阻断PI3K/AKT通路可抑制顺铂诱导的胃癌细胞迁移和侵袭
发布时间：2021-04-09 15:27
研究背景与目的化疗是目前临床上治疗肿瘤最常用的方法之一[1],然而大部分的肿瘤患者在经过化疗后仍会出现复发和转移[2],这也是临床上肿瘤患者死亡的主要原因[3][4]。近年来关于化疗药物与肿瘤细胞生物学特性的相关性研究发现,化疗药物顺铂作用于结肠癌等肿瘤细胞后,能够诱导肿瘤细胞发生上皮-间质转化（epithelial-mesenchymaltransition,EMT）,促进肿瘤的迁移和侵袭[5]。前期研究结果表明化疗药物表柔比星可通过激活PI3K/AKT信号通路,诱发EMT,促进胃癌细胞的迁移与侵袭。但是,化疗药物顺铂能否通过PI3K/AKT信号通路促进胃癌细胞的迁移与侵袭尚不清楚,因此,本研究使用化疗药物顺铂处理胃癌细胞,探究顺铂对胃癌迁移与侵袭的影响及其可能的发生机制。材料与方法1.MTT法检测顺铂对胃癌细胞毒性作用取对数生长期的胃癌细胞BGC 823,以1 × 105个/ml细胞铺入96孔板中,待细胞单层铺壁率达到50%左右的时候,用0μg/ml、0.5 μg/ml、1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml的顺铂处理胃癌细胞36h,检测化疗药物顺铂对胃癌细胞的毒性作用。2....
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１不同浓度的顺拍作用胃癌细胞３６?ｈ．细胞死亡率的变化??
?实验结果???癌细胞ＢＧＣ?８２３可能发生发生了上皮－间质化转变。??对照组?顺铂组??＿?＿??ａｎｔｎ?ｍｍ??３６ｈ；ｉ??图２对照组、顺柏组加药３６?ｈ后胃癌细胞ＢＧＣ?８２３的形态学变化??３．２．２顺铂对胃癌细胞上皮间质化转变相关蛋白水平表达的影响??Ｗｅｒｓｔｅｎｂｌｏｔ结果显示：顺铂处理胃癌细胞ＢＧＣ８２３?０?ｈ、１２?ｈ、２４?ｈ、３６?ｈ??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?的蛋白相对表达含量是?１±０．０４、０．９±０．０３２、０．７６±０．０１、０．５５±０．０１３，??Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?的蛋白相对表达含量是?０．２６土０．０１、０．３７±０．０１２、０．４１±０．０１３、０．４２??土０．０１９，与Ｏｈ相比，ｌｐｇ／ｍｌ顺销作用与胃癌细胞ＢＧＣ８２３?１２?ｈ、２４ｈ、３６ｈ??时，上皮细胞表型标记物Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的蛋白表达水平降低（Ｐ＜ＣＫ０５），而间质细??胞表型标记物Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的蛋白表达水平升高（结果重复三次，且Ｐ＜０．０５），??其差异具有统计学意义见图（３、４）。这一结果进一步确认了，顺铂诱导胃癌??细胞发生上皮－间质化转变。??１８??
?实验结果???Ｏｈ?１２ｈ?２４ｈ?３６ｈ??Ｅ－ｃａｃｔｈｅｒｉｎ??一?????Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ??图３?ｌｊｘｇ／ｍｌ顺铂作用后胃癌细胞不同日桐点上皮间质化转变??标志蛋白Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｎ－ｃａｄｈｅｒｌｎ蛋白表达水平的变化??？？??嫌?１名１?？＊?＿?ＯＳ，?Ｍ??钧?Ｉ?Ｉ?ａｗ?《?—＂，＾—ｍ?）?Ｊ＿?ａ?〇ｈ??ｔ?｜?ａｍ?＊〇４－?ｉ?＿?凾?ａ，２ｈ??ｔｕ－?，４?１?＿２相?？?Ｈ?■?■?＿２４ｈ??ｈ?ｈ?Ｍ?■■??ｖ?ｏ．ｏ－Ｌ－Ｍ——ＵＪ————Ｗ—?ｖ?ｏｏ－Ｌ－ＬＪ——ＵＪ——＾—＾―??Ｗ?Ｏｈ?１２ｈ?２４ｈ?３６ｈ?２?Ｏｔｉ?１２ｈ?２４ｈ?３６ｈ??图４?ｌｐｇ／ｍｌ顺铂作用后胃癌细胞不同时间点上皮间质化转变标志蛋白??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表达水平的变化??以上细胞形态学观察和Ｗｅｒｓｔｅｎ?ｂｌｏｔ的结果表明，顺铂可诱导胃癌细胞发生??上皮－间质化转变。??３．３顺铂能促进胃癌细胞迁移和侵袭??３．３．１顺铂对胃癌细胞迁移能力的影响??划痕结果显示：对照组胃癌细胞ＢＧＣ?８２３在划痕后３６?ｈ的划痕愈合度是??０．３３１±０．００３?（结果重复三次，且／＞＜０．０５），１略／ｍｌ顺铂组在划痕３６ｈ后的划痕??愈合度是〇．６１２±０．０２８８７?（结果重复三次，且Ｐ＜０．０５），与对照组相比，顺铂组??１９??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Microfluidic three-dimensional biomimetic tumor model for studying breast cancer cell migration and invasion in the presence of interstitial flow[J]. Chao Song,Dan Gao,Tianying Yuan,Yongli Chen,Liping Liu,Xiaowu Chen,Yuyang Jiang. Chinese Chemical Letters. 2019(05)
[2]循环肿瘤细胞上皮间质转化的研究进展[J]. 真德智,周世杰,刘志东,李云松. 医学综述. 2016(04)
[3]Targeting the PI3K/Akt signaling pathway in gastric carcinoma: A reality for personalized medicine?[J]. Shikha Satendra Singh,Wei Ney Yap,Frank Arfuso,Shreya Kar,Chao Wang,Wanpei Cai,Arunasalam M Dharmarajan,Gautam Sethi,Alan Prem Kumar. World Journal of Gastroenterology. 2015(43)
[4]VEGF与消化系肿瘤关系的研究新进展[J]. 张芸,赵晶,杜雅菊. 世界华人消化杂志. 2011(26)
[5]胰腺癌患者外周血VEGF和endostatin表达及意义[J]. 闫长青,刘三光,戚诚,张建生,王文斌. 中国肿瘤临床与康复. 2011(04)
[6]Recent advances in chemotherapy for advanced gastric cancer[J]. Jong Gwang Kim,Ho Young Chung,Wansik Yu. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2010(07)
[7]细胞外基质降解相关因子与宫颈癌[J]. 王永欣,周家德. 安徽医药. 2010(06)
[8]选择性阻断异常Wnt信号通路对肝癌细胞生长及侵袭的影响[J]. 江颖,周信达,刘银坤,黄晓武,孙瑞霞,张春晖,陆维祺,朱隽,罗文杰,张华. 复旦学报(医学版). 2010(02)
[9]VEGF与MMP-2在胃腺癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭转移的相关性研究[J]. 刘琳,熊永炎,田素芳. 肿瘤防治研究. 2004(01)
[10]Imbalance between expression of matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in invasiveness and metastasis of human gastric carcinoma[J]. Sheng Zhang Hua Lin Department of Pathology,The First Affiliated Hospital,Fujian Medical University,Fuzhou 350005,Fujian Province,China Li Li Jian-Yin Lin Department of Molecular Medicine,Fujian Medical University,Fuzhou,350004,Fujian Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2003(05)
本文编号：3127867
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１不同浓度的顺拍作用胃癌细胞３６?ｈ．细胞死亡率的变化??
?实验结果???癌细胞ＢＧＣ?８２３可能发生发生了上皮－间质化转变。??对照组?顺铂组??＿?＿??ａｎｔｎ?ｍｍ??３６ｈ；ｉ??图２对照组、顺柏组加药３６?ｈ后胃癌细胞ＢＧＣ?８２３的形态学变化??３．２．２顺铂对胃癌细胞上皮间质化转变相关蛋白水平表达的影响??Ｗｅｒｓｔｅｎｂｌｏｔ结果显示：顺铂处理胃癌细胞ＢＧＣ８２３?０?ｈ、１２?ｈ、２４?ｈ、３６?ｈ??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?的蛋白相对表达含量是?１±０．０４、０．９±０．０３２、０．７６±０．０１、０．５５±０．０１３，??Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?的蛋白相对表达含量是?０．２６土０．０１、０．３７±０．０１２、０．４１±０．０１３、０．４２??土０．０１９，与Ｏｈ相比，ｌｐｇ／ｍｌ顺销作用与胃癌细胞ＢＧＣ８２３?１２?ｈ、２４ｈ、３６ｈ??时，上皮细胞表型标记物Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的蛋白表达水平降低（Ｐ＜ＣＫ０５），而间质细??胞表型标记物Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的蛋白表达水平升高（结果重复三次，且Ｐ＜０．０５），??其差异具有统计学意义见图（３、４）。这一结果进一步确认了，顺铂诱导胃癌??细胞发生上皮－间质化转变。??１８??
?实验结果???Ｏｈ?１２ｈ?２４ｈ?３６ｈ??Ｅ－ｃａｃｔｈｅｒｉｎ??一?????Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ??图３?ｌｊｘｇ／ｍｌ顺铂作用后胃癌细胞不同日桐点上皮间质化转变??标志蛋白Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｎ－ｃａｄｈｅｒｌｎ蛋白表达水平的变化??？？??嫌?１名１?？＊?＿?ＯＳ，?Ｍ??钧?Ｉ?Ｉ?ａｗ?《?—＂，＾—ｍ?）?Ｊ＿?ａ?〇ｈ??ｔ?｜?ａｍ?＊〇４－?ｉ?＿?凾?ａ，２ｈ??ｔｕ－?，４?１?＿２相?？?Ｈ?■?■?＿２４ｈ??ｈ?ｈ?Ｍ?■■??ｖ?ｏ．ｏ－Ｌ－Ｍ——ＵＪ————Ｗ—?ｖ?ｏｏ－Ｌ－ＬＪ——ＵＪ——＾—＾―??Ｗ?Ｏｈ?１２ｈ?２４ｈ?３６ｈ?２?Ｏｔｉ?１２ｈ?２４ｈ?３６ｈ??图４?ｌｐｇ／ｍｌ顺铂作用后胃癌细胞不同时间点上皮间质化转变标志蛋白??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表达水平的变化??以上细胞形态学观察和Ｗｅｒｓｔｅｎ?ｂｌｏｔ的结果表明，顺铂可诱导胃癌细胞发生??上皮－间质化转变。??３．３顺铂能促进胃癌细胞迁移和侵袭??３．３．１顺铂对胃癌细胞迁移能力的影响??划痕结果显示：对照组胃癌细胞ＢＧＣ?８２３在划痕后３６?ｈ的划痕愈合度是??０．３３１±０．００３?（结果重复三次，且／＞＜０．０５），１略／ｍｌ顺铂组在划痕３６ｈ后的划痕??愈合度是〇．６１２±０．０２８８７?（结果重复三次，且Ｐ＜０．０５），与对照组相比，顺铂组??１９??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Microfluidic three-dimensional biomimetic tumor model for studying breast cancer cell migration and invasion in the presence of interstitial flow[J]. Chao Song,Dan Gao,Tianying Yuan,Yongli Chen,Liping Liu,Xiaowu Chen,Yuyang Jiang. Chinese Chemical Letters. 2019(05)
[2]循环肿瘤细胞上皮间质转化的研究进展[J]. 真德智,周世杰,刘志东,李云松. 医学综述. 2016(04)
[3]Targeting the PI3K/Akt signaling pathway in gastric carcinoma: A reality for personalized medicine?[J]. Shikha Satendra Singh,Wei Ney Yap,Frank Arfuso,Shreya Kar,Chao Wang,Wanpei Cai,Arunasalam M Dharmarajan,Gautam Sethi,Alan Prem Kumar. World Journal of Gastroenterology. 2015(43)
[4]VEGF与消化系肿瘤关系的研究新进展[J]. 张芸,赵晶,杜雅菊. 世界华人消化杂志. 2011(26)
[5]胰腺癌患者外周血VEGF和endostatin表达及意义[J]. 闫长青,刘三光,戚诚,张建生,王文斌. 中国肿瘤临床与康复. 2011(04)
[6]Recent advances in chemotherapy for advanced gastric cancer[J]. Jong Gwang Kim,Ho Young Chung,Wansik Yu. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2010(07)
[7]细胞外基质降解相关因子与宫颈癌[J]. 王永欣,周家德. 安徽医药. 2010(06)
[8]选择性阻断异常Wnt信号通路对肝癌细胞生长及侵袭的影响[J]. 江颖,周信达,刘银坤,黄晓武,孙瑞霞,张春晖,陆维祺,朱隽,罗文杰,张华. 复旦学报(医学版). 2010(02)
[9]VEGF与MMP-2在胃腺癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭转移的相关性研究[J]. 刘琳,熊永炎,田素芳. 肿瘤防治研究. 2004(01)
[10]Imbalance between expression of matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in invasiveness and metastasis of human gastric carcinoma[J]. Sheng Zhang Hua Lin Department of Pathology,The First Affiliated Hospital,Fujian Medical University,Fuzhou 350005,Fujian Province,China Li Li Jian-Yin Lin Department of Molecular Medicine,Fujian Medical University,Fuzhou,350004,Fujian Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2003(05)
本文编号：3127867
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