SMP30三个转录本对肝癌细胞生物学行为的影响及相关机制的研究

发布时间：2021-03-09 14:15

　　研究背景:衰老标记蛋白-30（SMP30）存在三种可变剪接体,分别为全长（长度为900bp）、外显子4缺失的转录本（长度为684bp）、外显子4、5缺失的转录本（长度为552bp）。900bp的转录本表达的蛋白为SMP30-a,684bp的转录本表达的蛋白为SMP30-b,552bp的转录本表达的蛋白为SMP30-c。SMP30-a在肝癌组织中低表达,对肝癌细胞的增殖和侵袭迁移具有抑制作用,关于SMP30-b和SMP30-c的研究较少。研究目的:本文通过构建SMP30不同转录本慢病毒表达载体,在肝癌细胞中进行过表达,进而研究SMP30不同蛋白亚型对肝癌细胞生物行为学的影响。研究方法:（1）构建SMP30三个转录本的真核表达载体,通过瞬时转染293T细胞,Western blot检测验证SMP30三个转录本在真核细胞内是否都能够表达。（2）构建SMP30三个转录本的慢病毒表达载体,用携带目的基因的慢病毒和空载慢病毒分别感染肝癌细胞SK-Hep-1,通过嘌呤霉素筛选后构建出稳定转染的SMP30转录本的过表达细胞株。（3）Quantitative Real-time PCR（qRT-PCR）... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

真核表达载体的PCR鉴定

图 1-2 真核表达载体双酶切鉴定lag，2：pEGFP-684-Flag，3：pEGFP-552-Flag，4：pEGFP-N1-Fig 1-2 Double enzyme digestion of Eukaryotic expression vector.lag，2：pEGFP-684-Flag，3：pEGFP-552-Flag，4：pEGFP-N1-

图 1-3 SMP30 三个转录本转染 293T 细胞后融合蛋白表达荧光图片Fig 1-3 Fluorescence images of 293T cell transfected with pEGFP-N1-Flag 、pEGFP-552-Flag，pEGFP-684-Flag and pEGFP-900-Flag.

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3072984