热休克蛋白70在Bcr/Ab1细胞中抑制凋亡诱导因子的促凋亡作用
发布时间：2021-03-21 19:38
bcr/abl融合基因是慢性粒细胞白血病（Chronic myloid leukemia, CML）的分子标志,该基因表达具有组成型激活的酪氨酸激酶活性的Bcr/Abl融合蛋白,能够异常活化PI3K-AKT、Ras和STAT5等一系列信号通路,使血细胞恶性增殖和凋亡受阻。除此以外,Bcr/Abl融合蛋白表达的细胞中还能检测到热休克蛋白70（Hsp-70）表达水平增高,Hsp-70作为细胞应激时的保护蛋白,近年来在肿瘤的发生发展过程中受到广泛关注。Hsp-70可抑制Bax的线粒体定位,从而抑制线粒体通路的细胞凋亡；也可在线粒体下游抑制Apaf-1对caspase-9的募集作用,从而阻断caspase凋亡通路的活化。此外,Hsp-70还能抑制非caspase凋亡通路。凋亡诱导因子（Apoptosis-inducing factor,AIF）是非caspase凋亡途径的重要分子,生理条件下,AIF表达后依赖其N端1-120的线粒体定位信号（MLS）定位于线粒体,辅助呼吸链的电子传递。凋亡发生时,AIF易位至细胞核中,诱发基因组DNA断裂,促进细胞凋亡。在MEF细胞中,外源性过表达Hsp-70...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：101 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．５?Ｖｐ－１６诱导后，ｗｅｓ化ｍ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测ＡＩＦ入核
?ＡＩＦ主要在核蛋白（ＮＥ）中被检出，说明Ｖｐ－１６能够成功诱导ＡＩＦ入核，而相反，??Ｂｃｒ／Ａｂｌ阳性细胞中ＡＩＦ主要定位与胞浆中（图１．５，附图１?）。??３２Ｄ?３２ＤＰ２Ｉ０?Ｂａ／巧?ＩＷＦ３ＰＵ＂??、Ｐ－１６?．：?＋?－?＋?Ｖｐ－１６?￣?￣??—ＡＩＦ?，?一?ＡＩＦ??ＭＭ?病‘确＂２ＡＸ?玄?ｉＵ＊?ｍｔ?Ｈ２，、Ｘ??护站脚??Ｉａｍｍ％?一ａ?ａ０ｍｍｍ．?ｍｍｔｍ?＊?…??‘Ａｌｌ?Ａ?…??一?？？－?Ｔ—＾?？一?￣＾?？?一?＂ｉ—??＜■?—Ｉ?＂■麵ｗＮＩ?？?．?ｉＭＣｌ??Ｐ－？‘、＂…?誦?Ｐ－Ａｃ化１??：＇巧１；：＂．巧?’．Ｉ＇?＇?哗；贼巧灼运》＾９１??图１．５?Ｖｐ－１６诱导后，ｗｅｓ化ｍ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测ＡＩＦ入核。??Ｎ巨：细胞核蛋白，ＣＥ：细胞浆蛋白??Ｆｉｇｕｒ＊ｅ?１．５?ＡＩＦ?ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ?ｗａｓ?ａｓｓａｙｅｄ?ｂｙ?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ?ｉｎ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｃｅｌｌｓ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ??Ｖｐ－１６．ＮＥ，?ｎｕｃｌｅｕｓ?ｅｘｔｒａｃｔｓ，?ＣＥ，?ｃｙｔｏｐｌａｓｍ?ｅｘｔｒａｃｔｓ??同时我们对团Ｌ－６０和Ｋ５６２细胞进行了相同的处理，结果与两株转化细胞相同，??在Ｂｃｒ／Ａｂｌ阴性的ＨＬ６０细胞中Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ和ＩＦＴ结果显示ＡＩＦ定位与细胞??核中
（Ａｄ－ＨＡ－ｄＭＬＳ－ＡＩＦ），利用腺病毒感染并表达与Ｋ５６２细胞中，观测其亚细胞??定位Ｗ及诱导细胞调亡的能力。结果显示，与其野生对照（Ａｄ－ＨＡ－ＦＬＡＩＦ）比较，??ｄＭＬＳ－ＡＩＦ定位无差异，两者均定位与细胞浆中（图１．７，附图３）。同时调亡检测??也显示，ｄＭＬＳ－ＡＩＦ未能明显诱导Ｋ５６２细胞调亡（图１．８，附图４）。??ＨＡ－ＡＩＦ??１Ｉ２ＡＸ??—Ｒ４－ＡＩＦ??Ｗ??Ｕ?￣；???＾?（Ｖ－Ａｃｔｉｎ??分＼?＞??图１．７?ｗｅｓ巧ｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ法检测ｄＭＬＳ－ＡＩＦ亚细胞定位，ＮＥ：细胞核蛋白，ＣＥ：细胞浆蛋白??Ｆｉｇｕｒｅ?１．７?ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ?ｄｉｓｔＨｂｕｔｉｏｎ?ｏｆ?ｄ?ＭＬＳ－ＡＩＦ?ｗａｓ?ｄｅ化Ｃ化ｄ?ｂｙ?ｗｅｓ化ｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ．?ＮＥ，?ｎｕｃｌｅｕｓ??ｅ乂ｔｒａｃｔｓ，Ｃ巨，ｃｙｔｏｐｌ化ｍ?ｅｘｔｒａｃｔｓ??３０??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Influence of Tanshinone lla on heat shock protein 70,Bcl-2 and Bax expression in rats with spinal ischemia/reperfusion injury[J]. Li Zhang,Weidong Gan,Guoyao An. Neural Regeneration Research. 2012(36)
[2]Down-regulation of p210bcr/ablby curcumin involves disrupting molecular chaperone functions of Hsp90[J]. Li-xian WU Jian-hua XU~2 Xiu-wang HUANG Kun-zhong ZHANG Cai-xia WEN Yuan-zhong CHEN~3 2 Institute of Clinical Pharmacology,Department of Pharmacology,Fujian Medical University;3 Fujian Institute of Hematology,Fuzhou 350004,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2006(06)
本文编号：3093435
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：101 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．５?Ｖｐ－１６诱导后，ｗｅｓ化ｍ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测ＡＩＦ入核
?ＡＩＦ主要在核蛋白（ＮＥ）中被检出，说明Ｖｐ－１６能够成功诱导ＡＩＦ入核，而相反，??Ｂｃｒ／Ａｂｌ阳性细胞中ＡＩＦ主要定位与胞浆中（图１．５，附图１?）。??３２Ｄ?３２ＤＰ２Ｉ０?Ｂａ／巧?ＩＷＦ３ＰＵ＂??、Ｐ－１６?．：?＋?－?＋?Ｖｐ－１６?￣?￣??—ＡＩＦ?，?一?ＡＩＦ??ＭＭ?病‘确＂２ＡＸ?玄?ｉＵ＊?ｍｔ?Ｈ２，、Ｘ??护站脚??Ｉａｍｍ％?一ａ?ａ０ｍｍｍ．?ｍｍｔｍ?＊?…??‘Ａｌｌ?Ａ?…??一?？？－?Ｔ—＾?？一?￣＾?？?一?＂ｉ—??＜■?—Ｉ?＂■麵ｗＮＩ?？?．?ｉＭＣｌ??Ｐ－？‘、＂…?誦?Ｐ－Ａｃ化１??：＇巧１；：＂．巧?’．Ｉ＇?＇?哗；贼巧灼运》＾９１??图１．５?Ｖｐ－１６诱导后，ｗｅｓ化ｍ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测ＡＩＦ入核。??Ｎ巨：细胞核蛋白，ＣＥ：细胞浆蛋白??Ｆｉｇｕｒ＊ｅ?１．５?ＡＩＦ?ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ?ｗａｓ?ａｓｓａｙｅｄ?ｂｙ?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ?ｉｎ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｃｅｌｌｓ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ??Ｖｐ－１６．ＮＥ，?ｎｕｃｌｅｕｓ?ｅｘｔｒａｃｔｓ，?ＣＥ，?ｃｙｔｏｐｌａｓｍ?ｅｘｔｒａｃｔｓ??同时我们对团Ｌ－６０和Ｋ５６２细胞进行了相同的处理，结果与两株转化细胞相同，??在Ｂｃｒ／Ａｂｌ阴性的ＨＬ６０细胞中Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ和ＩＦＴ结果显示ＡＩＦ定位与细胞??核中
（Ａｄ－ＨＡ－ｄＭＬＳ－ＡＩＦ），利用腺病毒感染并表达与Ｋ５６２细胞中，观测其亚细胞??定位Ｗ及诱导细胞调亡的能力。结果显示，与其野生对照（Ａｄ－ＨＡ－ＦＬＡＩＦ）比较，??ｄＭＬＳ－ＡＩＦ定位无差异，两者均定位与细胞浆中（图１．７，附图３）。同时调亡检测??也显示，ｄＭＬＳ－ＡＩＦ未能明显诱导Ｋ５６２细胞调亡（图１．８，附图４）。??ＨＡ－ＡＩＦ??１Ｉ２ＡＸ??—Ｒ４－ＡＩＦ??Ｗ??Ｕ?￣；???＾?（Ｖ－Ａｃｔｉｎ??分＼?＞??图１．７?ｗｅｓ巧ｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ法检测ｄＭＬＳ－ＡＩＦ亚细胞定位，ＮＥ：细胞核蛋白，ＣＥ：细胞浆蛋白??Ｆｉｇｕｒｅ?１．７?ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ?ｄｉｓｔＨｂｕｔｉｏｎ?ｏｆ?ｄ?ＭＬＳ－ＡＩＦ?ｗａｓ?ｄｅ化Ｃ化ｄ?ｂｙ?ｗｅｓ化ｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ．?ＮＥ，?ｎｕｃｌｅｕｓ??ｅ乂ｔｒａｃｔｓ，Ｃ巨，ｃｙｔｏｐｌ化ｍ?ｅｘｔｒａｃｔｓ??３０??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Influence of Tanshinone lla on heat shock protein 70,Bcl-2 and Bax expression in rats with spinal ischemia/reperfusion injury[J]. Li Zhang,Weidong Gan,Guoyao An. Neural Regeneration Research. 2012(36)
[2]Down-regulation of p210bcr/ablby curcumin involves disrupting molecular chaperone functions of Hsp90[J]. Li-xian WU Jian-hua XU~2 Xiu-wang HUANG Kun-zhong ZHANG Cai-xia WEN Yuan-zhong CHEN~3 2 Institute of Clinical Pharmacology,Department of Pharmacology,Fujian Medical University;3 Fujian Institute of Hematology,Fuzhou 350004,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2006(06)
本文编号：3093435
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3093435.html
