EGCG联合谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对伊马替尼耐药K562细胞增殖及凋亡的影响
发布时间：2021-03-19 19:44
目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）联合谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对伊马替尼耐药K562细胞（K562/G细胞）增殖及凋亡的影响,为耐药慢性粒细胞白血病患者的的治疗提供新思路。方法:以K562/G细胞为研究对象。1.CCK8法检测不同浓度CB-839及EGCG单独或联合应用对K562/G细胞增殖活性的影响,计算不同药物组的细胞增殖抑制率,并应用Chou-Talalay联合指数法研究CB-839与EGCG联合应用的效果,采用CalcuSyn软件计算两药合用指数（Combination Index,CI）,分析两药联合是否具有协同药效。选择协同作用最大的组合进行后续实验。2.采用流式法检测对照组、CB-839组、EGCG组及联合药物组细胞周期分布情况和细胞凋亡率变化。4.Western blot法检测对照组、CB-839组、EGCG组及联合药物组细胞Bcl-2、Bax及LC3B蛋白表达情况。结果:1.CCK8结果显示:不同浓度CB-839及EGCG均可一定程度上抑制K562/G细胞增殖（P<0.05）。CB-839组（1.25、2.5、5μmol/L）分别联合EGCG组（...
【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度的CB-839对K562/G细胞增殖抑制率的影响
11图2不同浓度的EGCG对K562/G细胞增殖抑制率的影响用不同浓度的CB-839组（1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L）分别与EGCG组（40μmol/L、80μmol/L、120μmol/L）联合作用K562/G细胞48小时，CCK8法检测细胞增殖情况，结果如表1所示：联合组细胞增殖抑制率较对照组及单药组明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。用CompuSyn软件分析结果显示所有药物联合组CI值均＜1，说明两药具有协同效应，其中，当CB839浓度为5μmol/L及EGCG浓度为80μmol/L时，CI值最小，协同作用最大，我们选择该药物组合进行后续实验。表1CB-839及EGCG单用或联用对K562/G细胞的抑制作用（均数±标准差，%）药物浓度(μmol/L)抑制率（%）CB-839EGCG0001.25018.22±1.21*2.5023.71±0.99*5034.79±0.94*04013.89±1.62*08025.03±1.98*012043.73±2.10*
13图3CB-839联合EGCG抑制K562/G细胞增殖的协同效应曲线3.2CB-839与EGCG单用或联合应用对K562/G细胞周期分布的影响细胞周期是是指一次细胞分裂结束开始到下一次分裂结束的过程，是机体细胞从母代向子代进行生命延续的连续过程，细胞周期紊乱将影响细胞正常生长繁殖。碘化丙啶（PropidiumIodide，PI）是一种可以与双链DNA结合产生荧光的染料，故我们可以通过碘化丙啶染色（PIstaining）法用流式分析仪检测细胞DNA含量，并根据DNA含量的分布情况进行细胞周期分析。结果显示：与对照组相比，EGCG组及联合药物组细胞G2期比例升高，G1期细胞比例降低，差异具有统计学意义，P＜0.05；而CB-839组与对照组相比，各细胞周期均无显著性差异，P＞0.05。联合药物组与CB-839及EGCG单药组相比G2期细胞比例升高，G1期细胞比例降低，差异具有统计学意义，P＜0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]恶性肿瘤有氧糖酵解关键酶研究进展[J]. 李影,刘红宁,邓晓霞,吴晓慧,林色奇. 江西中医药. 2019(01)
[2]表没食子儿茶素表没食子酸酯对药物代谢酶和转运体影响的研究进展[J]. 黄希希,万景,刘亚妮,师少军. 中国药师. 2019(01)
[3]谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对耐药小细胞肺癌细胞H69AR的杀伤作用研究[J]. 沈伟涛,魏婷. 中国临床药理学杂志. 2018(14)
[4]EGCG通过抑制谷氨酰胺代谢通路抑制结直肠癌细胞的生长的实验研究[J]. 李哲,钱佳乐,向敏,林芳. 药学与临床研究. 2018(03)
[5]儿茶素EGCG抗肿瘤及其作用机制研究进展[J]. 杜晓琳,黄煌,李倩,吴正奇,陈小强,糜志远. 食品工业科技. 2017(24)
[6]癌细胞代谢相关的耐药干预方法的研究进展[J]. 颜晨,余德才,江勇. 中国药理学与毒理学杂志. 2015(06)
[7]5-AZA-CdR联合EGCG对HL-60和K562的影响[J]. 黄云燕,夏焱,郭海霞,李文益. 南方医科大学学报. 2008(02)
[8]Bcl-2家族蛋白与细胞凋亡[J]. 付永锋,樊廷俊. 生物化学与生物物理学报. 2002(04)
硕士论文
[1]谷氨酰胺酶抑制剂-968对细胞周期的影响及其与厄洛替尼的联合用药[D]. 鲍绪杰.南昌大学 2014
本文编号：3090123
【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度的CB-839对K562/G细胞增殖抑制率的影响
11图2不同浓度的EGCG对K562/G细胞增殖抑制率的影响用不同浓度的CB-839组（1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L）分别与EGCG组（40μmol/L、80μmol/L、120μmol/L）联合作用K562/G细胞48小时，CCK8法检测细胞增殖情况，结果如表1所示：联合组细胞增殖抑制率较对照组及单药组明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。用CompuSyn软件分析结果显示所有药物联合组CI值均＜1，说明两药具有协同效应，其中，当CB839浓度为5μmol/L及EGCG浓度为80μmol/L时，CI值最小，协同作用最大，我们选择该药物组合进行后续实验。表1CB-839及EGCG单用或联用对K562/G细胞的抑制作用（均数±标准差，%）药物浓度(μmol/L)抑制率（%）CB-839EGCG0001.25018.22±1.21*2.5023.71±0.99*5034.79±0.94*04013.89±1.62*08025.03±1.98*012043.73±2.10*
13图3CB-839联合EGCG抑制K562/G细胞增殖的协同效应曲线3.2CB-839与EGCG单用或联合应用对K562/G细胞周期分布的影响细胞周期是是指一次细胞分裂结束开始到下一次分裂结束的过程，是机体细胞从母代向子代进行生命延续的连续过程，细胞周期紊乱将影响细胞正常生长繁殖。碘化丙啶（PropidiumIodide，PI）是一种可以与双链DNA结合产生荧光的染料，故我们可以通过碘化丙啶染色（PIstaining）法用流式分析仪检测细胞DNA含量，并根据DNA含量的分布情况进行细胞周期分析。结果显示：与对照组相比，EGCG组及联合药物组细胞G2期比例升高，G1期细胞比例降低，差异具有统计学意义，P＜0.05；而CB-839组与对照组相比，各细胞周期均无显著性差异，P＞0.05。联合药物组与CB-839及EGCG单药组相比G2期细胞比例升高，G1期细胞比例降低，差异具有统计学意义，P＜0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]恶性肿瘤有氧糖酵解关键酶研究进展[J]. 李影,刘红宁,邓晓霞,吴晓慧,林色奇. 江西中医药. 2019(01)
[2]表没食子儿茶素表没食子酸酯对药物代谢酶和转运体影响的研究进展[J]. 黄希希,万景,刘亚妮,师少军. 中国药师. 2019(01)
[3]谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对耐药小细胞肺癌细胞H69AR的杀伤作用研究[J]. 沈伟涛,魏婷. 中国临床药理学杂志. 2018(14)
[4]EGCG通过抑制谷氨酰胺代谢通路抑制结直肠癌细胞的生长的实验研究[J]. 李哲,钱佳乐,向敏,林芳. 药学与临床研究. 2018(03)
[5]儿茶素EGCG抗肿瘤及其作用机制研究进展[J]. 杜晓琳,黄煌,李倩,吴正奇,陈小强,糜志远. 食品工业科技. 2017(24)
[6]癌细胞代谢相关的耐药干预方法的研究进展[J]. 颜晨,余德才,江勇. 中国药理学与毒理学杂志. 2015(06)
[7]5-AZA-CdR联合EGCG对HL-60和K562的影响[J]. 黄云燕,夏焱,郭海霞,李文益. 南方医科大学学报. 2008(02)
[8]Bcl-2家族蛋白与细胞凋亡[J]. 付永锋,樊廷俊. 生物化学与生物物理学报. 2002(04)
硕士论文
[1]谷氨酰胺酶抑制剂-968对细胞周期的影响及其与厄洛替尼的联合用药[D]. 鲍绪杰.南昌大学 2014
本文编号：3090123
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