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胃癌肝转移中循环肿瘤细胞上皮间质转化的研究

发布时间:2021-01-17 06:17
  [目的]胃癌是危害人类健康的主要恶性肿瘤之一,胃癌转移是导致肿瘤患者死亡的最主要原因。从不同的方面深入认识胃癌转移的分子机制将有助于对胃癌的转移做出早期诊断并指导临床,对提高患者的生存率、改善预后具有重要的意义。本研究旨在探讨胃癌肝转移过程中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)发生上皮间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)和上皮间质转化(Mesenchymal-Epithelial Transition,MET)与肝转移的关系,为胃癌转移提供新的理论依据,为胃癌转移的靶向治疗提供实验依据。[方法]培养MKN28细胞并使用终浓度1Ong/ml的TGFβ-1重组蛋白培养48h处理MKN28细胞。取Balb/c裸小鼠共12只,用TGFβ-1诱导后的MKN28细胞进行静脉注射接种肿瘤细胞,成功建立胃癌肝转移小鼠模型。取癌种转移的肝组织进行相关检测。肝组织制作病理切片,HE染色观察病理结构;取外周血液获得CTCs,采用密度梯度离心法分离CTCs,免疫荧光染色确认分离得到CTCs。另将胃癌细胞MKN28、CTCs、... 

【文章来源】:昆明医科大学云南省

【文章页数】:61 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

胃癌肝转移中循环肿瘤细胞上皮间质转化的研究


图1肿瘤转移的过程(引自Science,?2011)??

免疫荧光,标志物


2?CTCs鉴定??CTCs判定方法:血液中的CTCs源于实体上皮瘤,可能表达上皮标志物??CK19;同时,CTCs为非血源性细胞,不表达血源性标志物CD45。如图3,免??疫荧光鉴定:荧光显微镜下CK19呈绿色荧光,CD45呈红色荧光,细胞核呈蓝??色荧光,鉴定结果显示细胞表达CK19,不表达CD45。由此可知密度离心法所??得细胞为CTCs。??—??图3?CTCs免疫荧光鉴定(X200,?X400)??18??

胃癌肝转移,中央静脉


正常小鼠G肝细胞排列成索状,肝窦由中央静脉向四周发射并与中??央静脉相通;而静脉注射接种肿瘤细胞小鼠A-F中央静脉壁增厚,大量炎性细胞??浸润,可见多核的肿瘤细胞;以此确认成功建立胃癌转移模型。??:■、:盡::猜?.??A?B??■cm?'t::,??:v’氣》f?户,?.??C?D??隹攀:.:::‘■_:允?.气w??,,.,、、.::入3:.?:'势\、??E

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本文编号:2982355

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