AHVAC-Ⅰ诱导人原代胃癌细胞凋亡机制的研究

发布时间：2021-04-02 17:34

　　目的:分离纯化人原代胃癌细胞,探究皖南蝮蛇毒抑瘤组分-I（Agkis-trodon halys venom anti-tumor component-I,AHVAC-Ⅰ）对人原代胃癌细胞增殖的作用并深入研究其相关作用机制。方法:胰酶消化法和差速贴壁法分离和纯化出的原代胃癌细胞为体外研究对象,以不同浓度的AHVAC-Ⅰ处理人原代胃癌细胞24h后,采用细胞增殖和毒性检测法（Cell Counting Kit-8,CCK-8法）检测人胃癌原代细胞的增殖抑制率,得出AHVAC-Ⅰ的对人胃癌原代细胞的半数抑制浓度(IC₅₀)。根据IC₅₀结果设置4组AHVAC-Ⅰ（0、4、8、16μg/ml）实验浓度组,用不同浓度的AHVAC-Ⅰ分别处理人胃癌原代细胞24h后,采用苏木素-伊红染色法（Hematoxylin-Eosin staining,HE）、流式细胞术及免疫组化法（Immunohistochemistry,IHC）检测AHVAC-Ⅰ诱导人胃癌原代细胞发生凋亡的效应;运用ELISA法评估AHVAC-Ⅰ作用细胞后氧化应激水平,蛋白印迹法检测Bax、Cy... 

【文章来源】：皖南医学院安徽省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

人胃癌原代细胞的分离培养（×200）

皖南医学院硕士学位论文14图2.人胃癌原代细胞的免疫细胞化学鉴定CEA和AE1/AE3蛋白表达（×200）A.AE1/AE3蛋白在细胞阳性表达B.CEA蛋白在细胞阳性表达BA

皖南医学院硕士学位论文29与2μg/mlAHVAC-Ⅰ相比较**P＜0.01图3.AHVAC-Ⅰ对人原代胃癌细胞的增殖抑制率（%）2HE染色法观察AHVAC-Ⅰ对人原代胃癌细胞的形态学变化如下图所示，不同浓度的AHVAC-Ⅰ（4、8、16μg/ml）处理人原代胃癌细胞24h。HE染色镜下观察，正常对照组细胞贴壁紧密，细胞间隙窄，核分裂像较多，细胞呈不规则多边形和梭形。与正常对照组相比较，随AHVAC-Ⅰ浓度的增加，细胞间隙逐渐增宽，细胞贴壁不牢，易脱落，核固缩明显，细胞逐渐回缩变圆，可见凋亡细胞。A.正常对照组B.4μg/mlC.8μg/mlD.16μg/mlE.阳性对照组图4.HE染色法观察AHVAC-Ⅰ对人原代胃癌细胞形态变化（×200）********ABCDE

【参考文献】：
期刊论文
[1]应用MTT法对恶性肿瘤原代细胞培养进行规范化体外药敏试验的研究[J]. 李恒善,云耀峰,梁润,郝灵芳,苍宏宇.  中国实用医药. 2020(03)
[2]条件性重编程人源肿瘤细胞初步研究[J]. 赵鸿雁,赵旋,陈如章,高基民.  中国细胞生物学学报. 2019(10)
[3]眼镜蛇毒因子抑制小鼠疼痛反应[J]. 刘巧洲,郭静,石磊,李娇,杨庆雄,孙黔云.  中国药理学通报. 2019(05)
[4]非小细胞肺癌胸水原代肿瘤细胞系建立及其药敏试验的临床应用价值[J]. 胡嘉华,王海涛,刘志安,赵建华.  临床检验杂志. 2019(02)
[5]中国城市癌症早诊早治项目进展[J]. 陈万青,李霓,石菊芳,任建松,陈宏达,李江,代敏,赫捷.  中国肿瘤. 2019(01)
[6]皖南地区眼镜蛇毒活性组分外用镇痛的效应及机制研究[J]. 俞玲,张根葆,孙淑萍.  中国临床药理学与治疗学. 2018(11)
[7]一例血凝酶制剂致低纤维蛋白原血症患者的药学监护[J]. 羊波,石大伟,郑造乾.  中国临床药理学与治疗学. 2018(08)
[8]蛇毒血凝酶用于胃肠道术后止血的疗效观察[J]. 徐毅.  北方药学. 2018(07)
[9]皖南蝮蛇抑瘤组分Ⅰ对人胃癌SGC-7901细胞作用机制的初步探讨[J]. 赵容,卢林明,张根葆,柴琳,周珏.  皖南医学院学报. 2018(02)
[10]蛇毒抗肿瘤应用及其机制的研究进展[J]. 黄秒,胡启平.  中国肿瘤临床. 2017(19)

硕士论文
[1]MTT法检测脑胶质瘤原代细胞对不同浓度多柔比星的体外药物敏感性研究[D]. 覃超.桂林医学院 2017
[2]广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶体外抗肿瘤作用的实验研究[D]. 李丽兰.广西医科大学 2007



本文编号：3115669