PI3K/Akt信号通路对与基质细胞共培养后的急性髓系白血病细胞药物敏感性的影响及临床意义
发布时间：2021-03-27 13:54
目的:探讨PI3K/Akt信号通路对与骨髓基质细胞共培养后的急性髓系白血病细胞药物敏感性的影响。方法:以与骨髓基质细胞株HS-5细胞共培养后的人急性髓系白血病细胞株（HL60细胞和U937细胞）为研究对象,采用CCK-8法检测细胞对DNR和Ara-C的敏感性,Western blot检测PI3K/Akt信号通路p-Akt Ser473、p-PDK1与p-PTEN等信号分子,Real-time PCR检测PTEN、CCND1、m TOR、RICTOR和FOXO1等基因转录水平。采用Real-time PCR和Western blot分别检测原代AML细胞PTEN、CCND1、FOXO1、m TOR和RICTOR等基因的m RNA水平和蛋白表达水平。结果:DNR和Ara-C对单独悬浮培养的HL60细胞和U937细胞均有显著的杀伤作用,并具有剂量依赖性。与HS-5细胞共培养后的HL60细胞和U937细胞对DNR和Ara-C的敏感性均明显降低,LY294002可部分恢复HL60细胞和U937细胞对DNR和Ara-C的敏感性。DNR（0.2μM）对共培养前、后及共培养后再经LY294002预处理...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DNR和Ara-C对单独悬浮培养的HL60细胞和U937细胞增殖的抑制作用
图 2 与 HS-5 细胞粘附共培养后 AML 细胞对 DNR 与 Ara-C 敏感性显著降低，LY294002 可增强敏感性（*：与单独悬浮培养的细胞相比，p<0.01；**：与未加药的共培养后的细胞相比 p<0.05）3. 与 HS-5 细胞共培养后 HL60 细胞和 U937 细胞内 PI3K/Akt 信号通路被激活，这一激活过程可以被 LY294002 抑制由图 3 可见，与 HS-5 细胞共培养 24h 的 HL60 细胞和 U937 细胞的 p-AktSer473和 p-PDK1 均明显上调，p-PTEN 均明显下调。共培养后的细胞经 LY294002 处理后，p-AktSer473与 p-PDK1 明显下调，p-PTEN 则明显上调。这表明与 HS-5 细胞共培养后的 HL60 细胞和 U937 细胞内的 PI3K/Akt 信号通路被激活，LY294002可以抑制这一活化过程。
福建医科大学硕士学位论文21图3 与HS-5细胞粘附共培养后HL60细胞和U937细胞内的PI3K/Akt信号通路被激活，LY294002 可抑制该通路的激活4. 与 HS-5 细胞共培养后的 HL60 细胞和 U937 细胞中 PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR 与 FOXO1 等基因 mRNA 和蛋白表达水平的变化以与共培养前相比相差至少一个 CT 值水平换算，mRNA 水平增高 3 倍以上为增高，降低 2 倍以上为降低。如图 4 所示，与 HS-5 细胞共培养后，HL60 细胞的CCND1与FOXO1转录水平增高，mTOR与PTEN转录水平下降，而RICTOR的转录水平无显著改变；在蛋白表达水平
【参考文献】：
期刊论文
[1]急性髓系白血病患者骨髓细胞相关分子标志物表达研究[J]. 黄晓,王荣华,李冬云,赖宗浪,褚雨霆,张宇,陈信义. 中国实验血液学杂志. 2014(05)
[2]PI3K/AKT信号通路在急性白血病中调控机制的初步研究[J]. 王伟丽,张英弛,曾慧敏,华春兰,魏蔚,许静,竺晓凡,程涛,袁卫平. 中国实验血液学杂志. 2012(01)
[3]Wortmannin Inhibits K562 Lukemic Cells by Regulating PI3k/Akt Channel In Vitro[J]. 吴青,陈燕,崔国惠,程亦荃. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2009(04)
本文编号：3103623
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DNR和Ara-C对单独悬浮培养的HL60细胞和U937细胞增殖的抑制作用
图 2 与 HS-5 细胞粘附共培养后 AML 细胞对 DNR 与 Ara-C 敏感性显著降低，LY294002 可增强敏感性（*：与单独悬浮培养的细胞相比，p<0.01；**：与未加药的共培养后的细胞相比 p<0.05）3. 与 HS-5 细胞共培养后 HL60 细胞和 U937 细胞内 PI3K/Akt 信号通路被激活，这一激活过程可以被 LY294002 抑制由图 3 可见，与 HS-5 细胞共培养 24h 的 HL60 细胞和 U937 细胞的 p-AktSer473和 p-PDK1 均明显上调，p-PTEN 均明显下调。共培养后的细胞经 LY294002 处理后，p-AktSer473与 p-PDK1 明显下调，p-PTEN 则明显上调。这表明与 HS-5 细胞共培养后的 HL60 细胞和 U937 细胞内的 PI3K/Akt 信号通路被激活，LY294002可以抑制这一活化过程。
福建医科大学硕士学位论文21图3 与HS-5细胞粘附共培养后HL60细胞和U937细胞内的PI3K/Akt信号通路被激活，LY294002 可抑制该通路的激活4. 与 HS-5 细胞共培养后的 HL60 细胞和 U937 细胞中 PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR 与 FOXO1 等基因 mRNA 和蛋白表达水平的变化以与共培养前相比相差至少一个 CT 值水平换算，mRNA 水平增高 3 倍以上为增高，降低 2 倍以上为降低。如图 4 所示，与 HS-5 细胞共培养后，HL60 细胞的CCND1与FOXO1转录水平增高，mTOR与PTEN转录水平下降，而RICTOR的转录水平无显著改变；在蛋白表达水平
【参考文献】：
期刊论文
[1]急性髓系白血病患者骨髓细胞相关分子标志物表达研究[J]. 黄晓,王荣华,李冬云,赖宗浪,褚雨霆,张宇,陈信义. 中国实验血液学杂志. 2014(05)
[2]PI3K/AKT信号通路在急性白血病中调控机制的初步研究[J]. 王伟丽,张英弛,曾慧敏,华春兰,魏蔚,许静,竺晓凡,程涛,袁卫平. 中国实验血液学杂志. 2012(01)
[3]Wortmannin Inhibits K562 Lukemic Cells by Regulating PI3k/Akt Channel In Vitro[J]. 吴青,陈燕,崔国惠,程亦荃. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2009(04)
本文编号：3103623
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