GKN2高表达阻断JAK2/STAT3通路抑制SGC7901细胞迁移和侵袭
发布时间：2021-03-29 22:04
目的探究胃动蛋白2（Gastrokine 2,GKN2）对人胃癌细胞SGC7901迁移和侵袭的影响,并探讨GKN2对人胃癌SGC7901细胞JAK2/STAT3通路的调控作用,为阐明抗胃癌机理提供基础理论依据。方法1、将构建好的GKN2真核载体质粒瞬时转染人胃癌SGC7901细胞,在荧光倒置显微镜下观察其转染效率,Western Blot验证GKN2转染是否成功。2、运用MTT实验、细胞划痕试验、Transwell迁移和Transwell侵袭实验分析GKN2转染对人胃癌细胞SGC7901迁移和侵袭的影响。3、采用Western blot方法观察GKN2转染后JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达变化。4、采用ELISA检测血清GKN2浓度,分析胃癌患者与正常血清GKN2浓度差异。结果1、转染实验结果显示,未转染组无荧光表达,空载体组及GKN2转染组转染效率分别约为91%及90%。Western Blot实验结果显示,与未转染组（0.2290±0.0007）和空载体组（0.2210±0.0008）相比,GKN2转染组（1.6678±0.0008）GKN2蛋白的相对表达...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
腺病毒转染人胃癌SGC7901细胞系48h后的镜下图
图 2 Western Blot 检测三组人胃癌 SGC7901 细胞中 GKN2 蛋白表达A:未转染组；B：空载体组；C：GKN2 转染组*：vs 未转染组与空载体组,P＜0.05；3.3 MTT 实验验证 GKN2 对人胃癌 SGC7901 增殖的影响MTT 结果如下(如表 1，图 3、图 4 所示)：由 OD 值的大小可知未转染组及空载体组的 SGC7901 细胞在 24h、 48h 及 72h 均有扩增，且扩增速度较明显，GKN2 转染组的人胃癌 SGC7901 细胞在 24h、48h 及 72h 的 OD 值均较同时期未转染组和空载体组偏小，其增殖均受到抑制 (P＜0.05)。说明 GKN2 可以抑制人胃癌 SGC7901 细胞的增殖。表 1 各处理因素处理 SGC7901 后的 OD490值(x±s，n =3)时间(h)未转染组 空载体组GKN2 转染组OD490值 抑制率（%）
图 3 MTT 法绘制经处理后各组细胞生长曲线A:未转染组；B：空载体组；C：GKN2 转染组*:vs 未转染组及空载体组，P<0.05图 4 GKN2 对 SGC7901 的生长抑制率（%）A:未转染组；B：空载体组；C：GKN2 转染组***
【参考文献】：
期刊论文
[1]胃癌干细胞的分离、鉴定及其特性[J]. 李阳,赵永福. 中国组织工程研究. 2015(32)
[2]血清卷曲螺旋蛋白49及胃动蛋白2诊断胃癌的临床价值[J]. 徐小虹,李建芳,苏丽萍,李琛,朱正纲,刘炳亚. 外科理论与实践. 2015(03)
[3]Treatment of gastric cancer[J]. Michele Orditura,Gennaro Galizia,Vincenzo Sforza,Valentina Gambardella,Alessio Fabozzi,Maria Maddalena Laterza,Francesca Andreozzi,Jole Ventriglia,Beatrice Savastano,Andrea Mabilia,Eva Lieto,Fortunato Ciardiello,Ferdinando De Vita. World Journal of Gastroenterology. 2014(07)
[4]Epithelial-mesenchymal transition-activating transcription factors-multifunctional regulators in cancer[J]. Minal Garg. World Journal of Stem Cells. 2013(04)
[5]胃癌相关新基因GDDR的研究[J]. 杜建军,窦科峰,彭淑牖,李江涛,刘颖斌,王为忠,管文贤,高志清. 中华外科杂志. 2005(01)
硕士论文
[1]GKN2高表达对胃癌干细胞增殖、迁移侵袭和凋亡影响的研究[D]. 胡皓彬.南华大学 2017
[2]GKN2在胃癌中的表达及对MKN28细胞的抑制作用[D]. 刘姣.南华大学 2015
[3]DADS抑制CD44+人胃癌细胞AGS“干样”特性的作用研究[D]. 段海瑞.南华大学 2012
本文编号：3108277
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
腺病毒转染人胃癌SGC7901细胞系48h后的镜下图
图 2 Western Blot 检测三组人胃癌 SGC7901 细胞中 GKN2 蛋白表达A:未转染组；B：空载体组；C：GKN2 转染组*：vs 未转染组与空载体组,P＜0.05；3.3 MTT 实验验证 GKN2 对人胃癌 SGC7901 增殖的影响MTT 结果如下(如表 1，图 3、图 4 所示)：由 OD 值的大小可知未转染组及空载体组的 SGC7901 细胞在 24h、 48h 及 72h 均有扩增，且扩增速度较明显，GKN2 转染组的人胃癌 SGC7901 细胞在 24h、48h 及 72h 的 OD 值均较同时期未转染组和空载体组偏小，其增殖均受到抑制 (P＜0.05)。说明 GKN2 可以抑制人胃癌 SGC7901 细胞的增殖。表 1 各处理因素处理 SGC7901 后的 OD490值(x±s，n =3)时间(h)未转染组 空载体组GKN2 转染组OD490值 抑制率（%）
图 3 MTT 法绘制经处理后各组细胞生长曲线A:未转染组；B：空载体组；C：GKN2 转染组*:vs 未转染组及空载体组，P<0.05图 4 GKN2 对 SGC7901 的生长抑制率（%）A:未转染组；B：空载体组；C：GKN2 转染组***
【参考文献】：
期刊论文
[1]胃癌干细胞的分离、鉴定及其特性[J]. 李阳,赵永福. 中国组织工程研究. 2015(32)
[2]血清卷曲螺旋蛋白49及胃动蛋白2诊断胃癌的临床价值[J]. 徐小虹,李建芳,苏丽萍,李琛,朱正纲,刘炳亚. 外科理论与实践. 2015(03)
[3]Treatment of gastric cancer[J]. Michele Orditura,Gennaro Galizia,Vincenzo Sforza,Valentina Gambardella,Alessio Fabozzi,Maria Maddalena Laterza,Francesca Andreozzi,Jole Ventriglia,Beatrice Savastano,Andrea Mabilia,Eva Lieto,Fortunato Ciardiello,Ferdinando De Vita. World Journal of Gastroenterology. 2014(07)
[4]Epithelial-mesenchymal transition-activating transcription factors-multifunctional regulators in cancer[J]. Minal Garg. World Journal of Stem Cells. 2013(04)
[5]胃癌相关新基因GDDR的研究[J]. 杜建军,窦科峰,彭淑牖,李江涛,刘颖斌,王为忠,管文贤,高志清. 中华外科杂志. 2005(01)
硕士论文
[1]GKN2高表达对胃癌干细胞增殖、迁移侵袭和凋亡影响的研究[D]. 胡皓彬.南华大学 2017
[2]GKN2在胃癌中的表达及对MKN28细胞的抑制作用[D]. 刘姣.南华大学 2015
[3]DADS抑制CD44+人胃癌细胞AGS“干样”特性的作用研究[D]. 段海瑞.南华大学 2012
本文编号：3108277
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