1.miR-17/20a调控TGF-β通路抑制食管癌浸润转移的机制研究 2.miR-92b调控ITGAV抑制食管癌浸润转

发布时间：2021-01-13 02:00

　　作为非编码小RNA分子,microRNA能够通过对靶基因的直接影响从而调控肿瘤进程,其在肿瘤浸润转移中的功能和作用越来越受到人们的关注。本实验室前期通过chemotaxis模型筛选,得到了运动能力存在显著差异的4种食管癌细胞亚型,即30-U/D和180-U/D。对它们进行nicroRNA芯片分析后,我们发现miR-17和miR-20a在运动能力较弱的“U”细胞亚群中高表达,提示二者可能与食管癌的运动相关。miR-17/20a属于miR-17-92癌基因簇,许多研究报道了二者在多种类型肿瘤进展中的作用,但在食管癌中却鲜有报道。本研究旨在探究miR-17/20a在食管癌中的功能及调控机制。首先,我们利用RT-qPCR实验进行了microRNA芯片结果验证。与30-D和180-D相比,miR-17/20a在30-U和180-U中的表达较高。通过后续的体外功能实验,我们发现miR-17/20a能够显著抑制食管癌细胞的运动和浸润能力,对细胞增殖和细胞凋亡的作用则比较微弱。通过数据库预测,我们得到了多个miR-17/20a的潜在下游靶基因。Luciferase reporter, Western ... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：137 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－３．采用反向ＰＣＲ法突变恃定ＤＮＡ序巧Ｉ的原理图

在３０－Ｄ细胞中共转ｍｉＲ－１７／２０ａ－５ｐ?ｍｉｍｉｃ和各候选基因的??３’ＵＴ民野生型作用序列后，ＲＡＢ２２Ａ、ＩＴＧＢ８、ＴＧＦＢＲ２、ＰＴＨＬＨ?和?ＺＦＹＶＥ９??实验纽相比于对照组的山ｃｉｆｅｒａｓｅ酶活性均呈现出有效的下降趋势（图１－７）。??在有效的实验组中，ＴＧＦＢＲ２和ＺＦＹＶＥ９?（亦称作ＳＡＲＡ，?Ｓｍａｄ?Ａｎ浊ｏｒ?ｆｏｒ??民ｅｃｅｐｔｏｒ?Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，么后Ｗ?ＳＡＲＡ替代）实验组的下降效果较显著，且均??参与到ＴＧＦ－Ｐ通路之中。已有研究表明ＴＧＦＢ民２可憐酸化ＴＧＦＢＲ１从而起??始ＴＧＦ－Ｐ通路，在多种肿瘤中受到许多ｍｉｃｒｏ民ＮＡ的调控，其中就包括ｍｉＲ－??１７和ｍｉＲ－２０ａ，但在食管癌中并未见相关研究；有关ＳＡＲＡ分子的研究目前??还较少，发现其可发挥支架蛋白的作用使得Ｓｍａｄ２＾能够被ＴＧＦＢＲ１憐酸??化，从而激活Ｔ畑－Ｐ下游通路。研究表明，ＴＧＦ－Ｐ通路可Ｗ影响上皮间质转??换化ＭＴ）?Ｗ及肿瘤的侵袭转移能力

２－２．实验中所使用质险ｐＳｍ图谱。我们设计了若干条ＩＴＧＡＶｓｈＲＮＡ序列，然后将其构??到ｐＳ出载体上。??ｍ－?ｍｍｃｎｔｏｒｅｒｍｏ?ｅｒ。??


本文编号：2973983