BHLHE41抑制MCF-7细胞侵袭的机制研究

发布时间：2021-01-27 19:24

　　目的:基本螺旋-环-螺旋家族成员e41（BHLHE41）是DEC亚家族（BHLHE40/DEC1和BHLHE41/DEC2）成员之一,在调节昼夜节律方面起到重要作用。这主要是通过BHLHE41在细胞核内与异二聚体CLOCK-BMAL1竞争结合启动子的E-Box元件。此外BHLHE41通过PI3K/Akt,Notch,ERK/NF-kappaB,BCR及hypoxia等信号通路调节非昼夜节律。已有研究表明BHLHE41参与调节多种癌症（如子宫内膜癌、胃癌等）的迁移和侵袭。而BHLHE41可以抑制肿瘤的侵袭和转移,但其大多具体机制尚不明确。此前已有实验证明BHLHE41通过促进三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞中HIF-1α的降解来抑制侵袭和转移。但BHLHE41是否以及通过何种机制抑制另一种乳腺癌MCF-7细胞（luminal A表型）的侵袭和转移。本研究旨在探究此种机制。研究方法:应用GEPIA在线平台分析乳腺癌组织及正常乳腺组织中BHLHE41的基因表达情况。并使用WB检测乳腺癌与癌旁正常乳腺组织配对标本中BHLHE41的蛋白表达情况。乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231经... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

TCGA来源数据分析显示,与正常乳腺组织相比,BHLHE41在乳腺癌组织中低表达

设计三种不同的BHLHE41siRNA用于实验。别在MCF-7(A)和MDA-MB-231(B)细胞系通过qRT-PCR证实了这些siRNA的有效性。效果最佳的si-BHLHE41#3用于以下实验,*p<0.001。

Transwell检测用于评估乳腺癌细胞迁移和侵袭。利用不覆盖或覆盖基质胶的transwell法检测后发现,沉默BHLHE41可以导致迁移或侵袭的肿瘤细胞数量显著增加。重复三遍Transwell实验,并对迁移或侵袭的肿瘤细胞计数并进行统计分析。每个数据代表三次独立实验的mean±SE,*p<0.01,**p<0.001。


本文编号：3003597