外泌体介导linc-ROR调控胰腺癌细胞-脂肪细胞对话促进胰腺癌侵袭转移的机制研究

发布时间：2021-03-14 03:38

　　目的:胰腺癌作为恶性程度较高的肿瘤类型,预后很差,生存质量堪忧。肥胖与胰腺癌关系密切,除引起全身慢性炎症反应等促癌作用外,肿瘤微环境中脂肪细胞与胰腺癌细胞对话发挥生物学功能引起动态变化,对胰腺癌侵袭和转移过程亦有重要的影响,但具体机制不明。方法:通过收集临床胰腺癌患者和健康人血清外泌体样本,利用qPCR分析外泌体linc-ROR的差异表达水平。首先使用透射电子显微镜观察超速离心法PBS洗涤后所提取的外泌体镜下微观形态,粒径浓度分析技术测算超速离心法提取的外泌体的直径和浓度范围,免疫印迹法检测外泌体表面蛋白标记物;RNase A和Triton X-100检测外泌体结构的稳定性。构建linc-ROR慢病毒质粒转染胰腺癌细胞作为后续共培养实验的稳转细胞系,将人胚胎胰腺组织来源细胞（正常胰腺细胞）所分泌的外泌体linc-ROR作为对照,在高表达外泌体linc-ROR的胰腺癌细胞PANC-1中下调linc-ROR表达水平,在低表达外泌体linc-ROR的胰腺癌细胞系BxPC-3中上调linc-ROR表达水平。采用Transwell培养小室分别将各组胰腺癌细胞与脂肪细胞3T3-L1共培养,通过荧光... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【图文】：

超速离心法提取外泌体的结构和稳定性

共培养体系下的脂肪细胞变化

共培养促进胰腺癌细胞增殖能力


本文编号：3081417