FNDC3B circular RNA通过调控CD44的表达促进胃癌细胞迁移和侵袭
发布时间：2021-01-14 08:30
目的:环状RNA（circRNA）是一类由5’和3’末端共价连接形成的环状RNA分子,研究表明其在人类癌症中起着重要的调控作用,但circRNA在胃癌中的相关研究仍鲜少报道。本研究发现FND3B环状RNA（circFNDC3B）表达水平在胃癌组织中下降,提示circFNDC3B在胃癌发生发展过程中可能发挥着重要的作用。因此,本文以两种具有不同的circFNDC3B表达水平的胃癌细胞为主要的研究对象来探索circFNDC3B在胃癌发生发展过程中的作用与分子机制。方法:首先,利用qRT-PCR验证circFNDC3B在胃癌临床样本和胃癌细胞系中的表达水平;其次,采用无缝克隆技术构建circFNDC3B过表达载体和siRNA技术分别对MGC-803细胞和BGC-823细胞进行circFNDC3B表达水平的介入干扰,再通过一系列western blot、划痕实验、transwell实验和qRT-PCR等实验对circFNDC3B在胃癌细胞中的表型和功能作用进行探究;最后,采用RNA结合蛋白免疫沉淀分析（RIP）和RNApull-down实验分析证实circFNDC3B与IGF2BP3、CD44...
【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．?ｃｉｒｃＲＮＡｓ生物合成模型
双链ＲＮＡ通过解锁茎环结构以拮抗ｃｉｒｃＲＮＡｓ的生物发生［１８］。随着探索ｃｉｒｃＲＮＡｓ??生物合成的持续进展，张等人提出了类似于可变剪接的可变环化模型以系统性地??解释ｃｉｒｃＲＮＡｓ的生成机制［７］（如图２所示）。在ＲＮＡ配对过程中，重复或非重??复的侧翼内含子互补序列的竞争会影响剪接选择和外显子环化，且横跨于侧翼内??含子的互补序列可明显促进外显子的环化。反向互补序列可以导致多个ｃｉｒｃＲＮＡｓ??来源于同一个基因的转录本。由于互补序列在不同物种间的分布不同，可变环化??可导致物种之间的特异性环化。互补序列的存在可促进转录本通过可变环化形成??ｃｉｒｃＲＮＡｓ，但互补序列对于外显子环化来说是必要但不充分条件［７］，这个模型暗??示可变环化的复杂性和ｃｉｒｃＲＮＡｓ的多样性，且一定程度上可能受其他因素的影??响，如ＲＢＰｓ正向或负向调控ｃｉｒｃＲＮＡｓ的形成［５］。??２??
利用ｑＲＴ－ＰＣＲ检测５种胃癌细胞系（ＧＥＳ－ｌ，ＡＧＳ，ＳＧＣ－７９０１，??ＭＧＣ－８０３，?ＢＧＣ－８２３）中?ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ?表达水平的差异，发现?ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ?的表??达水平在不同细胞系中呈现出不同的表达水平，结果如图３．２所示。ＳＧＣ－７９０１??细胞和ＭＧＣ－８０３细胞中ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ的表达水平明显低于ＧＥＳ－１细胞（正常胃??粘膜细胞系），分别为ｐ＜〇．〇〇〇ｌ和Ｐ＝〇．〇〇３２，但ＢＧＣ－８２３细胞的表达水平却明??显高于ＧＥＳ－１细胞（ｐ＝０．０００７）。此外，本文还分析了每个细胞系中的ＦＮＤＣ３Ｂ??ｍＲＮＡ的表达水平，结果显示在ＭＧＣ－８０３细胞中ＦＮＤＣ３Ｂ?ｍＲＮＡ明显增加??３２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Circular RNA hsacirc0000745 may serve as a diagnostic marker for gastric cancer[J]. Mei Huang,Yi-Ren He,Li-Chuan Liang,Qiang Huang,Zhi-Qiang Zhu. World Journal of Gastroenterology. 2017(34)
[2]Minute signet ring cell carcinoma occurring in gastric hyperplastic polyp[J]. Shoji Hirasaki,Seiyuu Suzuki,Hiromitsu Kanzaki,Kohei Fujita,Shuji Matsumura,Eiji Matsumoto. World Journal of Gastroenterology. 2007(43)
[3]Frequent loss of heterozygosity at 8p22 chromosomal region in diffuse type of gastric cancer[J]. Hedayat Allah Hosseini,Ali Ahani,Hamid Galehdari,Ali Mohammad Froughmand,Masoud Hosseini,Abdolrahim Masjedizadeh,Mohammad Reza Zali. World Journal of Gastroenterology. 2007(24)
本文编号：2976572
【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．?ｃｉｒｃＲＮＡｓ生物合成模型
双链ＲＮＡ通过解锁茎环结构以拮抗ｃｉｒｃＲＮＡｓ的生物发生［１８］。随着探索ｃｉｒｃＲＮＡｓ??生物合成的持续进展，张等人提出了类似于可变剪接的可变环化模型以系统性地??解释ｃｉｒｃＲＮＡｓ的生成机制［７］（如图２所示）。在ＲＮＡ配对过程中，重复或非重??复的侧翼内含子互补序列的竞争会影响剪接选择和外显子环化，且横跨于侧翼内??含子的互补序列可明显促进外显子的环化。反向互补序列可以导致多个ｃｉｒｃＲＮＡｓ??来源于同一个基因的转录本。由于互补序列在不同物种间的分布不同，可变环化??可导致物种之间的特异性环化。互补序列的存在可促进转录本通过可变环化形成??ｃｉｒｃＲＮＡｓ，但互补序列对于外显子环化来说是必要但不充分条件［７］，这个模型暗??示可变环化的复杂性和ｃｉｒｃＲＮＡｓ的多样性，且一定程度上可能受其他因素的影??响，如ＲＢＰｓ正向或负向调控ｃｉｒｃＲＮＡｓ的形成［５］。??２??
利用ｑＲＴ－ＰＣＲ检测５种胃癌细胞系（ＧＥＳ－ｌ，ＡＧＳ，ＳＧＣ－７９０１，??ＭＧＣ－８０３，?ＢＧＣ－８２３）中?ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ?表达水平的差异，发现?ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ?的表??达水平在不同细胞系中呈现出不同的表达水平，结果如图３．２所示。ＳＧＣ－７９０１??细胞和ＭＧＣ－８０３细胞中ｃｉｒｃＦＮＤＣ３Ｂ的表达水平明显低于ＧＥＳ－１细胞（正常胃??粘膜细胞系），分别为ｐ＜〇．〇〇〇ｌ和Ｐ＝〇．〇〇３２，但ＢＧＣ－８２３细胞的表达水平却明??显高于ＧＥＳ－１细胞（ｐ＝０．０００７）。此外，本文还分析了每个细胞系中的ＦＮＤＣ３Ｂ??ｍＲＮＡ的表达水平，结果显示在ＭＧＣ－８０３细胞中ＦＮＤＣ３Ｂ?ｍＲＮＡ明显增加??３２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Circular RNA hsacirc0000745 may serve as a diagnostic marker for gastric cancer[J]. Mei Huang,Yi-Ren He,Li-Chuan Liang,Qiang Huang,Zhi-Qiang Zhu. World Journal of Gastroenterology. 2017(34)
[2]Minute signet ring cell carcinoma occurring in gastric hyperplastic polyp[J]. Shoji Hirasaki,Seiyuu Suzuki,Hiromitsu Kanzaki,Kohei Fujita,Shuji Matsumura,Eiji Matsumoto. World Journal of Gastroenterology. 2007(43)
[3]Frequent loss of heterozygosity at 8p22 chromosomal region in diffuse type of gastric cancer[J]. Hedayat Allah Hosseini,Ali Ahani,Hamid Galehdari,Ali Mohammad Froughmand,Masoud Hosseini,Abdolrahim Masjedizadeh,Mohammad Reza Zali. World Journal of Gastroenterology. 2007(24)
本文编号：2976572
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