MYC调控剪接因子PQBP1和SF3B1在卵巢癌中的表达机制

发布时间：2021-02-08 18:34

　　MYC是一个转录因子,隶属于bHLH-LZ家族,其常与Max相互作用形成二聚体靶向特定DNA序列（CACGTG）调控众多基因转录,因其介导了超过30%的肿瘤发生而作为经典癌基因为人们所熟知。大部分肿瘤如卵巢癌、乳腺癌及结肠癌等都存在MYC的基因扩增和异常激活。人类基因组约15%的基因受MYC转录调控,例如E2F2、CDKN1A、CCND1等。MYC通过调控众多基因的转录,在促进血管形成、促进肿瘤发生,以及诱导肿瘤细胞恶性增殖和分化及等方面占据重要地位。最近研究表明,MYC能够调控肿瘤细胞代谢。虽然大量研究解析了 MYC在肿瘤中的生物学功能,也有众多靶基因陆续被发现。但是仍然存在很多机制没有阐明。2015年Nature文章报道MYC介导的肿瘤细胞依赖剪接体生存,MYC与剪接因子BUD31存在合成致死效应,靶向剪接体可有效杀死MYC介导的肿瘤,但是MYC依赖剪接体生存的机制在该文章中并没有阐明。本课题论证了 MYC能够通过转录调控致癌剪接因子的表达促进肿瘤细胞存活。剪接是指pre-mRNA内含子被剪掉,外显子被拼接的过程。其发生在细胞核中,由snRNP识别pre-mRNA剪接位点,经两次转... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１Ａ）；通过ＧＥＰＩＡ２网站对ＭＹＣ的预后进行分析，发现ＭＹＣ高表??达的高级别浆液性卵巢癌患者预后较差（图１Ｂ）

．?＿＿■＿???ｉｍ?—．??■■?ｓ?？？？■．■．＿．■■?＿＿＇．ｖ．＇．－＿ｔ．，?．，．－１．＇．．＇?１?■■■．＿■■？■＂??猶．＿?‘；，■？．：？?－＇＊：：■＊??ＭＶＣ＇?ｊ??■＊＝■４＊?ｍ??ＰＯＬＲ２Ａ?ｊ！??－：．全?＿＿？■？？，■＊？气《４?■—?，?Ｉ?？？？?■?Ａ?ｉ?１?．＿■＿＿＿?！蠱？?ｍ?－ｊｍｍＪＫｍＪｋｍｊｋ＿＊?＿■？?ｍ?ｍ？ｍ?？＿？??？＿？???图１：?ＭＹＣ在ＨＧＳＯＣ中拷贝数增加并与剪接因子关系密切??Ａ．?ＴＣＧＡ数据库分析卵巢癌患者中ＭＹＣ表达量的遗传变化。Ｂ．?ＭＹＣ转基因小鼠进??行ＧＯ分析对各项事件发生数量排序，其中选择性剪接事件改变占第三位。Ｃ．ＨＧＳＯＣ中??ＭＹＣ高表达与预后不良相关。Ｄ．ＣｈＩＰ－ｓｅｑ分析预测ＭＹＣ对ＰＱＢＰ１和ＳＨＢ１有潜在调控。??２．ＭＹＣ过表达和敲低细胞系的构建??为验证ＭＹＣ对剪接因子ＰＱＢＰ１和ＳＦ３Ｂ１是否存在调控作用，我们构建了??ＭＹＣ过表达和敲低细胞系。过表达病毒载体购买自吉凯公司，敲低病毒载体为??实验室构建。敲低细胞系的建立，从Ｓｉｇｍａ官网获取ｓｉ－ＭＹＣ序列，ＰＣＲ扩增后??克隆到ＰＬＫＯ／Ｔｅｔ－ｏｎ载体。慢病毒的包装使用经典慢病毒三质粒包装体系，包括??—个目的质粒ＰＬＫＯ－ｓｈ－ＭＹＣ和两个包装质粒ｐｓＰＡＸ－２和ＰＭＤ２Ｇ。使用ｌｉｐｏ２０００??转染２９３Ｔ细胞，然后４８?ｈ、７２?ｈ后收两次病毒液，０．４５?ｐＭ滤器过滤病毒液备??用。取１?ｍＬ病毒液感染Ａ２７８０、ＳＫＯＶ３、ＨＥＹ、ＨＯ８９１０等卵巢癌

图４：?ＭＹＣ转录调控ＰＱＢＰＫ?ＳＦ３Ｂ１??


本文编号：3024355