KLHL24在前列腺癌DU-145细胞中的表达及功能分析
发布时间:2021-04-02 00:15
目的:探究KLHL24在前列腺癌DU-145细胞中的表达情况及功能,为前列腺癌的治疗寻找新的潜在分子靶标提供理论基础。材料与方法:以前列腺癌DU-145细胞为实验对象,实验分为过表达组(转染pCD513B-KLHL24)、空载质粒组(转染pCD513B空载体)、空白对照组(未做特殊处理)。使用免疫荧光染色确定KLHL24及KRT18在DU-145细胞内的表达及共定位情况;采用脂质体转染法完成转染,通过倒置荧光显微镜观察转染情况;通过克隆形成实验计算各实验组克隆形成率;采用流式细胞术检测各实验组处理后的细胞周期情况;应用蛋白质免疫印迹法检测各实验组KRT18蛋白的表达情况。结果:1.免疫荧光共定位结果显示KLHL24与KRT18在DU-145细胞的胞浆中均有表达,且在胞浆中具有空间共定位现象。2.荧光显微镜观察空载质粒组、过表达组表达荧光的细胞>70%,成功构建了过表达KLHL24的DU-145细胞模型。3.过表达组的克隆集落数为327±35.9个,克隆形成率为65.4%;空载质粒组的克隆集落数为364±26.1个,克隆形成率为72.8%;空白对照组的克隆集落数为340±19.8个...
【文章来源】:南华大学湖南省
【文章页数】:54 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
KRT18(红色)、KLHL24(绿色)在DU-145细胞中的分布
第3章实验结果17图2KLHL24与KRT18在DU-145细胞中的荧光共定位A为KLHL24,B为KRT18,C为DAPI复染,D为前三者图片相互叠加第3章实验结果3.1KLHL24和KRT18在DU-145细胞内的表达及共定位情况结果表明KRT18(红色荧光)、KLHL24(绿色荧光)在DU-145细胞胞浆中均有表达,见图1。将同一视野照片叠加处理,可见KLHL24同KRT18融合成黄色,见图2D。表明KLHL24与KRT18在细胞内具有共定位现象。图1KRT18(红色)、KLHL24(绿色)在DU-145细胞中的分布
南华大学硕士学位论文183.2成功构建过表达组和空载质粒组细胞模型细胞转染后24-48小时荧光显微镜观察转染后细胞的荧光表达情况。与明场镜下对比,过表达组、空载质粒组表达荧光的细胞均达到70%以上,见图3。图3转染后细胞荧光表达A、B分别为空载质粒组明尝荧光场镜下观,C、D分别为过表达组明尝荧光场镜下观
【参考文献】:
期刊论文
[1]Carfilzomib通过上调Gadd45a表达抑制肺腺癌细胞生长(英文)[J]. Fang YANG,Wang-wang LIU,Hui CHEN,Jia ZHU,Ai-hua HUANG,Fei ZHOU,Yi GAN,Yan-hua ZHANG,Li MA. Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2020(01)
[2]RASSF10基因启动子甲基化对肺癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 毕婧,余蕊,黄波,谢召峰. 临床肿瘤学杂志. 2019(09)
[3]蛋白酶体抑制剂依沙佐米对胰腺癌细胞凋亡及NF-κB通路的影响[J]. 王自闯,陈小永,张娟. 中国病理生理杂志. 2019(08)
[4]免疫组化法探究前列腺癌进展过程中细胞表型特征[J]. 杨旭,曹家松,赵肖玲,申永梅,梁之娴,林启妹,杜小玲,张琚. 南开大学学报(自然科学版). 2019(02)
[5]蛋白酶体抑制剂MG132对膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响[J]. 何波,王文瑞,李健,王平. 中国医科大学学报. 2019(04)
[6]1990-2013年中国男性前列腺癌疾病负担分析[J]. 齐金蕾,王黎君,周脉耕,刘韫宁,刘江美,刘世炜,曾新颖,殷鹏. 中华流行病学杂志. 2016 (06)
[7]MLN2238对宫颈癌HeLa细胞生长抑制和放射增敏及其机制探讨[J]. 葛杨杨,谷庆,马长升,蔡晶,王骁,曹建平. 中华肿瘤防治杂志. 2014(04)
硕士论文
[1]KLHL24在结肠癌细胞中的作用及其互作蛋白的筛选[D]. 刘瑶.南华大学 2019
[2]卡非佐米联合米托坦用于治疗肾上腺皮质癌的体外研究[D]. 韦庆臣.广西医科大学 2017
本文编号:3114226
【文章来源】:南华大学湖南省
【文章页数】:54 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
KRT18(红色)、KLHL24(绿色)在DU-145细胞中的分布
第3章实验结果17图2KLHL24与KRT18在DU-145细胞中的荧光共定位A为KLHL24,B为KRT18,C为DAPI复染,D为前三者图片相互叠加第3章实验结果3.1KLHL24和KRT18在DU-145细胞内的表达及共定位情况结果表明KRT18(红色荧光)、KLHL24(绿色荧光)在DU-145细胞胞浆中均有表达,见图1。将同一视野照片叠加处理,可见KLHL24同KRT18融合成黄色,见图2D。表明KLHL24与KRT18在细胞内具有共定位现象。图1KRT18(红色)、KLHL24(绿色)在DU-145细胞中的分布
南华大学硕士学位论文183.2成功构建过表达组和空载质粒组细胞模型细胞转染后24-48小时荧光显微镜观察转染后细胞的荧光表达情况。与明场镜下对比,过表达组、空载质粒组表达荧光的细胞均达到70%以上,见图3。图3转染后细胞荧光表达A、B分别为空载质粒组明尝荧光场镜下观,C、D分别为过表达组明尝荧光场镜下观
【参考文献】:
期刊论文
[1]Carfilzomib通过上调Gadd45a表达抑制肺腺癌细胞生长(英文)[J]. Fang YANG,Wang-wang LIU,Hui CHEN,Jia ZHU,Ai-hua HUANG,Fei ZHOU,Yi GAN,Yan-hua ZHANG,Li MA. Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2020(01)
[2]RASSF10基因启动子甲基化对肺癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 毕婧,余蕊,黄波,谢召峰. 临床肿瘤学杂志. 2019(09)
[3]蛋白酶体抑制剂依沙佐米对胰腺癌细胞凋亡及NF-κB通路的影响[J]. 王自闯,陈小永,张娟. 中国病理生理杂志. 2019(08)
[4]免疫组化法探究前列腺癌进展过程中细胞表型特征[J]. 杨旭,曹家松,赵肖玲,申永梅,梁之娴,林启妹,杜小玲,张琚. 南开大学学报(自然科学版). 2019(02)
[5]蛋白酶体抑制剂MG132对膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响[J]. 何波,王文瑞,李健,王平. 中国医科大学学报. 2019(04)
[6]1990-2013年中国男性前列腺癌疾病负担分析[J]. 齐金蕾,王黎君,周脉耕,刘韫宁,刘江美,刘世炜,曾新颖,殷鹏. 中华流行病学杂志. 2016 (06)
[7]MLN2238对宫颈癌HeLa细胞生长抑制和放射增敏及其机制探讨[J]. 葛杨杨,谷庆,马长升,蔡晶,王骁,曹建平. 中华肿瘤防治杂志. 2014(04)
硕士论文
[1]KLHL24在结肠癌细胞中的作用及其互作蛋白的筛选[D]. 刘瑶.南华大学 2019
[2]卡非佐米联合米托坦用于治疗肾上腺皮质癌的体外研究[D]. 韦庆臣.广西医科大学 2017
本文编号:3114226
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