小鼠VEGF/FGF-2疫苗构建与肿瘤干预及埃博拉病毒样颗粒构建

发布时间：2021-01-17 04:06

　　[背景]肿瘤的发展过程可分为无血管的缓慢生长阶段和有血管的快速生长阶段,在无血管阶段肿瘤细胞主要依靠邻近的血管系统获得氧和营养物质,并运走代谢产物,此时肿瘤的体积很少超过1—2mm3。随着肿瘤的生长邻近血管系统的供给已不能满足肿瘤细胞的生长需求,肿瘤细胞通过合成分泌促血管生长因子参与肿瘤血管的生成,以形成新的微血管网络满足肿瘤细胞的生长需要。因此,抗肿瘤血管生成为抑制肿瘤生长的重要策略。血管内皮生长因子（vascular endothelia growth factor,VEGF）作为最主要的血管生成因子,能促进血管的形成,提高血管的通透性,刺激肿瘤基质形成和肿瘤细胞进入新生血管,从而促进肿瘤的生长与转移。目前,VEGF单克隆抗体在临床抗肿瘤血管生成治疗中已获得应用。成纤维细胞生长因子-2（fibroblast growth factor-2,FGF-2）同样具有显著的促肿瘤血管生成活性,是临床靶向VEGF治疗耐药性产生的重要原因。近年发现,肿瘤血管异常,在肿瘤免疫抑制微环境形成与发展中发挥了关键作用。[目的]构建VEGF和FGF-2基因重组疫苗,探讨疫苗主动免疫策略诱导持续存在的特异... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１重组表达质粒构建示意图??

３．１酶切鉴定重组质粒??重组质粒ｐＨＢｃＡｇ－ＶＥＧＦ和ｐＱ?Ｐ?－ＶＥＧＦ进行酶切鉴定。利用Ｍｅｌ和￡ｃｏＲＩ??双酶切质粒；？ＨＢｃＡｇ－ＶＥＧＦ，产生的片段为３１５ｂｐ，如图２ａ所示；利用Ｍｉｅｌ和Ｘｐｎｌ??双酶切质粒ｐＱ?Ｐ?－ＶＥＧＦ，产生Ｑ?３?－ＶＥＧＦ片段为４７７ｂｐ，如图２ｂ所示。同样，利??用ＴＶｄｅｌ和尺ｐｎｌ双酶切质粒ｐＨＢｃＡｇ－ＦＧＦ－２，产生ＨＢｃＡｇ－ＦＧＦ－２片段为９０９ｂｐ，??如图３ａ所示；利用ＴＶｄｅｌ和Ａ：ｐｎｌ双酶切质粒；？Ｑ?３?－ＦＧＦ－２，产生Ｑ?Ｐ?－ＦＧＦ－２片段??为８２２ｂｐ，如图３ｂ所示。酶切后琼脂糖凝胶结果显示，目的条带与酶切片段预期??大小一致。将所检测质粒送样进行测序鉴定，结果显示插入片段是正确的。??ｂｐ?ｂｐ??ｄ一?ｌｏｏｏｏ???５００——刚〇???一?３〇〇—ｏ（）０??■?■二??ｉｏｏ——■?：?■?丨?！；??５〇－ＢＨＩ?■■??ａ?ｂ??图２重组质

双酶切质粒ｐＱ?Ｐ?－ＶＥＧＦ，产生Ｑ?３?－ＶＥＧＦ片段为４７７ｂｐ，如图２ｂ所示。同样，利??用ＴＶｄｅｌ和尺ｐｎｌ双酶切质粒ｐＨＢｃＡｇ－ＦＧＦ－２，产生ＨＢｃＡｇ－ＦＧＦ－２片段为９０９ｂｐ，??如图３ａ所示；利用ＴＶｄｅｌ和Ａ：ｐｎｌ双酶切质粒；？Ｑ?３?－ＦＧＦ－２，产生Ｑ?Ｐ?－ＦＧＦ－２片段??为８２２ｂｐ，如图３ｂ所示。酶切后琼脂糖凝胶结果显示，目的条带与酶切片段预期??大小一致。将所检测质粒送样进行测序鉴定，结果显示插入片段是正确的。??ｂｐ?ｂｐ??ｄ一?ｌｏｏｏｏ???５００——刚〇???一?３〇〇—ｏ（）０??■?■二??ｉｏｏ——■?：?■?丨?！；??５〇－ＢＨＩ?■■??ａ?ｂ??图２重组质粒ｐＨＢｃＡｇ－ＶＥＧＦ和ｐＱ?Ｐ?－ＶＥＧＦ的酶切鉴定??ａ）


本文编号：2982172