NEUROG3表达与胃癌细胞分化及肿瘤临床分期的相关性研究
发布时间：2021-03-31 03:44
目的:检测神经元素3（neurogenin3,NEUROG3）在胃癌临床标本和细胞系中的表达,探讨其与胃癌细胞分化程度及肿瘤分期的关系。方法:回顾性收集2016年—2018年重庆医科大学附属第二医院181例患者的临床病理资料。并采用免疫组织化学染色（immunohistochemistry,IHC）检测NEUROG3在肠化生胃粘膜和胃癌组织中的表达。利用Real-time PCR和Western blot,检测NEUROG3在不同分化程度胃癌细胞系和人胃黏膜上皮细胞系GES-1中的表达。观察沉默NEUROG3基因表达的MKN-28细胞形态变化,并通过Real-time PCR检测其胃癌细胞分化抑制蛋白（inhibitor of DNA binding or differentiation,Id-1）的表达。结果:NEUROG3在低分化胃癌组织中表达较低,而在癌旁组织、肠化生胃粘膜组织和中高分化胃癌组织中表达评分较高,评分差异有统计学意义（P<0.001）。GES-1和高分化胃癌细胞系MKN-28中的NEUROG3表达明显高于中低分化胃癌细胞系SGC-7901、MKN-45和BGC...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：29 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
IHC染色检测不同胃组织中NEUROG3的表达情况
重庆医科大学硕士研究生学位论文9系中NEUROG3的表达情况。结果提示，在高分化胃癌细胞系MKN-28和胃黏膜上皮细胞系GES-1中，NEUROG3的基因转录水平明显高于中低分化胃癌细胞系SGC-7901、MKN-45和BGC-823，并且蛋白表达呈强阳性（图2），与临床标本的检测结果一致。为了进一步评估NEUROG3在胃癌细胞分化中的作用，我们利用前期实验构建的沉默了NEUROG3的MKN-28细胞株（MKN-28-shNEUROG3），通过Real-timePCR和WB证实其NEUROG3的敲低情况（图3A、B）。实验观察发现，MKN-28-sh-NEUROG3细胞变小，与Ctrl/MKN-28细胞相比，核细胞质比例增加（图3C），细胞生长增快。Real-timePCR检测细胞分化抑制蛋白Id-1的表达增加（P<0.001，图3D）。由此可见，NEUROG3在维持细胞分化中起重要作用，其表达下调可致去分化。A:Real-timePCR检测胃癌细胞中NEUROG3mRNA的表达，a：P<0.01，与GES-1组比较；b：P<0.001，与GES-1组比较；B:Westernblot检测胃癌细胞中NEUROG3蛋白的表达。图2NEUROG3在不同胃细胞系中的表达情况Figure2TheexpressionofNEUROG3indifferentgastriccelllines
重庆医科大学硕士研究生学位论文10A：Real-timePCR检测胃癌细胞shNEUROG3/MKN-28中NEUROG3mRNA的表达，a：P<0.01，与对照组比较；B：Westernblot检测胃癌细胞shNEUROG3/MKN-28中NEUROG3蛋白的表达；C：MKN-28细胞NEUROG3敲低后细胞形态学变化；D：Real-timePCR检测MKN-28细胞NEUROG3敲低后Id-1mRNA的表达，a：P<0.001，与对照组比较。图3沉默NEUROG3基因表达导致胃癌细胞去分化Figure3.TheexpressionofthesilentNEUROG3geneleadstothededifferentiationofgastriccancercells2.2NEUROG3表达与胃癌临床分期呈负相关进一步评估NEUROG3和胃癌的临床相关性（临床病理特征与NEUROG3表达的关系总结在表1中），分析显示，NEUROG3的表达差异与患者的性别、年龄和肿瘤大小无统计学意义（P0.05，表1），而与是否存在淋巴结转移（P<0.05，r=-0.180，表1）和TNM分期（P<0.001，r=-0.431，表2）呈负相关。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Characteristics of gastric cancer in Asia[J]. Rubayat Rahman,Akwi W Asombang,Jamal A Ibdah. World Journal of Gastroenterology. 2014(16)
本文编号：3110720
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：29 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
IHC染色检测不同胃组织中NEUROG3的表达情况
重庆医科大学硕士研究生学位论文9系中NEUROG3的表达情况。结果提示，在高分化胃癌细胞系MKN-28和胃黏膜上皮细胞系GES-1中，NEUROG3的基因转录水平明显高于中低分化胃癌细胞系SGC-7901、MKN-45和BGC-823，并且蛋白表达呈强阳性（图2），与临床标本的检测结果一致。为了进一步评估NEUROG3在胃癌细胞分化中的作用，我们利用前期实验构建的沉默了NEUROG3的MKN-28细胞株（MKN-28-shNEUROG3），通过Real-timePCR和WB证实其NEUROG3的敲低情况（图3A、B）。实验观察发现，MKN-28-sh-NEUROG3细胞变小，与Ctrl/MKN-28细胞相比，核细胞质比例增加（图3C），细胞生长增快。Real-timePCR检测细胞分化抑制蛋白Id-1的表达增加（P<0.001，图3D）。由此可见，NEUROG3在维持细胞分化中起重要作用，其表达下调可致去分化。A:Real-timePCR检测胃癌细胞中NEUROG3mRNA的表达，a：P<0.01，与GES-1组比较；b：P<0.001，与GES-1组比较；B:Westernblot检测胃癌细胞中NEUROG3蛋白的表达。图2NEUROG3在不同胃细胞系中的表达情况Figure2TheexpressionofNEUROG3indifferentgastriccelllines
重庆医科大学硕士研究生学位论文10A：Real-timePCR检测胃癌细胞shNEUROG3/MKN-28中NEUROG3mRNA的表达，a：P<0.01，与对照组比较；B：Westernblot检测胃癌细胞shNEUROG3/MKN-28中NEUROG3蛋白的表达；C：MKN-28细胞NEUROG3敲低后细胞形态学变化；D：Real-timePCR检测MKN-28细胞NEUROG3敲低后Id-1mRNA的表达，a：P<0.001，与对照组比较。图3沉默NEUROG3基因表达导致胃癌细胞去分化Figure3.TheexpressionofthesilentNEUROG3geneleadstothededifferentiationofgastriccancercells2.2NEUROG3表达与胃癌临床分期呈负相关进一步评估NEUROG3和胃癌的临床相关性（临床病理特征与NEUROG3表达的关系总结在表1中），分析显示，NEUROG3的表达差异与患者的性别、年龄和肿瘤大小无统计学意义（P0.05，表1），而与是否存在淋巴结转移（P<0.05，r=-0.180，表1）和TNM分期（P<0.001，r=-0.431，表2）呈负相关。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Characteristics of gastric cancer in Asia[J]. Rubayat Rahman,Akwi W Asombang,Jamal A Ibdah. World Journal of Gastroenterology. 2014(16)
本文编号：3110720
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