mTORC2/mTORC1抑制剂诱导骨髓增生异常综合征/白血病细胞发生自噬性死亡及作用机制研究
发布时间:2020-12-28 13:35
第一部分mTORC2/mTORCl抑制剂诱导MDS/AML细胞发生自噬性死亡目的:探索mTORC1/mTORC2抑制剂对骨髓增生异常综合征转化急性髓系白血病(MDS/AML)细胞增殖的影响,并从凋亡和自噬两方面进一步探讨抑制细胞增殖的作用机制。方法:本研究以人骨髓增生异常综合征(MDS)转化的急性髓系白血病细胞株SKM-1细胞株为研究对象,采用CCK-8法检测不同浓度的雷帕霉素和mTORC2/mTORC1抑制剂OSI-027分别作用于SKM-1细胞后检测其细胞活性,流式细胞术检测对细胞周期的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测凋亡细胞比例,进一步利用Western-blot法检测PARP蛋白的活性分析来验证细胞是否发生凋亡;利用透射电镜观察细胞内自噬泡及自噬小体;吖啶橙染色法流式检测酸性自噬泡数量;利用自噬抑制剂氯喹联合OSI-027处理细胞后用Annexin V-FITC/PI流式检测细胞凋亡比例和CCK-8法检测增殖活性;RT-PCR法检测自噬相关基因Beclin-1和LC3B的mRNA表达量;Western-blot法检测Beclin-1和LC3的蛋白...
【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:86 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
英文缩略词简表
中文摘要
Abstract
前言
参考文献
第一部分 mTORC2/mTORC1抑制剂诱导MDS/AML细胞发生自噬性死亡
实验材料和方法
实验结果
讨论
参考文献
第二部分 mTORC2/mTORC1抑制剂诱导MDS/AML细胞发生自噬性死亡的机制研究
实验材料和方法
实验结果
讨论
参考文献
综述
参考文献
致谢
附录
【参考文献】:
期刊论文
[1]自噬相关基因Beclin1在骨髓增生异常综合征中的表达及其意义[J]. 万绍媛,张日,王元元,岑建农,周洁,杨翼,江凤,陈子兴. 中国实验血液学杂志. 2013(04)
本文编号:2943843
【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:86 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
英文缩略词简表
中文摘要
Abstract
前言
参考文献
第一部分 mTORC2/mTORC1抑制剂诱导MDS/AML细胞发生自噬性死亡
实验材料和方法
实验结果
讨论
参考文献
第二部分 mTORC2/mTORC1抑制剂诱导MDS/AML细胞发生自噬性死亡的机制研究
实验材料和方法
实验结果
讨论
参考文献
综述
参考文献
致谢
附录
【参考文献】:
期刊论文
[1]自噬相关基因Beclin1在骨髓增生异常综合征中的表达及其意义[J]. 万绍媛,张日,王元元,岑建农,周洁,杨翼,江凤,陈子兴. 中国实验血液学杂志. 2013(04)
本文编号:2943843
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