 2 B）。增强肿瘤肝癌细胞的自我更新及克隆形成能力
华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文.3 CAFs 可增强肝癌细胞的侵袭转移能力与普通肿瘤细胞相比，肿瘤干细胞具有更强的侵袭转移能力，为了检测 CAF癌细胞侵袭转移能力的影响，我们建立了肝癌细胞与 CAFs 的共培养体系。我们将 HLE 或 MHCC-97H 细胞与 CAFs 共培养，将共培养后的 HLE 或 MHCC-97H种入 8μm 孔径的 Transwell 小室的上层，检测同一时间点中共培养后的 HLEHCC-97H 细胞与没有经过共培养的 HLE 和 MHCC-97H 细胞迁移或侵袭到小室下细胞数目。结果显示：CAFs 能明显增强 HLE 和 MHCC-97H 细胞的侵袭及转移（图 3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Genetic association of interleukin-6 polymorphism （-174 G/C） with chronic liver diseases and hepatocellular carcinoma[J]. Lydia Giannitrapani,Maurizio Soresi,Daniele Balasus,Anna Licata,Giuseppe Montalto. World Journal of Gastroenterology. 2013(16)
本文编号：2925662
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