CLDN6通过Tyk2/Stat3信号通路抑制结肠癌细胞sw1116迁移和侵袭的作用
发布时间：2021-03-21 17:58
目的:本项目拟探讨紧密连接蛋白CLDN6通过Tyk2（tyrosine-protein kinase 2）/Stat3（Signal transducers and activators of transcription 3）信号通路调控结肠癌细胞sw1116迁移与侵袭的作用,为结肠癌治疗和控制转移提供新的靶点。方法:Western-Blot技术检测过表达CLDN6蛋白的结肠癌sw1116细胞中Tyk2以及Stat3总蛋白及磷酸化蛋白的表达水平;MTT法检测酪氨酸激酶抑制剂AG490对过表达CLDN6的sw1116细胞的最大安全剂量;Western-Blot技术检测AG490抑制Stat3磷酸化的最佳作用浓度和最佳作用时间;划痕实验、Transwell迁移及Transwell侵袭实验分别检测AG490对过表达CLDN6的sw1116细胞体外迁移及侵袭能力的影响。结果:与空载组相比,过表达CLDN6的sw1116细胞克隆组中Tyk2及Stat3的磷酸化水平明显升高;AG490抑制Stat3磷酸化的最适浓度和时间分别为50μM和48h;AG490处理克隆组细胞后,与对照组相比,过表达CLD...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
提要
中文摘要
Abstract
缩略词
引言
第1章 文献综述
1.1 CLDNs结构与功能简介
1.2 CLDNs家族的分布
1.3 CLDNs在肿瘤中的表达及功能研究
1.3.1 呼吸系统中CLDNs的表达
1.3.2 消化系统中CLDNs的表达
1.3.3 生殖系统中CLDNs的表达
1.3.4 乳腺癌与CLDNs的表达
1.4 CLNDs的相关信号通路研究
1.4.1 CLDNs与MAPKs以及PI3K/Akt相关信号通路的研究
1.4.2 CLDNs与Jaks/Stats相关信号通路的研究
1.5 展望和挑战
第2章 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 细胞株
2.1.2 主要耗材与试剂
2.1.3 主要设备与仪器
2.1.4 主要试剂配制
2.1.5 抗体稀释倍数
2.2 实验方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 Western-Blot鉴定CLDN6表达与Tyk2/stat3表达的关系
2.2.3 MTT技术鉴定AG490对sw1116细胞的IC50
2.2.4 Western-Blot鉴定AG490抑制stat3磷酸化的最佳作用条件
2.2.5 AG490对细胞迁移能力的影响
2.2.6 AG490对细胞侵袭能力的影响
2.3 统计方法
第3章 结果
3.1 CLDN6的表达对Tyk2/stat3信号通路活化的影响
3.2 MTT技术鉴定AG490对sw1116细胞的IC50
3.3 Western-Blot方法检测AG490的最佳作用浓度以及最佳作用时间
3.3.1 AG490处理的最佳作用浓度
3.3.2 AG490处理的最佳作用时间
3.4 AG490对克隆组细胞形态的影响
3.5 AG490对克隆组细胞迁移与侵袭能力的影响
3.5.1 划痕实验检测AG490对克隆组细胞迁移能力的影响
3.5.2 Transwell实验检测AG490对克隆组细胞迁移能力的影响
3.5.3 Transwell实验检测AG490对克隆组细胞侵袭能力的影响
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
作者简介及在读期间所取得的科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]Claudin 1 mediates tumor necrosis factor alpha-induced cell migration in human gastric cancer cells[J]. Atsushi Shiozaki,Hiroki Shimizu,Daisuke Ichikawa,Hirotaka Konishi,Shuhei Komatsu,Takeshi Kubota,Hitoshi Fujiwara,Kazuma Okamoto,Daisuke Iitaka,Shingo Nakashima,Yoshito Nako,Mingyao Liu,Eigo Otsuji. World Journal of Gastroenterology. 2014(47)
博士论文
[1]过表达claudin-6对乳腺癌细胞MCF-7生物学行为的影响及作用机制的研究[D]. 吴琼.吉林大学 2010
硕士论文
[1]紧密连接蛋白CLDN6对结肠癌细胞SW1116恶性表型的抑制作用[D]. 王敏.吉林大学 2014
[2]MCF-7细胞中CLDN6靶基因的筛选及CLDN6通过Tyk-2/Stats通路影响MCF-7细胞的恶性表型[D]. 张婷.吉林大学 2012
本文编号：3093301
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
提要
中文摘要
Abstract
缩略词
引言
第1章 文献综述
1.1 CLDNs结构与功能简介
1.2 CLDNs家族的分布
1.3 CLDNs在肿瘤中的表达及功能研究
1.3.1 呼吸系统中CLDNs的表达
1.3.2 消化系统中CLDNs的表达
1.3.3 生殖系统中CLDNs的表达
1.3.4 乳腺癌与CLDNs的表达
1.4 CLNDs的相关信号通路研究
1.4.1 CLDNs与MAPKs以及PI3K/Akt相关信号通路的研究
1.4.2 CLDNs与Jaks/Stats相关信号通路的研究
1.5 展望和挑战
第2章 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 细胞株
2.1.2 主要耗材与试剂
2.1.3 主要设备与仪器
2.1.4 主要试剂配制
2.1.5 抗体稀释倍数
2.2 实验方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 Western-Blot鉴定CLDN6表达与Tyk2/stat3表达的关系
2.2.3 MTT技术鉴定AG490对sw1116细胞的IC50
2.2.4 Western-Blot鉴定AG490抑制stat3磷酸化的最佳作用条件
2.2.5 AG490对细胞迁移能力的影响
2.2.6 AG490对细胞侵袭能力的影响
2.3 统计方法
第3章 结果
3.1 CLDN6的表达对Tyk2/stat3信号通路活化的影响
3.2 MTT技术鉴定AG490对sw1116细胞的IC50
3.3 Western-Blot方法检测AG490的最佳作用浓度以及最佳作用时间
3.3.1 AG490处理的最佳作用浓度
3.3.2 AG490处理的最佳作用时间
3.4 AG490对克隆组细胞形态的影响
3.5 AG490对克隆组细胞迁移与侵袭能力的影响
3.5.1 划痕实验检测AG490对克隆组细胞迁移能力的影响
3.5.2 Transwell实验检测AG490对克隆组细胞迁移能力的影响
3.5.3 Transwell实验检测AG490对克隆组细胞侵袭能力的影响
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
作者简介及在读期间所取得的科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]Claudin 1 mediates tumor necrosis factor alpha-induced cell migration in human gastric cancer cells[J]. Atsushi Shiozaki,Hiroki Shimizu,Daisuke Ichikawa,Hirotaka Konishi,Shuhei Komatsu,Takeshi Kubota,Hitoshi Fujiwara,Kazuma Okamoto,Daisuke Iitaka,Shingo Nakashima,Yoshito Nako,Mingyao Liu,Eigo Otsuji. World Journal of Gastroenterology. 2014(47)
博士论文
[1]过表达claudin-6对乳腺癌细胞MCF-7生物学行为的影响及作用机制的研究[D]. 吴琼.吉林大学 2010
硕士论文
[1]紧密连接蛋白CLDN6对结肠癌细胞SW1116恶性表型的抑制作用[D]. 王敏.吉林大学 2014
[2]MCF-7细胞中CLDN6靶基因的筛选及CLDN6通过Tyk-2/Stats通路影响MCF-7细胞的恶性表型[D]. 张婷.吉林大学 2012
本文编号：3093301
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