TET1通过调节kvl.2的表达参与奥沙利铂诱导的神经病理性疼痛
发布时间：2021-02-26 06:34
研究背景奥沙利铂（oxaliplatin,OXA）作为第三代铂类化疗药物,对结直肠癌、胰腺癌、肺癌等多种实体肿瘤均有疗效。但应用奥沙利铂的患者85%～95%会出现相关的周围神经病变,临床表现主要为末梢感觉麻木、痛觉过敏或超敏、“套袜样”感觉异常。冷刺激可加重其神经症状,并且具有明显的剂量依赖性和时间依赖性,往往因严重的神经性病变造成奥沙利铂治疗的中断,影响患者的治疗效果,甚至缩短生存时间。因此,探究奥沙利铂诱导的周围神经病变的分子机制,对减轻或避免奥沙利铂治疗所产生的神经毒性作用具有重要的指导意义。有研究表明,奥沙利铂对周围神经的损伤比对中枢的损伤更为明显,因此探索背根神经节离子通道改变及受损的分子机制,是揭示周围神经损伤后兴奋性改变的基础。电压门控钾离子通道是参与神经元兴奋性改变的重要离子通道之一,通过维持静息膜电位和控制动作电位放电参与神经元兴奋性的调节。在奥沙利铂诱导的周围神经损伤动物模型中,电压门控钾离子通道1.2（Kv1.2）的蛋白表达减少,引起神经元兴奋性增加,然而对靶向kv1.2分子调控机制仍知之甚少。表观遗传学指基于非基因序列改变所致的基因表达水平的变化,可调控基因的表...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：109 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词简表
前言
第一部分 建立奥沙利铂化疗痛模型并检测Kv1.2的表达变化
引言
1.1 实验动物与材料
1.1.1 实验动物
1.1.2 动物麻醉
1.1.3 实验分组
1.1.4 实验仪器设备与试剂耗材
1.2 实验方法
1.2.1 奥沙利铂诱导化疗痛模型的建立
1.2.2 行为学检测化疗痛模型的建立
1.2.3 Western-blot检测kv1.2的蛋白表达
1.2.4 RT-qPCR检测钾离子通道的mRNA表达
1.2.5 免疫荧光检测kv1.2在DRG神经元形态分布
1.3 数据分析
1.4 结果
1.4.1 奥沙利铂可以诱导大鼠产生痛行为学
1.4.2 奥沙利铂化疗痛模型中不同亚型钾离子通道mRNA表达水平变化
1.4.3 Kv1.2与DRG不同类型神经元共标
1.4.4 建模后不同时间点DRG神经元Kv1.2的阳性细胞
1.4.5 大鼠奥沙利铂诱导的化疗痛模型中Kv1.2的蛋白和mRNA表达降低
1.5 讨论
1.6 小结
第二部分 TET1的下调可能参与奥沙利铂诱导的化疗痛
引言
2.1 实验动物与材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 动物麻醉
2.1.3 实验分组
2.1.4 实验仪器与设备
2.2 实验方法
2.2.1 奥沙利铂诱导化疗痛模型的建立
2.2.2 行为学检测化疗痛模型的建立
2.2.3 DRG显微注射敲除TET1-loxp转基因小鼠DRG中TET1的基因
2.2.4 Western-blot检测TET1的蛋白表达
2.2.5 qRT-PCR检测TET1的mRNA表达
2.2.6 免疫荧光检测TET1在DRG神经元形态分布
2.3 数据分析
2.4 结果
2.4.1 TET1与DRG不同类型神经元共标
2.4.2 建模后不同时间点DRG神经元TET1的阳性细胞
2.4.3 大鼠奥沙利铂诱导的化疗痛模型中TET1蛋白和mRNA的表达变化
2.4.4 TET1-loxp转基因鼠的疼痛行为学和基因表达变化
2.5 讨论
2.6 小结
第三部分 TET1通过下调kv1.2缓解奥沙利铂诱导的神经病理性疼痛
引言
3.1 实验动物与材料
3.1.1 实验动物
3.1.2 动物麻醉
3.1.3 实验分组
3.1.4 实验仪器与设备
3.2 实验方法
3.2.1 奥沙利铂诱导的化疗痛模型的建立
3.2.2 行为学检测化疗痛模型的建立以及过表达TET1后对动物痛敏的影响
3.2.3 DRG显微注射TET1-Lv,过表达DRG神经元TET1基因
3.2.4 Western-blot检测kv1.2和TET1的蛋白表达
3.2.5 qRT-PCR检测kv1.2和TET1的mRNA表达
3.2.6 免疫荧光检测kv1.2和TET1在DRG神经元的共定位
3.3 数据分析
3.4 结果
3.4.1 Kv1.2与TET1免疫荧光双标
3.4.2 大鼠先给予TET1-Lv,再建立奥沙利铂化疗痛模型,对大鼠行为学以及分子水平的影响
3.4.3 大鼠先建立化疗痛模型,再给予TET1-Lv,可以缓解奥沙利铂诱导的行为学变化
3.4.4 小鼠给予TET1-Lv,对行为以及基因表达的影响
3.5 讨论
3.6 小结
全文总结
参考文献
综述 慢性神经病理性疼痛的表观遗传学机制
参考文献
个人简历
致谢
本文编号：3052199
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：109 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词简表
前言
第一部分 建立奥沙利铂化疗痛模型并检测Kv1.2的表达变化
引言
1.1 实验动物与材料
1.1.1 实验动物
1.1.2 动物麻醉
1.1.3 实验分组
1.1.4 实验仪器设备与试剂耗材
1.2 实验方法
1.2.1 奥沙利铂诱导化疗痛模型的建立
1.2.2 行为学检测化疗痛模型的建立
1.2.3 Western-blot检测kv1.2的蛋白表达
1.2.4 RT-qPCR检测钾离子通道的mRNA表达
1.2.5 免疫荧光检测kv1.2在DRG神经元形态分布
1.3 数据分析
1.4 结果
1.4.1 奥沙利铂可以诱导大鼠产生痛行为学
1.4.2 奥沙利铂化疗痛模型中不同亚型钾离子通道mRNA表达水平变化
1.4.3 Kv1.2与DRG不同类型神经元共标
1.4.4 建模后不同时间点DRG神经元Kv1.2的阳性细胞
1.4.5 大鼠奥沙利铂诱导的化疗痛模型中Kv1.2的蛋白和mRNA表达降低
1.5 讨论
1.6 小结
第二部分 TET1的下调可能参与奥沙利铂诱导的化疗痛
引言
2.1 实验动物与材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 动物麻醉
2.1.3 实验分组
2.1.4 实验仪器与设备
2.2 实验方法
2.2.1 奥沙利铂诱导化疗痛模型的建立
2.2.2 行为学检测化疗痛模型的建立
2.2.3 DRG显微注射敲除TET1-loxp转基因小鼠DRG中TET1的基因
2.2.4 Western-blot检测TET1的蛋白表达
2.2.5 qRT-PCR检测TET1的mRNA表达
2.2.6 免疫荧光检测TET1在DRG神经元形态分布
2.3 数据分析
2.4 结果
2.4.1 TET1与DRG不同类型神经元共标
2.4.2 建模后不同时间点DRG神经元TET1的阳性细胞
2.4.3 大鼠奥沙利铂诱导的化疗痛模型中TET1蛋白和mRNA的表达变化
2.4.4 TET1-loxp转基因鼠的疼痛行为学和基因表达变化
2.5 讨论
2.6 小结
第三部分 TET1通过下调kv1.2缓解奥沙利铂诱导的神经病理性疼痛
引言
3.1 实验动物与材料
3.1.1 实验动物
3.1.2 动物麻醉
3.1.3 实验分组
3.1.4 实验仪器与设备
3.2 实验方法
3.2.1 奥沙利铂诱导的化疗痛模型的建立
3.2.2 行为学检测化疗痛模型的建立以及过表达TET1后对动物痛敏的影响
3.2.3 DRG显微注射TET1-Lv,过表达DRG神经元TET1基因
3.2.4 Western-blot检测kv1.2和TET1的蛋白表达
3.2.5 qRT-PCR检测kv1.2和TET1的mRNA表达
3.2.6 免疫荧光检测kv1.2和TET1在DRG神经元的共定位
3.3 数据分析
3.4 结果
3.4.1 Kv1.2与TET1免疫荧光双标
3.4.2 大鼠先给予TET1-Lv,再建立奥沙利铂化疗痛模型,对大鼠行为学以及分子水平的影响
3.4.3 大鼠先建立化疗痛模型,再给予TET1-Lv,可以缓解奥沙利铂诱导的行为学变化
3.4.4 小鼠给予TET1-Lv,对行为以及基因表达的影响
3.5 讨论
3.6 小结
全文总结
参考文献
综述 慢性神经病理性疼痛的表观遗传学机制
参考文献
个人简历
致谢
本文编号：3052199
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